南方农业学报杂志

南方农业学报杂志2021年第12期

• 漆酶基因在柑橘褐斑病发生过程中的表达模式分析

  龚意辉, 吴志蒙, 李论, 彭淑君, 李鹏, 陈致印,

  【目的】克隆柑橘漆酶基因（CsLAC）并分析其表达规律，为进一步完善柑橘褐斑病的发生机制提供理论依据。【方法】以甜橙为试验材料，利用液相色谱—质谱联用（LC-MS）技术分析柑橘褐斑病发生过程中主要酚类化合物的变化，并采用实时荧光定量PCR分析漆酶基因在柑橘褐斑病发生过程中的表达规律。【结果】PE包装明显降低甜橙果实褐斑指数，利用LC-MS技术在甜橙果皮中共检测到1191个差异离子，共鉴定出18种酚类物质，其中没食子酸（Gallic acid）、儿茶素（Catechin）、表没食子儿茶素（Epigallocatechin）和原花青素B2（Procyanidin B2）的含量在果实贮藏期间呈下降趋势。成功克隆出7个柑橘漆酶基因，CsLAC4、CsLAC6、CsLAC11、CsLAC12、CsLAC13、CsLAC15和CsLAC17全长片段长度分别为1674、1716、1689、1740、1740、1713和1743bp，分别编码557、571、562、579、579、570和580个氨基酸残基，与参考序列的相似性分别为99.88%、99.83%、99.70%、99.71%、99.60%、99.59%和99.89%。系统发育进化树显示，CsLAC15与荔枝LcLAC的氨基酸序列相似性较高（64.7%），CsLAC12与苹果MdLAC7的氨基酸序列相似性较高（65.7%）。氨基酸保守序列结果表明柑橘漆酶氨基酸序列含有漆酶的3个典型铜离子结构域，分别为Cu-oxidase-3、Cu-oxidase-1和Cu-oxidase-2。CsLAC4、CsLAC6、CsLAC11和CsLAC17在甜橙果实贮藏期间呈上调表达，CsLAC12和CsLAC15在果实贮藏期间总体上呈下调表达。【结论】结合甜橙果皮褐斑与CsLAC表达量的关系，推测CsLAC6的大量上调表达可能对柑橘果皮褐斑形成起促进作用。

• 澳洲坚果MiSTPP6基因克隆及低温胁迫下表达分析

  蔡元保, 杨祥燕, 李季东, 黄思婕, 李穆, 巫辅民,

  【目的】克隆澳洲坚果丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶（PP1）家族基因（MiSTPP6），并分析其不同组织及低温胁迫下的表达模式，为澳洲坚果PP1家族基因的抗寒分子机制提供理论依据。【方法】基于澳洲坚果转录组测序结果，利用RT-PCR技术克隆MiSTPP6基因，对其序列进行生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR检测其在不同组织及低温胁迫下的表达情况。【结果】从澳洲坚果中克隆获得MiSTPP6基因（GenBank登录号为MT374553），其cDNA全长2129bp，最大的阅读框（ORF）长度为948bp，编码315个氨基酸残基，含有PP1蛋白家族的典型结构域（MPP_PP1_PPKL）和特征性序列（LRGNHE）。MiSTPP6蛋白为稳定的亲水性蛋白，以丝氨酸磷酸化为主，可能定位于细胞质，属于非分泌型蛋白或膜蛋白，与已知植物PP1蛋白的氨基酸序列具有很高的相似性。MiSTPP6蛋白的二级结构由α-螺旋(占40.00%)、无规则卷曲(占32.38%)、延伸链（占18.41%）和β-转角（占9.21%），其三级结构与模板蛋白4v0u.1.A的结构相似度为80.60%，GMQE值为0.89。MiSTPP6基因在根、茎、叶、刚开放的小花和谢花后30~45d的小果中均有表达，其中，MiSTPP6基因在刚开放的小花中的相对表达量最高。4 ℃低温胁迫后0.5~24.0h，MiSTPP6基因在澳洲坚果苗期叶片中的相对表达量较对照明显下调，整体上呈持续下降的趋势。【结论】MiSTPP6属于PP1家族基因，具有组织表达特异性，可能在澳洲坚果抗寒分子机制中发挥重要的调控作用。

• 卵形鲳鲹生长抑素家族基因的全基因组鉴定及组织表达特征分析

  余艳玲, 冯鹏霏, 潘传燕, 林勇, 宋漫玲, 张永德, 罗洪林,

  【目的】明确卵形鲳鲹生长抑素（SST）家族基因的种类及其组织表达特征，为进一步揭示SST家族基因在其生长发育过程中的作用机制打下基础。【方法】采用HMMER 3.1对卵形鲳鲹全基因组数据进行搜索，然后通过Pfam、SMART及NCBI CDD等数据库确认搜索获得的基因是否属于SST家族基因；采用ProtParam和PSORT等在线软件进行生物信息学分析，并以实时荧光定量PCR检测SST家族基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况。【结果】从卵形鲳鲹全基因组中共鉴定出4个SST家族基因（SST1、SST3、SST5和SST6），分别编码122、127、106和110个氨基酸残基，对应的编码蛋白分子量介于12249.3~14316.1Da，理论等电点（pI）介于6.51~7.43，均定位于细胞外。4个卵形鲳鲹SST基因结构较简单且相似，均包含2个外显子和1个内含子；SST1和SST3基因位于7号染色体上，SST6和SST5基因则分别位于8号和23号染色体上；4个卵形鲳鲹SST氨基酸序列相似性的平均值为33.42%，以SST5氨基酸序列与SST6氨基酸序列的相似性最高（39.78%），SST3氨基酸序列与SST5氨基酸序列的相似性最低（28.16%）。SST家族基因在卵形鲳鲹脑、胃、性腺和肌肉等组织中均有不同程度的表达，SST1、SST3和SST6基因在脑组织中显著高表达（PSST3、SST5和SST6基因在卵形鲳鲹卵巢中的相对表达量均显著高于在精巢中的相对表达量。【结论】从卵形鲳鲹基因组中鉴定出4个SST家族基因（SST1、SST3、SST5和SST6），其表达分布存在组织特异性和种属特异性，可能介导卵形鲳鲹的神经调节、性腺发育及性二型性等多种生理功能，且不同物种的SST基因功能可能存在差异。

• 马氏珠母贝杂交家系生长性状与遗传参数分析

  邹杰, 彭慧婧, 郑德斌, 张守都,

  【目的】探究不同杂交策略下马氏珠母贝二元杂交子代的生长性状和养殖存活情况，为广西马氏珠母贝群体杂交育种配套系构建及选择育种提供参考依据。【方法】以马氏珠母贝海选1号（H）自育F4代群体和北海野生群体（Y）自繁F1代群体为亲本，通过二元杂交构建36个正反杂交家系，并以H亲本和Y亲本的自繁群体F1代分别构建对照群组（PH和PY）；各群组经海区养殖14个月后采集壳长（SL）、壳高（SH）、壳宽（SW）和体质量（BW）等数据，利用混合线性模型（动物模型）进行生长性状遗传参数估计。【结果】在H（♂）×Y（♀）杂交子代中，SL、SH、SW和BW的遗传力（h2）分别为0.241、0.149、0.220和0.062，遗传相关系数（γg）范围为0.894~0.964，表型相关系数（γp）范围为0.558~0.865；在Y（♂）×H（♀）杂交子代中，SL、SH、SW和BW的h2分别为0.110、0.156、0.121和0.067，γg范围为0.981~0.989，γp范围0.603~0.881；2个杂交子代的生长性状表现为中低遗传力，且遗传相关高于表型相关。Y（♀）和Y（♂）群体的一般配合力（GCA）较高，说明更适合用于杂交配套；H（♂）×Y（♀）杂交子代中SL、SH和SW的特殊配合力（SCA）相对较高，且均为中低遗传力。在2个杂交子代中，4个生长性状的杂种优势分别为-0.02%~2.82%和-0.03%~0.27%，均以SL的杂种优势最高、SW的杂种优势最低。在H（♂）×Y（♀）杂交子代中SL、SH和BW等3个生长性状的杂种优势家系率为50.00%~72.22%，优势家系选择率≥50.00%；养殖存活性状的超亲优势家系率为19.44%，杂种优势家系率为61.11%，2个杂交子代和PY群体均表现出优势存活性状。【结论】H（♂）×Y（♀）杂交子代具有生长性状优势，Y（♂）×H（♀）杂交子代具有存活性状优势，2个杂交子代均存在综合杂种优势，可进行一般杂交育种应用；北海野生群体亲本的GCA较高，其SL和SH的遗传力及与BW的遗传相关也相对较高，在进行广西马氏珠母贝群体杂交制种时可考虑以野生群体子代作为专门化亲本来源，且对2龄亲本性状选择上宜优先考虑SL和SH。

• 珠海外伶仃人工鱼礁对鱼类资源养护效果初步评估

  冯雪, 范江涛, 孙晓, 洪洁漳, 陈丕茂,

  【目的】探索珠海外伶仃人工鱼礁海域鱼类资源增殖效果及礁区生境动态变化，为人工鱼礁的合理建设和规划提供科学依据。【方法】分别于2006年8月及2009年8月、2016年5月，采用拖网调查方式对珠海外伶仃人工鱼礁区附近海域进行本底和跟踪调查，分析游泳生物种类组成、鱼类资源密度和丰度变化，确定优势种和群落特征指数，并通过礁区和对比区生态能质变动趋势分析礁区生态效应和结构稳定性。【结果】调查共采集游泳生物71种，经鉴定隶属于8目34科46属，其中鱼类36种，占50.70%；甲壳类32种，占45.07%；软体类3种，占4.23%。礁区鱼类占比从39.13%提高到63.89%。珠海外伶仃人工鱼礁区附近海域鱼类资源密度和丰度在投礁后明显增加，礁体的投放吸引了中下层鱼类聚集。根据优势种分析结果可知，中下层鱼类为人工鱼礁区附近海域主要优势类群。短吻鲾和二长棘鲷等鱼类成为礁区及其临近海域的绝对优势种类，本底调查中的优势种如黄斑蓝子鱼等大鳞舌鳎等优势度降低。群落特征指数T检验结果表明，礁区与对比区丰富度指数为极显著差异（PP<0.05）。【结论】人工鱼礁区建设对有效影响范围内鱼类资源恢复具有明显促进作用，以人工鱼礁为基础、资源修复为关键的海洋牧场建设，是未来发展的趋势和重点方向。

• 基于Rag1基因序列的黄河高原鳅群体遗传结构分析

  谢佳燕, 颜渊, 杨钰慧, 闫达中, 吴菁,

  【目的】明确不同水域黄河高原鳅群体免疫基因多样性水平和遗传组成，为黄河高原鳅自然种质资源现状的评估、保护及合理开发提供理论依据。【方法】采集黄河中上游不同河段的黄河高原鳅自然群体［青海循化（XH）群体、青海大通（DT）群体及甘肃景泰（JT）群体］样品，基于重组激活基因（Rag1）序列对不同黄河高原鳅群体的遗传多样性水平和遗传组成差异进行研究。【结果】在不同黄河高原鳅群体的Rag1基因序列中共检测到8个单倍型（H1~H8），其中有5个单倍型（H1、H2、H3、H4和H6）在2个以上的群体间相互共享，尤其是单倍型H1、H4和H6在所有群体中均有分布。黄河高原鳅总群体的单倍型多态性为0.742，核苷酸多态性为0.003，在3个黄河高原鳅群体中共检测到28个多态位点。不同黄河高原鳅种群间的单倍型多态性范围在0.575~0.872，核苷酸多态性范围在0.002~0.003。XH群体与JT群体间的遗传分化系数（Fst）为0.037，XH群体与DT群体间的Fst为-0.041，JT群体与DT群体的Fst为-0.022；不同黄河高原鳅群体的分子遗传变异主要发生在群体内（占99.56%）。单倍型网络结构图及NJ聚类树和ML聚类树均显示，不同黄河高原鳅自然种群个体相互混合在一起，未按照采样河段地理位置形成明显的聚类结构，即黄河高原鳅不同单倍型间呈现混合的分布格局。【结论】黄河高原鳅群体遗传多样性水平中等，不同自然群体间的遗传多样性水平存在一定差异，但并未检测到显著的遗传差异，建议在野外进行管理和保护时仍可视为一个整体。

• 文蛤CDK7基因克隆及其在不同品系生长发育中的表达分析

  李秋洁, 陈爱华, 陈素华, 吴杨平, 张雨, 曹奕, 张志东, 田镇,

  【目的】掌握文蛤（Meretrix meretrix）细胞周期蛋白依赖性激酶7（CDK7）基因（MmCDK7）的时空表达及在不同品系生长发育中的表达规律，从分子水平探究红壳色文蛤新品系的生长优势，为筛选文蛤生长相关基因及揭示其生长发育机制提供理论依据。【方法】利用RACE克隆MmCDK7基因cDNA序列，通过BLAST、ScanProsite、NetPhos3.0 server及ExPASy等在线软件进行生物信息学分析，使用实时荧光定量PCR检测MmCDK7基因在文蛤不同组织和不同发育时期的表达情况，并比较同一养殖条件下红壳色文蛤（简称红文蛤）和黄壳色文蛤（简称黄文蛤）的壳长、壳长相对增长率及MmCDK7基因表达差异。【结果】MmCDK7基因cDNA序列全长1296bp，其中，5'端非编码区（5'-UTR）为83bp，3'端非编码区（3'-UTR）为196bp，开放阅读框（ORF）为1017bp，共编码338个氨基酸残基。MmCDK7蛋白分子量约38.32 D，理论等电点（pI）为8.78，包含丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域（S_TKc）、酪氨酸激酶催化结构域（TyrKc）及与细胞周期蛋白结合有关的激酶结构域NRTALRE；而S_TKc结构域中有包含蛋白激酶ATP结合位点区域、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活化位点区域及T-loop环。MmCDK7氨基酸序列与虾夷扇贝CDK7氨基酸序列高度同源，其相似性为75.00%；基于CDK7氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示，文蛤与中国真蛸、长牡蛎、厚壳贻贝及虾夷扇贝等软体动物先聚为一支。MmCDK7基因在性腺、水管、外套膜和肝胰腺等组织中均有表达，以性腺中的相对表达量显著高于其他组织（PMmCDK7基因在2种文蛤的8个发育时期均有表达，均以多细胞时期的相对表达量最高。在同一养殖条件下，除9月18日外，其他采样时间点均表现为红文蛤的壳长显著大于黄文蛤，红文蛤相对于黄文蛤的壳长增长率在2.79%~32.37%；除11月15日和11月30日外，其他采样时间点均表现为红文蛤的MmCDK7基因相对表达量显著高于黄文蛤的相对表达量。【结论】MmCDK7基因属于CDK家族成员，在细胞分裂旺盛的性腺及多细胞时期的相对表达量最高，且在生长速度较快红文蛤中的相对表达量多数情况下显著高于黄文蛤，故推测MmCDK7基因参与调控文蛤的早期生长发育过程。

• 黑鲷催乳素基因PRL1和PRL2在急性盐胁迫环境下的表达分析

  林李泉, 韦信贤, 林国荣, 谭红连, 黄婷, 刘明珠, 杨艳, 童桂香,

  【目的】明确催乳素基因（PRL1和PRL2）在黑鲷不同组织及不同盐度胁迫下的表达模式，为黑鲷养殖过程中最适盐度范围的确定提供参考依据。【方法】通过RT-PCR扩增黑鲷PRL1和PRL2基因，以ExPASy、NetNGlyc及SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析，并采用实时荧光定量PCR检测PRL1和PRL2基因在黑鲷不同组织及不同盐度胁迫下的表达情况。【结果】黑鲷PRL1基因开放阅读框（ORF）全长639bp，共编码212个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为23.32kD，理论等电点（pI）为6.70；黑鲷PRL2基因ORF全长750bp，共编码249个氨基酸残基，其编码蛋白分子量为28.31kD，pI为8.37。黑鲷PRL1和PRL2蛋白均由1个为信号肽结构域和1个为Hormone 1结构域组成；黑鲷PRL1蛋白二级结构中α-螺旋占69.34%、无规则卷曲占30.66%，包含1个糖基化位点及37个磷酸化位点；黑鲷PRL2蛋白二级结构中α-螺旋占67.07%、无规则卷曲占32.93%，包含1个糖基化位点及21个磷酸化位点。黑鲷PRL1和PRL2基因在12个待检测组织中均有表达，且均以脑组织中的相对表达量最高，显著高于其他组织中的相对表达量（PPRL1基因在胁迫4h开始显著上调，黑鲷PRL2基因在胁迫8h开始极显著上调（PPRL1和PRL2基因在胁迫72h时其相对表达量均显著低于对照组。【结论】低盐胁迫能促进黑鲷PRL1和PRL2基因的表达，高盐胁迫则抑制黑鲷PRL1和PRL2基因的表达，即黑鲷PRL1和PRL2基因在其适应淡水环境的过程中发挥重要调节作用。

• 克氏原螯虾养殖群体的SLAF测序及遗传多样性分析

  刘亚楠, 刘洁, 魏上, 李亚琳, 李明, 肖俊, 邱高峰, 陆颖,

  【目的】探究克氏原螯虾养殖群体内和群体间的遗传多样性，为引种和群体间杂交以改善养殖群体种质提供参考依据。【方法】以湖北、江西、安徽、浙江和江苏5省克氏原螯虾主产地14个养殖群体的120个个体为研究对象，采用简化基因组测序技术——特定区点扩增片段测序技术（SLAF-seq）进行基因组测序，获得基因组SNP基因型数据，构建群体系统发育进化树，并进行群体结构、主成分和遗传多样性分析。【结果】共鉴定出741147个单核苷酸多态性（SNP）位点，群体系统进化分析表明，14个群体的种源主要来自浙江金华和江苏宿迁，然后再向各地引种迁徙。群体结构分析结果与系统进化分析结果相吻合。主成分分析结果揭示了安徽长丰和滁州群体、湖北荆州龙口及和平2个群体，以及浙江东阳群体等5个群体与其他群体间存在相对较远的亲缘关系，是杂交引种的潜在种源。群体遗传多样性分析显示，14个群体的Ho介于0.2171~0.2801，平均值为0.2476，He介于0.3424~0.3598，平均值为0.3534，PIC介于0.2750~0.2878，群体间相差不大，接近0.25，各群体均接近遗传多样性中等水平的下限。【结论】14个克氏原螯虾养殖群体内的遗传多样性较低，群体间的亲缘关系较接近，品种单一、长期内交迹象明显。通过群体的基因组重测序，能以较低的成本实现对养殖群体遗传多样性的定期监测。

• 干扰COX2基因对罗氏沼虾生长及能量代谢酶活性和基因表达的影响

  贾垂攀, 戴习林, 尹丹慧, 黎兰诗, 梁震宇, 成良峰, 陈昕,

  【目的】从能量代谢的角度探索罗氏沼虾生长缓慢的原因，为分析和解决罗氏沼虾生长缓慢问题提供参考。【方法】利用合适浓度的siRNA抑制罗氏沼虾肝胰腺和肌肉中COX2基因的表达，分析肝胰腺和肌肉中线粒体呼吸链相关基因表达量和酶活性以及ATP含量的变化；通过持续抑制罗氏沼虾COX2基因的表达，分析其对罗氏沼虾生长的影响。【结果】siRNA对罗氏沼虾线粒体编码的COX2基因表达有抑制作用，在一定浓度范围内，随着siRNA浓度的增加抑制的作用越明显，超过一定的浓度范围的siRNA抑制作用不明显，浓度为2.0μg/g的siRNA与0.8、1.5、3.0μg/g的siRNA的抑制作用相比效果最好。罗氏沼虾注射siRNA后，肝胰腺和肌肉中的COX2基因表达量下调，ND1和ATP6基因表达量随之下调，COX、ATP合酶、CCR和ND的酶活性显著下降（PCOX2基因的表达，随着siRNA注射次数的增加，抑制COX2基因表达的作用时间也增加，在注射4次2.0μg/g siRNA虾的肝胰腺和肌肉中，COX2、ND1和ATP6的基因表达量持续下调的时间最长，COX、ATP合酶、CCR和ND的酶活性能长期保持在显著低于对照组的水平，ATP含量也显著低于对照组。随着肝胰腺和肌肉中COX2基因表达被抑制时间的增加，罗氏沼虾的体长与体重增加量越小，养殖28d后，注射1次siRNA和注射4次siRNA的虾的体重净增长分别为0.59和0.34g。【结论】当参与ATP合成的酶的基因表达量和酶活性长时间受到抑制时，会抑制罗氏沼虾的生长。

• 点带石斑鱼脑组织和视网膜中神经型一氧化氮合成酶的分布与定位

  白帆, 孙敬锋, 张胜根, 韩卓然, 吕爱军, 胡秀彩,

  【目的】研究点带石斑鱼脑组织和视网膜中的一氧化氮（NO）含量及神经型一氧化氮合成酶（nNOS）分布与活性，为深入揭示NO在点带石斑鱼神经系统中的作用机制打下基础。【方法】采用NADPH-d组织化学染色法、免疫组织化学法、蛋白免疫印迹（Western blotting）及Griess试剂法，对点带石斑鱼脑组织和视网膜中nNOS的分布与活性及NO含量进行分析。【结果】经NADPH-d组织化学染色后，一氧化氮合成酶（NOS）阳性物质呈蓝色。在点带石斑鱼大脑中，NOS阳性物质位于神经元和神经纤维；在小脑中，NOS分布在颗粒层的颗粒细胞、分子层的神经纤维和浦肯野细胞层的浦肯野细胞；在视网膜中，NOS分布于色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。经免疫组织化学染色后，nNOS阳性物质呈深棕色。在大脑中，nNOS存在于神经元和神经纤维；在小脑中，nNOS分布在颗粒层、分子层和浦肯野细胞层；在视网膜中，nNOS分布在色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。Western blotting检测结果显示，点带石斑鱼脑组织和视网膜中的nNOS在显色后的硝酸纤维素膜上均出现3条免疫印迹条带，对应分子量分别为80、120和130kD。NO含量在点带石斑鱼脑组织和视网膜中分别为17.601±1.743和13.624±1.249µmol/L，nNOS活性在脑组织和视网膜中分别为38.070±3.047和23.748±2.860U/mg。【结论】在点带石斑鱼脑组织和视网膜中均存在nNOS，推测nNOS在点带石斑鱼脑神经及视神经系统生理活动中发挥重要作用。脑组织中的NO含量和nNOS活性均显著高于视网膜，是由于脑组织作为重要的中枢神经，对机体生理功能起重要调节作用。

• 副溶血弧菌对罗氏沼虾肝胰腺和鳃组织中呼吸相关酶活性及抗氧化酶基因表达的影响

  孔嘉明, 戴习林, 黎兰诗, 梁震宇,

  【目的】探讨副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）对罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）肝胰腺和鳃组织中呼吸相关酶活性和抗氧化酶基因的影响，以期为罗氏沼虾免疫机理研究和病害防治提供参考依据。【方法】选取规格整齐、健康的罗氏沼虾，分别注射PBS溶液（对照组）和副溶血弧菌（试验组），在第1、3、6、12、24、48、72和96h统计累计存活率，并取肝胰腺和鳃组织进行呼吸相关酶活性及抗氧化酶相关基因表达测定。【结果】罗氏沼虾感染副溶血弧菌后，随着时间的推移，其累计存活率逐渐下降，在96h累计存活率为72%。感染副溶血弧菌后，其肝胰腺中的ATP合酶、细胞色素C氧化酶和NADH脱氢酶活性随时间延长均呈先降低后上升最后趋于对照组水平的变化趋势，且在6~24h 3种酶活性均显著低于对照组（PSOD）基因、过氧化氢酶（CAT）基因及谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）基因相对表达量呈先升高后降低再升高的变化趋势。在鳃组织中，ATP合酶、细胞色素C氧化酶和NADH脱氢酶的活性随着感染时间的延长呈先降低后上升至趋于对照组水平，在6~72h 3种酶活性不同时间段表现出显著下降趋势；ROS含量则呈先上升后下降的变化趋势；SOD、CAT和GPX基因相对表达量呈先升高后降低再升高的变化趋势，且均在感染6h显著上调至最大值，其中GPX基因相对表达量在12~48h显著下调低于对照组，并在72h逐渐上调。【结论】副溶血弧菌感染罗氏沼虾后对肝胰腺和鳃组织中的呼吸相关酶及抗氧化酶基因产生显著影响，ROS水平呈上升趋势。虽然罗氏沼虾能通过自我调节呼吸相关酶和抗氧化酶基因促使机体抵御病原体入侵，但超过机体自我调节的限度时会对机体造成损伤。

• 白条双锯鱼胚胎及仔稚鱼发育形态学观察

  吕爽, 夏苏东, 高燕, 张丹, 尤宏争, 牟希东, 孙金辉, 姜巨峰, 毛天奇,

  【目的】观察记录白条双锯鱼从受精到孵化的胚胎发育及早期个体发育规律，为海葵鱼的人工繁育提供科学依据。【方法】以人工海水为养殖用水，在水温（27±1）℃、盐度27‰的条件下，白条双锯鱼自然产卵，经紫外灯照射杀菌后进行人工孵化及仔稚鱼培育，在显微镜下定期观察记录受精卵及仔稚鱼发育过程的形态特征变化，并手绘制图。【结果】白条双锯鱼受精卵整体上呈长条状，橙红或粉红色，轮廓类似葫芦状的椭圆形，长径2.40~2.60mm、短径0.90~1.20mm。依据受精卵的分裂、分化及发育形态，可将白条双锯鱼胚胎发育过程划分为：卵裂前期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、体节期、翻转期、血管形成期和器官形成期。白条双锯鱼受精卵经8~10 d的孵化时间破膜，初孵仔鱼体长4.10~4.50mm；孵出第1d即可开口摄食轮虫，孵出后7d左右由仔鱼期进入稚鱼期，尾鳍、臀鳍和背鳍彼此分离，此时的体长达7.67±0.48mm；至孵化后第20d开始出现第一道白色条纹；孵化后第30d仔稚鱼体色由黑色转为暗红色，并开始长出第二道白色条纹；从孵化后第50 d第二道白色条纹开始褪去；至孵化后第60d其体色开始转为红色。【结论】白条双锯鱼胚体发育时间为8~10d，相较于双锯鱼属其他品种需要更长的孵化时间，究其原因是白条双锯鱼受精卵尺寸更大。此外，孵化环境温度对受精卵的发育时间有明显影响，在适当范围内，环境温度越高白条双锯鱼受精卵发育速度越快。白条双锯鱼仔稚鱼饲养宜分为3个阶段喂养不同类型的饵料，以保证仔稚鱼的高成活率。

• 2种产卵类型翘嘴鲌肌肉营养成分分析与评价

  喻亚丽, 李清, 何力, 甘金华, 毛涛, 李佩, 陈见, 孙艳红, 魏辉杰, 王贵英,

  【目的】分析粘性卵翘嘴鲌与漂浮性卵翘嘴鲌肌肉品质差异，为翘嘴鲌营养品质鉴定及其养殖提供参考依据。【方法】依据相关标准分别对2种翘嘴鲌肌肉基本营养成分、氨基酸、脂肪酸、质构特性和矿物元素含量进行测定，并评价其营养价值。【结果】粘性卵翘嘴鲌肌肉的灰分含量（1.16 g/100 g）显著低于漂浮性卵翘嘴鲌（1.26 g/100 g）（PP>0.05，下同）。2种翘嘴鲌肌肉中均检测出17种氨基酸，其中粘性卵翘嘴鲌的谷氨酸（Glu）、精氨酸（Arg）含量及鲜味氨基酸总量（∑DAA）显著低于漂浮性卵翘嘴鲌，必需氨基酸指数（EAAI）低于漂浮性卵翘嘴鲌；2种翘嘴鲌的第一限制性氨基酸均为蛋氨酸+胱氨酸（Met+Cys），第二限制性氨基酸均为缬氨酸（Val）。粘性卵翘嘴鲌肌肉中检测出15种脂肪酸，漂浮性卵翘嘴鲌肌肉中检测出17种脂肪酸，其中粘性卵翘嘴鲌的二十碳一烯酸（C20：1）相对含量（0.85%）显著高于漂浮性卵翘嘴鲌（0.61%），而α-亚麻酸（C18：3）的相对含量（1.93%）显著低于漂浮性卵翘嘴鲌（2.62%）。质构特性方面，粘性卵翘嘴鲌肌肉硬度、弹性和咀嚼性低于漂浮性卵翘嘴鲌，但回复性高于漂浮性卵翘嘴鲌；粘性卵翘嘴鲌肌纤维长径和短径大于漂浮性卵翘嘴鲌。2种翘嘴鲌肌肉矿物元素含量丰富，粘性卵翘嘴鲌肌肉中硒含量（0.06mg/kg）显著低于漂浮性卵翘嘴鲌（0.11mg/kg），钙、镁、锌和铁含量在2种翘嘴鲌间无显著差异。【结论】粘性卵和漂浮性卵翘嘴鲌肌肉中氨基酸和脂肪酸含量丰富，具有高蛋白的特点，但漂浮性卵翘嘴鲌肌肉营养价值更高，口感更好。

• 甘蓝BobHLH121基因克隆、亚细胞定位及表达分析

  秦文斌, 山溪, 张振超, 姚悦梅, 戴忠良, 秦岭,

  【目的】克隆甘蓝bHLH转录因子（BobHLH121）基因，分析其在不同组织及低温胁迫下的表达模式，为深入研究bHLH转录因子在甘蓝低温响应中的作用机理提供理论参考。【方法】克隆BobHLH121基因编码区（CDS）序列，利用生物信息学软件进行预测分析，并构建pCAMBIA1300-FaFKF1-GFP融合表达载体，通过农杆菌介导转染烟草表皮细胞，观察荧光信号以确定蛋白亚细胞定位情况。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测BobHLH121基因在低温胁迫下的相对表达量。【结果】BobHLH121基因CDS长度为1367bp，定位于C06染色体上，其编码311个氨基酸，蛋白分子量为34.89 kD，理论等电点（pI）为5.42，不稳定系数为52.29，疏水性平均系数为-0.733，说明该蛋白为不稳定的亲水性蛋白，且呈酸性，定位于细胞核。BobHLH121蛋白的二级结构主要由α-螺旋（占30.87%）、延伸链（占9.32%）、β-转角（占2.89%）和无规则卷曲（占56.91%）组成，具有保守的HLH结构域。BobHLH121蛋白与拟南芥（NP_191768.2）、琴叶拟 南 芥（EFH52923.1）、亚 麻 荠（XP_01909381.1）、荠 菜（XP_023638997.1）、油 菜（CDY65446.1）、白 菜（XP_009104362.1）和萝卜（XP_018442860.1）等多种植物bHLH蛋白的氨基酸相似性分别为55.6%、54.8%、52.0%、50.3%、76.4%、73.9%和61.1%。系统发育进化树分析结果显示，BobHLH121与拟南芥（NP_191768.2）和琴叶拟南芥（EFH52923.1）bHLH蛋白在同一小分支上。BobHLH121基因启动子区域存在植物生长发育、非生物胁迫、激素应答和光响应大量的顺式作用元件。BobHLH121基因在叶片的相对表达量显著高于其他组织（PBobHLH121基因的相对表达量较低温处理0h（对照）显著降低，在低温处理24h时急剧升高，显著高于其他处理时间，低温处理48 h时又显著降低，表明该基因可能在低温胁迫下延迟表达。【结论】BobHLH121基因含有bHLH家族典型的HLH保守结构域序列，具有明显的组织表达特异性，可能参与甘蓝叶片的生长发育调控，且响应低温胁迫，可能在甘蓝耐寒性中发挥调控作用。

• 西瓜OSCA基因家族全基因组鉴定及胁迫响应分析

  张瑜, 吴才君, 苏文桢, 周聪, 滕丽姚, 涂志伟, 朱强龙,

  【目的】对西瓜OSCA基因家族进行成员鉴定、系统发育分析以及胁迫响应分析，为揭示西瓜OSCA基因生物学功能和抗逆分子机制提供参考依据。【方法】运用生物信息学的方法从西瓜全基因组数据库中鉴定出西瓜OSCA基因家族成员，根据染色体定位信息进行命名。对基因家族成员染色体位置、基因结构、共线性、启动子、蛋白结构和系统发育等进行全面分析。利用转录组数据和qRT-PCR分析西瓜OSCA基因在胁迫条件下的表达情况。【结果】西瓜OSCA基因家族有10个成员，不均等地分布在6条染色体上。西瓜OSCA蛋白分子量变化范围为24.59~91.97kD，氨基酸数量为214~809aa，多数定位于质膜上。共线性分析结果表明，西瓜OSCA基因在进化过程中发生了片段复制事件。西瓜OSCA基因家族分为三大类群，同一类群成员的外显子一内含子的组成模式、蛋白保守基序排列、蛋白二级结构数量比例和蛋白三级结构模型均相似。西瓜、水稻、番茄和拟南芥的OSCA基因被分为6个亚族，每个亚族均有西瓜OSCA基因分布。西瓜OSCA基因启动子区域含有厌氧诱导、冷胁迫应答、光反应和干旱胁迫应答等多种非生物胁迫响应元件。在干旱、低温和盐胁迫下，西瓜OSCA基因家族各成员表达量均有不同程度变化，其中ClaOSCA3和ClaOSCA5在3种不同胁迫条件下表达量均有显著差异（POSCA基因在进化过程中具有一定保守性，与拟南芥、水稻和番茄OSCA基因存在较近亲缘关系。西瓜OSCA基因家族内部存在功能分化，ClaOSCA3和ClaOSCA5可能是胁迫响应机制中的重要抗逆基因。

• 苦荞FtCAD-1和FtCAD-2基因克隆及组织表达分析

  段迎, 杨晓琳, 蔡苏云, 贺润丽, 尹桂芳, 王艳青, 卢文洁, 孙道旺, 王莉花,

  【目的】克隆苦荞肉桂醇脱氢酶（CAD）基因并分析其组织表达特性，为深入研究CAD基因在苦荞果壳形成中的分子调控机制提供理论依据。【方法】基于苦荞转录组测序结果，从苦荞厚果壳品种云荞1号和薄果壳品种小米荞克隆CAD基因，对其序列进行生物信息学分析，并利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测CAD基因在不同果壳厚度类型（厚果壳苦荞和薄果壳苦荞）不同组织的表达情况。【结果】从薄果壳苦荞和厚果壳苦荞中均克隆获得2条苦荞CAD基因，且这2条基因序列在薄果壳苦荞与厚果壳苦荞中均完全一致，命名为FtCAD-1和FtCAD-2。FtCAD-1基因的开放阅读框（ORF）长度为876bp，编码291个氨基酸残基，为疏水性的稳定酸性蛋白，定位于细胞核和细胞质；FtCAD-2基因的ORF长度为1083bp，编码360个氨基酸残基，为亲水性的稳定酸性蛋白，定位于细胞质。FtCAD-1和FtCAD-2蛋白均具有CAD蛋白3个典型的保守结构域，且不具有跨膜结构域和信号肽，属于非分泌蛋白。FtCAD-1与数据库目标蛋白2cf5.1.B的结构相似度为74.74%，而FtCAD-2与数据库目标蛋白5z0c.1.A的结构相似度为63.03%。FtCAD-1与拟南芥的第一类CAD蛋白（AtCAD4和AtCAD5）的亲缘关系较近；FtCAD-2与拟南芥的第二类CAD蛋白（AtCAD2、AtCAD3、AtCAD6等）的亲缘关系较近。FtCAD-1和FtCAD-2基因均在种仁中的相对表达量最高，且厚果壳苦荞与薄果壳苦荞间无显著差异（P>0.05）。FtCAD-1基因在厚果壳苦荞叶、花和果壳中的相对表达量显著（PPFtCAD-2基因除了在薄果壳苦荞果壳中相对表达量显著高于厚果壳苦荞外，在其他组织中的相对表达量均表现为厚果壳苦荞高于薄果壳苦荞。【结论】FtCAD-1属于第一类CAD基因，具有明显的组织表达特异性，推测其在苦荞木质素生物合成过程中发挥重要调控作用。

• 甜玉米维生素E含量变异及杂种优势分析

  谢利华, 胡建广, 李春艳, 肖颖妮, 李武, 于永涛, 卢文佳, 文天祥, 李高科,

  【目的】分析不同甜玉米杂交种的杂种优势，筛选高维生素E（VE）组合及优异亲本，为高效创制高VE甜玉米品种提供材料基础和理论依据。【方法】采用正相高效液相色谱法（NP-HPLC），对11份不同来源且表型差异明显的甜玉米自交系及其11个杂交种进行VE组分含量测定，并分析其杂种优势，筛选高VE甜玉米材料。【结果】甜玉米自交系及杂交种中的VE组分间含量差异均达极显著水平（PP<0.05）或极显著正相关。11个杂交种VE组分含量的杂种优势主要表现为负向中亲优势，TVE含量的中亲优势变幅为-39.07%~56.97%，超亲优势变幅为-52.44~49.28%。11个杂交种中有4个表现出超亲优势，其中TY6和农宝2021白组配的杂交种粤甜41号、粤甜38号和粤甜35号具有较强的超亲优势，且TVE含量较高。【结论】不同基因型甜玉米间VE组分含量存在明显差异，VE含量的杂种优势主要表现为负向中亲优势；高VE亲本间杂交并不一定能够获得具有强杂种优势的杂交种。要提高甜玉米杂交种VE含量，选择高VE含量尤其是高αT和αT3含量的材料进行组配或许可加速品种培育进程。

• 不同基肥对浙贝母根际土壤养分及其入药品质的影响

  陈群辉, 柯燕萍, 魏祖晨, 赵顺鑫, 周浓, 杜慧慧, 刘正学,

  【目的】研究不同基肥对浙贝母根际土壤养分和入药品质的影响，为浙贝母规范化施肥和品质提升提供科学依据。【方法】以重庆万州浙贝母为试验材料，分别施用有机肥（S1）、复方无机肥（S2）和有机无机复混肥（S3）3种不同基肥，以不施基肥为对照（CK），测定不同处理的浙贝母土壤理化性质、土壤酶活性及浙贝母鳞茎的生物碱、核苷和氨基酸含量，分析3种基肥对浙贝母根际土壤养分和入药品质的影响。【结果】与CK相比，3种施肥处理均可不同程度提高浙贝母根际土壤养分含量和土壤酶活性（多酚氧化酶除外），其中S3处理的土壤全氮、全磷、全钾、速效氮、速效磷、速效钾和有机质含量分别较CK显著提高82.21%、28.01%、69.10%、829.41%、120.97%、175.89%和22.82%（PP<0.01，下同）正相关，而与多酚氧化酶和土壤pH存在极显著负相关。【结论】与单施有机肥或单施含微量元素的复方无机肥相比，有机无机复混肥能显著增加浙贝母的根际土壤养分和入药品质。

• 间作麦冬对茶园土壤理化性质及微生物群落结构的影响

  李奇松, 雷卫星, 刘江西, 朱捷文, 史凌珊, 蔡普默, 张见明, 贾小丽,

  【目的】分析间作麦冬对春季茶园土壤养分、酶活性和微生物群落结构的影响，探讨不同种植模式条件下，茶园土壤环境、微生物群落间的互作机制，为茶园间作模式提供理论依据。【方法】以山地梯田茶园为研究对象，通过16S rDNA高通量测序技术等，分析茶树单作、茶树—麦冬间作及茶园空地土壤（CK）的土壤养分含量、土壤酶活性及细菌群落结构多样性与丰富度差异。【结果】相对于单作，间作麦冬能显著提高茶园土壤含水量与有机质、速效氮、速效磷和速效钾含量（PChujaibacter）、伯克氏菌科未分类菌属（unidentified_Burkholderiaceae），以及放线菌门中的放线菌门未分类菌纲（unidentified_ Actinobacteria）为间作茶园土壤样本的标志性微生物，且相对丰度显著高于CK和单作处理。【结论】茶园间作麦冬可诱导土壤细菌群落结构发生变化，能富集更多参与土壤营养循环和拮抗病原菌的有益细菌，有利于提高土壤养分供给能力和茶树的抗病性。

• 百色芒果主产区果园施肥状况及减施潜力分析

  区惠平, 彭嘉宇, 周柳强, 黄金生, 朱晓晖, 曾艳, 谢如林, 谭宏伟, 雷秋良,

  【目的】调查分析百色芒果主产区果园施肥现状，探究果园化肥减施潜力，为果园的科学合理施肥及芒果产业的绿色发展提供理论依据。【方法】采用实地走访、问卷调查方式，于2020年8—12月调查百色田东县79个代表性芒果园的养分投入状况，并结合文献资料中的肥料推荐施用量，估算芒果园肥料减施潜力。【结果】芒果园以种植台农1号芒和桂热芒82号品种为主，所调查的果农有93.5%施入采果后催梢肥，且施肥时间以9月主（52.2%）；53.3%的果农施入壮果肥，施肥时间集中在3、4和5月；芒果园N、P2O5、K2O养分平均投入量分别为0.54、0.50和0.52kg/株，存在重化肥轻有机肥现象，化肥N、P2O5、K2O平均投入量占果园相应养分总投入量的91.8%、79.6%和97.5%。对比推荐施用量，N、P2O5和K2O养分投入超标样本比例依次为41.6%~53.2%、76.6%~88.3%和19.5%~26.0%。芒果园氮肥相对减肥潜力为7.3%~22.2%，磷肥相对减肥潜力为39.6%~57.7%，钾肥平均施用量未达推荐施用量。【结论】百色芒果园氮磷投入过量，钾肥投入不足、有机肥严重不足问题较普遍，磷肥减施潜力最大。建议增施有机肥和钾肥，适当控制氮磷投入，优化果园养分管理。

• 2种嫁接番茄根系分泌活性物质对番茄青枯病及根际微生物的影响

  刘斯晗, 郑旭阳, 钟川, 王鹏, 阳燕娟, 于文进,

  【目的】鉴定分析嫁接番茄根系分泌物，研究其活性成分对番茄抗青枯病、番茄体内青枯菌及根际微生物数量的影响，为番茄青枯病的防治提供新思路。【方法】以高感青枯病番茄品种粉贝贝（Fb）、高抗青枯病番茄砧木番砧1号（No.1）和茄砧21号（No.21）为试验材料，设自根嫁接（Fb/Fb）、砧穗嫁接（Fb/No.1、Fb/No.21）和砧木自嫁接（No.1/No.1、No.21/No.21）5个嫁接组合。利用气相色谱—质谱联用仪（GC-MS）对嫁接番茄接种青枯菌前后的根系分泌物进行鉴定分析，用筛选出的活性物质对高感病番茄进行灌根处理后接种青枯菌，采用稀释平板法分离测定番茄体内和根际青枯菌及根际微生物数量。【结果】从嫁接番茄根系分泌物中鉴定筛选出邻苯二甲酸二甲酯（DP）和2,6-二叔丁基对甲苯酚（BHT）2种活性物质，其中1.0mmol/L DP与1.0mmol/L BHT混合灌根处理的抗青枯病效果最好，使高感病番茄的青枯病发病率和病情指数显著降至46.7%、42.5（P<0.05，下同）。2种活性物质灌根处理均能使根际微生物总量和细菌数量明显下降；均可降低根际真菌数量，其中BHT的抑制效果更强；均可在发病初期显著抑制放线菌的增殖，且DP的抑制效果强于BHT。【结论】筛选出DP和BHT 2种活性物质，其可通过改善根际微环境、降低植株体内和根际的青枯菌数量而提高番茄对青枯病的抗性。

• 一株侵染掌叶半夏的大豆花叶病毒的全基因组序列测定和vsiRNA特征分析

  胡逸超, 卢晓静, 李璞, 廖咏梅, 何新华, 邹承武, 陈琦,

  【目的】探究侵染掌叶半夏（Pinellia pedatisecta）的大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus，SMV）衍生的干扰小RNA（virus-derived small interfering RNA，vsiRNA）序列特征，为掌叶半夏抵御病毒的作用机制研究提供参考。【方法】以一株来自广西的具有典型病毒病症状的掌叶半夏为材料，取其褪绿斑驳的叶片采用TRIzol法提取总RNA，并进行小RNA深度测序（Small RNA Deep Sequencing）；利用快速扩增cDNA末端（Rapid Amplification of cDNA Ends，RACE）和分段克隆技术获得病毒的全长基因组序列，利用MEGA 7.0将其与有代表性的病毒序列构建系统发育进化树并分析亲缘关系；以克隆测序获得的基因组序列作为参考进行vsiRNA特征分析。【结果】小RNA深度测序共获得4851249条高质量的读段（reads），长度为21、22和24 nt的reads具有较高的丰度，占比分别为33.4%、13.7%和11.3%。该病毒分离物的基因组全长为9735 nt，编码3105个氨基酸，其基因组全序列与SMV HZ1分离物核苷酸序列相似性为86.93%，暂命名为SMV NN；系统发育进化树显示，SMV NN与分离自半夏的SMV HZ1分离物的亲缘关系最近。将vsiRNA定位到克隆测序后获得的SMV NN的基因组上，分析该病毒的vsiRNA特征，结果发现长度为21和22 nt的vsiRNA具有较高的丰度，病毒全基因组的正链和负链均能被vsiRNA覆盖，且分别在HC-Pro和P3蛋白编码区具有最强热点。【结论】掌叶半夏主要通过dicer样核糖核酸酶4（dicer-like ribonuclease 4，DCL4）和Argonaute蛋白1（Argonaute1，AGO1）对SMV的HC-Pro和P3蛋白编码区进行剪切，主要产生长度为21和22 nt的vsiRNA，从而抑制SMV在植株体内的复制。

• 温度对辣木瑙螟生长发育和繁殖的影响

  桂华敏, 夏涛, 王思洁, 吴国星, 张祖兵, 朱国渊, 张永科, 高熹,

  【目的】探明温度对辣木瑙螟生长发育和繁殖的影响，为辣木瑙螟的预测预报和综合防治提供科学依据。【方法】在光周期L∶D＝14h∶10h、相对湿度80%的条件下，设置24、26、28、30和32℃5个温度梯度，测定不同温度下辣木瑙螟卵的孵化率、幼虫及蛹的死亡率和发育历期；待成虫羽化后，测定不同温度对成虫寿命及产卵量的影响，并计算各虫态的发育起点温度、有效积温及实验室种群的生殖力生命表参数。【结果】在24~32℃内，随着温度的升高，除1、2和3龄幼虫外，辣木瑙螟其他幼虫虫态和蛹的死亡率均先降低后升高；24℃时各虫态的累积死亡率最高。在24~30℃内，随着温度的升高，各龄期幼虫、蛹的发育历期及成虫寿命均逐渐缩短，32℃时从卵发育到成虫仅需14.58d，而在24℃下为28.75d。单雌产卵量在30℃时最大，为412.85粒，32℃时最低，仅27.33粒。卵、幼虫和蛹的发育起点温度分别为16.75、16.95和16.33℃，有效积温分别为27.83、131.00和94.16d·℃。在24~30℃内，周限增长率均大于1，种群数量以几何级数增长。【结论】温度对辣木瑙螟的生长发育和繁殖具有明显影响，28~30℃是辣木瑙螟生长发育和繁殖的最适温区。根据辣木瑙螟危害地区的平均温度，结合其发育历期等，可对辣木瑙螟进行预测预报，为辣木瑙螟的综合防治提供依据。

• 桔小实蝇对5个石榴品种的产卵选择适应性

  李貌, 方薛交, 张金龙, 肖春, 闫振华, 刘娜, 陈国华, 张晓明,

  【目的】探讨桔小实蝇对不同石榴品种的产卵选择性及其与子代生长发育的关系，为石榴桔小实蝇的综合防治提供科学依据。【方法】以禄子、光颜、沙子、酸甜和厚皮5个石榴品种为研究材料，通过测定桔小实蝇成虫在不同石榴品种上的着卵量和幼虫取食5个石榴品种后的发育历期、化蛹进度、成活率等相关生长发育参数，分析桔小实蝇对不同石榴品种的产卵选择性及其幼虫的取食适应性。【结果】桔小实蝇偏好在禄子和光颜品种上产卵，在两者果实和果粒上的着卵量分别为30.50、92.00粒/果和39.75、87.75粒/果；在2个品种上的幼虫和蛹的发育历期较短，分别为10.57、11.97d和11.53、10.03d；化蛹进度更快且蛹重更重，蛹重分别为9.65和9.12g；化蛹率和羽化率更高，分别为90.00%、67.50%和91.67%、81.67%。【结论】桔小实蝇对石榴不同品种的产卵选择性存在明显差异，石榴品种的果皮和气味对其产卵选择有影响，且桔小实蝇产卵选择性与其子代生长发育适应性相关联。在桔小实蝇发生严重的地区可优先选择种植桔小实蝇不喜产卵和不利于其子代生长发育的酸甜和厚皮品种，可有效抑制桔小实蝇田间种群的增长。

• 螃蟹脚可培养内生细菌多样性及其促生活性研究

  贾颜, 傅培龙, 李茜, 李文祥, 张天谣, 黄美娟, 黄海泉,

  【目的】揭示螃蟹脚可培养内生细菌的多样性及其产IAA、铁载体及解磷、解钾能力，筛选具促生活性菌株，为后续植物内生细菌资源的开发与利用提供一定的基础数据和理论依据。【方法】以寄生植物螃蟹脚为研究材料，采用4种分离方法和5种不同培养基分离其内生细菌，通过16S rRNA基因序列对内生细菌进行鉴定，并构建系统发育进化树确定内生细菌的分类地位；从分离获得的螃蟹脚内生细菌中筛选具有ACC脱氨酶活性菌株，并对含ACC脱氨酶内生菌株的产IAA、铁载体及解磷、解钾能力进行测定。【结果】从螃蟹脚中共分离纯化获得60株内生细菌，通过16SrRNA测序及比对分析，去重复后共获得52株螃蟹脚内生细菌，分属于15科22属，其中以悬浮法（Z法）和纤维素—脯氨酸培养基（4号）的分离效果最佳，分别获得16和17个菌属，且以短小杆菌属（Curtobacterium）为优势菌属，占23.08%。促生能力测定结果表明，12株具ACC脱氨酶活性的内生细菌中7株菌（占58.33%）具有产IAA能力，其中菌株SWFU34产IAA能力最强，为4.95mg/mL；10株菌（占83.33%）具有产铁载体能力；8株菌（占66.67%）具解磷和解钾能力，其中有4株菌株（占33.33%）同时具有产IAA、铁载体及解磷、解钾能力。【结论】螃蟹脚蕴藏着丰富的微生物资源及具促生活性的菌株，其中短小杆菌属为优势菌属，假单胞菌属菌株SWFU34的促生活性最突出，具有农业应用的潜力。

• 基于不同育苗方式对新引进西瓜品种需水规律和产量品质的研究

  赵相宇, 田军仓, 马波,

  【目的】研究压砂地栽培新引进西瓜品种的生育期耗水规律、土壤水分动态变化、产量和品质，选出最优品种，为宁夏中部干旱带压砂地西瓜大面积轻简化栽培提供科学参考。【方法】以4个西瓜品种（NK-TM、R-18、N-08和DD-87）为研究对象，在相同灌水定额和施肥条件下，研究不同育苗方式（自根和嫁接）的生育期需水规律、产量和品质，分析不同处理上述指标的差异性。【结果】降水和灌水对土壤含水量变化影响明显，在灌溉后和下雨后各个处理土壤体积含水率明显增加，其他状态下土壤体积含水率大部分保持在13.0%。苗期以蒸发耗水为主，自根苗和嫁接苗日耗水量为0.60~1.94mm；伸蔓期日耗水量为1.19~1.74mm；开花坐果期耗水量有较大幅度增加，日耗水量达峰值，为4.34~8.57mm；进入膨瓜期日耗水量逐渐减小，降至2.95~3.77mm；西瓜成熟期日耗水量最小，为0.95~1.59mm；西瓜嫁接苗总耗水量除苗期总体低于自根苗外，其他时期均高于自根苗。西瓜接嫁苗产量明显高于自根苗，品种R-18和N-08西瓜嫁接苗产量较高，分别为43766.61和41745.13kg/ha。但在西瓜品质指标方面，自根苗明显优于嫁接苗。在各个处理中，N-08嫁接苗的果皮最薄，仅为8.33mm。相关分析结果显示，在相同水肥条件下，西瓜产量与育苗方式和作物耗水量有极显著相关性（PP<0.05）。【结论】4个新引进压砂地种植西瓜品种的产量和品质与耗水量及育苗方式关系密切，品种N-08嫁接苗表现优异，可推荐在宁夏中部干旱带压砂地种植。

• 响应面优化滇黄精多糖提取及其结构与活性分析

  梁朋光, 孙健, 岳健, 苏娟, 唐雅园, 栾会燕, 邱福荣, 杨兆杏, 向昱, 何雪梅,

  【目的】通过优化动态超高压微射流法对滇黄精多糖提取的相关工艺条件，分析其结构与活性，为滇黄精多糖的多元化利用提供技术支持。【方法】以滇黄精多糖得率为考察指标，在单因素试验的基础上设计响应面法分析试验，确定动态超高压微射流法提取滇黄精多糖的最佳条件；并对滇黄精多糖的功能活性（酪氨酸酶抑制活性、α-糖苷酶抑制活性及DPPH自由基清除能力等）与结构特性（红外光谱、相对分子量及单糖组成等）进行研究。【结果】经响应面分析构建滇黄精多糖得率的二次回归方程：Y=19.55+0.7A+0.78B+0.89C+0.28AB+1.26AC+0.84BC-1.84A2-4.72B2-2.3C2（R2=0.9860）（Y表示滇黄精多糖得率，A、B、C分别表示微射流压力、料液比和提取时间），提取时间、料液比及微射流压力与提取时间的交互作用对滇黄精多糖得率有极显著影响（PP料液比>微射流压力；滇黄精多糖的最佳提取工艺条件为：微射流压力146MPa、料液比1∶41、于100℃下提取70min，在此条件下，滇黄精多糖得率为19.57%，达理论预测值的98.69%。滇黄精多糖是一种由11种单糖组成的吡喃型酸性多糖，相对分子量为35.95kD，具有较强的DPPH自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制活性和酪氨酸酶抑制活性，半抑制质量浓度（IC50）分别为0.43、4.07和2.87mg/mL。【结论】采用响应面法优化动态超高压微射流法提取滇黄精多糖的得率高，预测性良好，滇黄精多糖具有良好的功能活性，有广泛的开发前景。

• 肇庆地产高要藿香植物学性状及总黄酮含量分析

  杨永石, 邵玲, 陈小欣, 林泽纯,

  【目的】分析高要藿香植株不同部位总黄酮含量及其抗氧化活性差异，评鉴品种的适生性状和入药部位质量，为科学制定高要藿香种植技术规程及提升其药用品质提供科学依据。【方法】以3年生高要藿香为研究对象，观察并记录植株根、茎、叶等主要营养器官的植物学形态特性；测定不同叶龄和年份茎段、不同营养器官的含水量、总黄酮含量及对DPPH自由基（DPPH·）的清除能力，综合分析其各部位的入药品质。【结果】高要藿香的茎分为直立茎和匍匐茎，通常第4~10节的节部气生根或根凸明显；主茎匍匐，被栓皮，皮孔密集；直立茎节部的对生叶、腋芽和气生根三者一般协同生长。全叶被密集细绒状表皮毛或腺毛，部分匍匐茎长有1~2条大于90o分支的直立茎，植株丛生状。不同叶龄含水量为嫩叶>成熟叶>老叶，不同年份茎段含水量为1年生茎段>2年生茎段>3年生茎段，植株各营养器官含水量依次为叶>茎>根。高要藿香植株各部位均含有黄酮类化合物，各部位的总黄酮含量分别为嫩叶>成熟叶>老叶>1年生茎段>2年生茎段>3年生茎段>根。其中，叶部的总黄酮含量达6.86±0.034mg/g，为根的8.07倍和茎的2.36倍。植株叶和茎对DPPH·的清除率分别为90.71%和37.53%，而根仅为15.61%，表明广藿香植株的抗氧化活性表现为叶>茎>根。【结论】肇庆高要藿香的植物学特性更有利于其繁茂生长。根据植株不同叶龄和年份茎段的总黄酮含量及抗氧化活性差异，高要藿香的入药部位以叶为优，茎次之，根最差。结合广藿香以全草或地上部分采收的传统，建议以采收当年种植的植株较合适，同时去除根系和老茎段，取其嫩叶、成熟叶和1年生茎段入药为宜。

• 基于中高分影像的丘陵区柑橘种植地块提取

  谢国雪, 黄启厅, 杨绍锷, 覃泽林, 刘丽辉, 邓铁军,

  【目的】利用多源中高分影像探索广西富川县柑橘种植地块尺度遥感监测方法，为实现全区柑橘信息精准监测提供技术参考。【方法】以高分辨率影像和二调数据为基底，更新图斑形态边界，生成完整且稳定的地块数据；分别面向农作物、果园、林地地块对象，综合中高分影像光谱信息、纹理信息及时间序列影像特征，利用支持向量机分类器迭代识别柑橘信息；基于DEM计算柑橘地块实际面积。【结果】通过分析不同地物影像特征曲线发现，传统指数NDVI（1、4、12月）、RVI（9—12月）、LSWI（1、10和12月）及红边指数NDRE1（1—2月、10—12月）、MTCI（1、2、10和12月）、PSSRa（9—12月）、MCARI2（1月、9—12月）对于识别柑橘作物具有敏感性。本研究提取柑橘信息精度为93.4%，比前人柑橘作物提取成果精度更高、尺度更精细。研究区柑橘地块种植于坡地面积占20.26%，在DEM支持下计算柑橘种植总面积为18643.15ha，比采用投影面积测量方法增加148.49ha，一定程度上消除地形对面积统计的影响。提取结果表明富川县柑橘主要集中在麦岭镇、富阳镇、葛坡镇、福利镇、朝东镇等，而莲山镇、白沙镇、古城镇种植柑橘较少。【建议】为解决广西立地条件的难题，建议以低频高分影像更新地块边界，在地块数据基础上综合利用多星多时相中高分影像（尤其具有红边波段影像）提取作物信息，针对地形起伏较大区域，建议采用高精度DEM计算作物面积。

• 销售渠道对新型农业经营主体绿色农业参与度影响分析

  詹孟于, 周真, 汤颖梅,

  【目的】分析绿色食品销售渠道对新型农业经营主体绿色农业参与度的影响，为提高新型农业经营主体绿色农业参与度提供实证依据与政策参考。【方法】通过问卷调查了解新型农业经营主体绿色农业生产行为、销售渠道选择、个人特征及外部环境等方面的情况，并采用多元回归分析方法分析销售渠道对新型农业经营主体绿色农业参与度的影响。【结果】多重共线性检验结果表明，性别、年龄、受教育年限、环保意识、经营规模、家庭劳动力人数、政府培训、政府补贴、信贷资金可获性和外包服务等变量的相关系数均小于0.500，说明变量间不存在多重共线性，可进行回归。多元回归结果显示，销售渠道和环保意识的回归系数分别为0.242和0.081，且在5%水平上通过显著性检验，说明其对新型农业经营主体绿色农业参与度的影响显著。户主的受教育年限和政府补贴的回归系数分别为0.016和0.180，且通过10%的显著性检验，表明上述2个变量对于新型农业经营主体绿色农业参与度也具有显著的影响，但影响程度不及销售渠道和环保意识强。其他因素如经营规模、家庭劳动力人数、外包服务等对新型农业经营主体绿色农业参与度则没有显著影响。【建议】政府应当出台政策，鼓励新型农业经营主体建立绿色农产品的销售渠道；提高农村的职业教育基础能力；增强新型农业经营主体的环保理念；对于采取绿色农业技术的新型农业经营主体进行补贴，增强其综合竞争能力。