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国内刊号:45-1381/S
国际刊号:2095-1191
发布日期:
作者:崔智昊, 纪月鑫, 龙潜, 孔秀东, 耿富豪, 童桂香, 李琦, 黄世昆, 韦友传, 韦信贤,
关键词:吉富罗非鱼, 罗非鱼湖病毒(TiLV), 干扰素a3(IFNa3), 干扰素刺激基因(ISGs), 免疫刺激,
【目的】明确吉富罗非鱼干扰素a3(IFNa3)基因的结构特征及组织表达模式,以及聚肌胞苷酸Poly(I:C)刺激和罗非鱼湖病毒(TiLV)感染后的表达变化,并探究IFNa3基因对干扰素刺激基因(ISGs)及TiLV复制的影响,为科学制定罗非鱼养殖疾病控制策略提供理论依据。【方法】克隆吉富罗非鱼IFNa3基因及进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR检测IFNa3基因在健康吉富罗非鱼组织中的表达分布及Poly(I:C)刺激和TiLV感染后的表达变化,并通过过表达和敲降基因试验检测吉富罗非鱼IFNa3基因对ISGs表达及TiLV复制的影响。【结果】吉富罗非鱼IFNa3基因开放阅读框(ORF)长度为570 bp,共编码189个氨基酸残基。吉富罗非鱼IFNa3蛋白含有1个IFabd结构域,具有Ⅰ型IFN典型的结构特征。吉富罗非鱼IFNa3氨基酸序列与其他硬骨鱼类Ⅰ型IFNa3氨基酸序列的相似性为70.3%~83.5%,其中与伯氏妊丽鱼IFNa3氨基酸序列的相似性最高(83.5%)。IFNa3基因在健康吉富罗非鱼的脾脏、肝脏、脑、鳃、肠道、肌肉、心脏及头肾等组织中均有表达,以鳃组织中的相对表达量最高;经Poly(I:C)刺激和TiLV感染后,吉富罗非鱼IFNa3基因在鳃、头肾和脾脏等组织中的表达均呈上调表达,且呈现“早期升高、随后回落”的时序变化特征。在罗非鱼脑细胞(TiB)中过表达IFNa3基因,能极显著上调STAT1、ISG15和Mx基因的表达(P<0.01,下同),而TiLV-S10基因相对表达量极显著降低;通过siRNA敲降IFNa3基因表达后,TiLV-S10基因相对表达量极显著上升,而STAT1、ISG15和Mx基因的表达极显著下调。【结论】吉富罗非鱼IFNa3具有鱼类Ⅰ型IFN典型的结构特征,受免疫刺激后在鳃、头肾和脾脏等组织中均呈上调表达,通过激活JAK-STAT信号通路并诱导下游多种ISGs表达,在细胞水平上抑制TiLV复制,进而在吉富罗非鱼抗TiLV感染的先天免疫应答中发挥关键作用。
来源:2025年第12期
《南方农业学报》期刊编辑部
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