南方农业学报杂志

南方农业学报杂志2022年第2期

• 育成期高能饲喂下开产与未开产蛋鸡肝脏miRNA表达谱差异分析

  王星果, 王克华, 卢建, 马猛, 窦套存, 郭军, 胡玉萍, 曲亮,

  【目的】对育成期高能饲喂下开产与未开产蛋鸡的肝脏进行miRNA高通量测序分析，探明高能饮食状态下蛋鸡肝脏中影响其开产的miRNA，为提高产蛋性能打下基础。【方法】以代谢能水平为12.14 MJ/kg的高能饲粮饲喂育成期蛋鸡，通过Illumina NextSeq500高通量测序平台对开产与未开产蛋鸡肝脏进行small RNA测序，使用DESeq分析miRNA表达量，并以实时荧光定量PCR进行验证；采用miRanda对差异表达miRNA进行靶基因和靶位点预测，同时以超几何分布对差异表达的靶基因进行GO功能注释分析和KEGG信号通路富集分析。【结果】 6个样本（3个开产蛋鸡样本，3个未开产蛋鸡样本）能注释到的miRNA均超过300个，约占miRBase中已鉴定鸡miRNA的30.00%，且前体鉴定结果显示各样本注释到的miRNA有部分定位在同一前体上。与未开产组样本相比，开产组样本有9个miRNA表达上调、3个miRNA表达下调。其中，gga-miR-132c-5p、gga-miR-132b-5p、gga-miR-2184a-5p、gga-miR-132c-3p、gga-miR-132b-3p及gga-miR-2184a-3p属于同一miRNA基因簇，且gga-miR-1682、gga-miR-132b-3p和gga-miR-2184a-3p等3个上调miRNA在未开产蛋鸡样本中不表达。通过miRanda共预测得到129个差异表达潜在靶基因，以miR-203a预测得到的靶基因最多，为32个；其次是gga-miR-2184a-5p、gga-miR-148a-5p和gga-miR-12211-5p，分别预测到30、25和23个靶基因；而miR-132c-5p预测得到的靶基因最少，仅为9个。129个靶基因显著注释到8条GO功能条目上，生物学过程（Biological process）主要注释到脂质代谢过程、细胞脂质代谢过程、脂质生物合成过程、磷脂生物合成过程、磷脂代谢过程、甘油磷脂生物合成过程和解剖学结构发育，分子功能（Molecular funcion）仅注释到1条GO功能条目，即利钠肽受体活性，未发现涉及细胞组分（Cellular component）的GO功能条目；在注释到的8条GO功能条目中有6条与脂质代谢相关，涉及的靶基因有22个，占总潜在靶基因的17.10%。KEGG信号通路富集分析结果显示共显著富集到7条KEGG信号通路，其中脂肪酸降解、脂肪酸生物合成、酮体合成与降解及PPAR信号通路等4条信号通路与脂质代谢相关。【结论】育成期高能饲喂下开产与未开产蛋鸡中共存在12个差异表达miRNA，涉及129个差异表达潜在靶基因，且主要富集在肝脏脂质代谢相关过程和信号通路，说明miRNA是通过调控脂质代谢及其相关基因表达而影响蛋鸡开产。

• 果蔗Ty3-gypsy类反转录转座子RT基因的多样性分析

  刘俊仙, 阳太亿, 刘菁, 张荣华, 卢曼曼, 雷敬超, 高轶静, 丘立杭, 李松, 熊发前,

  【目的】分析Ty3-gypsy类反转录转座子反转录酶基因（RT）序列特征、多样性、系统进化关系及转录活性，为深入研究果蔗Ty3-gypsy类反转录转座子全长序列、转录转座活性及生物学功能提供理论参考。【方法】以果蔗品种拔地拉为试材，根据Ty3-gypsy类反转录转座子RT基因保守区设计简并引物对，利用其进行PCR扩增，将目的条带回收纯化后连接至pMD18-T载体，并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑取阳性克隆进行测序。依据测序结果对RT基因序列进行生物信息学分析。【结果】从果蔗拔地拉中扩增获得51条序列（SoRT4-1~SoRT4-51），去除重复序列和非RT基因序列后共获得44条RT基因序列，长度为423~433 bp，AT含量为56.84%~64.97%，AT：GC比值为1.32~1.85，核苷酸序列间相似性为44.4%~99.3%，其编码的氨基酸序列间相似性为10.8%~100.0%，说明氨基酸序列比核苷酸序列表现出更高异质性。44条RT基因序列被划分为4个家族，其中Ⅰ和Ⅲ为主要家族。44条RT基因编码的氨基酸序列中有20条发生了无义突变，说明其突变率较高。44条RT基因编码蛋白序列存在5种保守基序，其中，有29条序列同时包含Motif 1~Motif 4，其余15条序列的保守基序变异较大，说明保守基序存在一定异质性。4个家族代表性序列编码蛋白的三级结构在氢键和转角的数量方面差异较大；系统发育进化树分析结果显示，44条RT基因序列被分为七大类，Ⅰ类和Ⅱ类中的果蔗RT基因序列分别占序列总数的40.91%和27.27%，Ⅱ类和Ⅵ类中的部分果蔗RT基因序列与拟南芥的BAB40828.1、粳稻的BAB40824.1、菠菜的BAB40833.1和大豆的BAB40834.1亲缘关系较近，推测这些物种在进化过程中发生了Ty3-gypsy类反转录转座子的横向传递。初步发现1条Ty3-gypsy类反转录转座子（SoRT4-40）具有转录活性。【结论】获得44条果蔗Ty3-gypsy类反转录转座子RT基因序列，其中仅有1条序列具有转录活性，这些RT基因序列可用于开发基于Ty3-gypsy类反转录转座子的甘蔗分子标记。

• 茶组植物新资源元宝山茶的毒理学安全性评价

  陈涛林, 陈美丽, 葛智文, 廖寅平, 杨雪梅, 王熙富, 曾宏亮, 李明丹, 张征, 罗军武,

  【目的】评价茶组植物新资源元宝山茶（Camellia yungkiangensis var.Yuanbaoshanica）的饮用安全性，为该资源的高效开发利用提供科学依据。【方法】以元宝山茶资源的鲜叶固定样和红茶工艺样为材料，参照食品毒理学安全性评价程序，通过经口急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验和慢性喂养（30 d）亚急性毒性试验对其毒理学安全性进行评价。【结果】元宝山茶具有较高的茶多酚、可溶性糖及可可碱含量，但咖啡碱和游离氨基酸含量相对较低。元宝山茶鲜叶固定样提取物对ICR小鼠的半数致死剂量（LD50）为5.123 g/kg，其红茶工艺样提取物对小鼠的LD50为7.573 g/kg；元宝山茶（红茶工艺样提取物）各剂量组在添加S9与不加S9时均未导致测试菌株（TA97a、TA98、TA100和TA102）出现致突变作用，即Ames试验结果呈阴性；在5.00 g/kg剂量（相当于人体推荐食用量的144倍）条件下，元宝山茶（红茶工艺样提取物）对小鼠骨髓细胞无明显毒性作用，表明小鼠骨髓细胞微核试验结果呈阴性。按0.87、1.74和3.47 g/kg的剂量经口灌胃红茶工艺样提取物给SD大鼠30 d，试验期间各剂量组大鼠的精神状态、行为活动、摄水、粪便、尿液及各腔道分泌物等均未见异常，也无大鼠死亡；其体重增重、摄食量、食物利用率、血液指标、血清生化指标、脏器湿重及脏/体比值等除个别指标与阴性对照组相比差异显著（PP<0.01）外，绝大部分指标均无明显的剂量—反应关系，且均在正常范围内波动；剖检观察及组织病理学检查也未发现元宝山茶对大鼠产生明显毒性意义的病理变化。【结论】元宝山茶属于典型的高茶多酚、高可溶性糖、高可可碱及低咖啡碱的特异性资源，且具有很高的饮用安全性，按食品毒理学安全性评价标准属于无毒级食品，作为代茶饮料植物具有广阔的应用前景。

• 遮阴及复光下茶树新梢主要碳氮代谢物动态变化

  陈建姣, 吕智栋, 刘婕, 张晨禹, 李云飞, 陈佳豪, 沈程文,

  【目的】探究遮阴及复光下茶树主要碳氮代谢物动态变化，为茶树遮阴及复光过程中鲜叶适制性的选择提供理论依据。【方法】开展大田试验，以黄金茶1号、湘妃翠和金萱茶树品种为试验材料，设遮阴度80%和95%，分别在遮阴前、遮阴第12 d和复光后第1、3和5 d取1芽2叶，检测新梢可溶性糖、黄酮、咖啡碱、氨基酸组分和儿茶素组分等指标，分析遮阴及复光下茶树新梢碳氮代谢物和品质变化规律。【结果】遮阴下，3个茶树品种的茶多酚含量显著下降（P<0.05，下同），黄金茶1号和湘妃翠的酚氨比降至4~5，简单儿茶素/酯型儿茶素降至0.23~0.42。黄金茶1号在遮阴度80%处理下酚氨比和叶绿素a/b显著低于遮阴度95%；与遮阴度80%处理相比，湘妃翠和金萱在遮阴度95%处理下酚氨比和叶绿素a/b显著降低，水浸出物和可溶性糖含量增加，且金萱在遮阴度95%处理下儿茶素品质指数显著高于遮阴度95%。复光后，3个茶树品种游离氨基酸的变异系数均大于茶多酚；湘妃翠和金萱的酚氨比大于7，儿茶素品质指数高于遮阴前。遮阴及复光过程中，3个茶树品种的水浸出物、黄酮和表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）含量在复光第5 d最高。遮阴及复光下金萱茶多酚和游离氨基酸含量的变异系数低于黄金茶1号和湘妃翠；遮阴第12 d，遮阴度95%处理下湘妃翠和遮阴度80%处理下黄金茶1号的主要碳代谢物含量最低，主要氮代谢物含量最高。【结论】茶树为适应环境变化进行碳氮代谢调整，从而改变鲜叶的适制性。遮阴环境及复光前期茶树鲜叶适制名优绿茶，复光后期茶树鲜叶更适制优质红茶。

• 不同浓度镧对茶树根系抗氧化酶活性及根细胞超微结构的影响

  薛志慧, 周喆, 商虎, 何香艳, 黄伙水, 孙威江,

  【目的】探究不同浓度镧（La）对铁观音和水仙茶树根系抗氧化酶活性和根细胞超微结构的影响，为选育镧低吸收茶树品种提供数据参考。【方法】以茶树品种水仙和铁观音为试材，测定分析不同浓度La3+溶液（0.08、0.40和1.20 mmol/L）处理下根系的抗氧化酶活性和根细胞超微结构的变化以及镧在茶树根组织部位的定位分布。【结果】La3+浓度为1.20 mmol/L时，铁观音根系的超氧化物歧化酶（SOD）活性比水仙高73.9%，过氧化物酶（POD）活性及过氧化氢酶（CAT）活性与水仙根系相比无显著差异（P>0.05）。扫描电镜观察发现，高浓度La3+处理下根系细胞排列疏松，无规则，蜡质增多；品种间相比，水仙较铁观音根细胞蜡质覆盖量多，受害程度较重。透射电镜观察发现，高浓度La3+处理下2个茶树品种根系细胞排列散乱，细胞壁膨大，细胞壁、细胞质膜上分布较多黑色沉积物，进一步结合能谱分析，发现黑色沉积物中含有镧元素，且主要分布于铁观音根细胞中的原生质体，而在水仙根细胞的细胞壁及原生质体中均有积累。【结论】镧处理后铁观音根系较水仙抗氧化酶活性增高，根细胞超微结构受害较轻，综合表现受镧影响较小，可作为选育镧低吸收茶树品种材料加以深入研究和开发。

• 基于同步辐射红外光谱技术的江苏茶园土壤矿物—有机复合体固存研究

  李欢, 胡振民, 杨亦扬,

  【目的】分析江苏省不同茶区土壤结构的差异，寻求差异化的养分管理途径，为全省实施茶园化肥减施增效提供科学参考。【方法】表征江苏代表性茶园土壤矿物—有机复合体特征结构，利用同步辐射红外显微成像法对茶园土壤团聚体切片进行化学成像，从而获得特定组分的空间分布，进而从原位上表征样品中矿物和有机官能团的分布特征，探索茶园土壤有机碳的稳定机制。【结果】江苏省茶园土壤团聚体中的有机碳以脂肪碳（2881 cm-1）、芳香碳（1620 cm-1）和多糖碳（1100 cm-1）等形态存在，同时还有矿质元素氧化物Fe-O、Al-O、Si-O等存在。茶园土壤微团聚体中各元素空间分布具有高度异质性，甲基和亚甲基C-H等脂肪碳较集中地吸附在土壤微团聚体边缘（也有少量的矿物存在），而铁铝矿物的Al-O、Fe-O等官能团聚集在微团聚体内部核心位置，同时表面也吸附少量有机质； 87.5%茶园土壤中黏土矿物（3620 cm-1）与脂肪碳相关性最高，施肥措施和植茶年限影响矿物—有机官能团相关性排序； 75.0%茶园土壤铁氧化物与多糖碳相关性最高，各茶园土壤中铁铝矿物与有机官能团的亲和性排序规律受海拔、pH和植茶年限等影响而存在差异。【结论】江苏不同茶区土壤团聚体及其有机碳的分布特征揭示土壤团聚体通过矿物—有机复合体将有机质留存于土壤中，提高土壤有机质含量。生产中宜依据不同茶区养分具体管理方式、茶叶栽培特点及土壤条件，因地制宜采取差异化的茶园养分管理策略。

• 大厂茶古树与其无性系子代的农艺性状和品质性状比较及综合评价

  李彩云, 宋勤飞, 范乔, 何应琴, 赵支飞, 李芳, 牛素贞, 陈正武,

  【目的】比较分析大厂茶古树及其无性系子代株系的农艺性状和品质性状，为科学评估古树茶及无性系茶园的社会经济价值，引导政府和茶农有效保护及合理利用古茶树提供理论依据。【方法】田间调查22个优良大厂茶古树单株及其4年生无性系子代株系的春梢物候期、产量构成因子及持嫩性，并测定其春梢一芽二叶的主要品质成分含量，对大厂茶古树与其无性系子代株系农艺性状和主要品质性状进行比较分析、主成分分析和综合评价。【结果】除古树L12和L15外，其余20个古树的萌动期、一芽一叶期和一芽二叶期均比其子代株系晚。除古树L01、L14、L15和L22外，其余18个古树的一芽三叶期均比其子代株系晚。除古树L01、L05、L07、L10、L12、L14、L15和L22外，其余14个古树的驻芽期均比其子代株系晚；除古树L10、L14、L15、L18、L19、L20和L22外，其余15个古树的产量构成因子及持嫩性均比其子代株系差或一致；除古树L03、L12、L14、L15和L16外，其余17个古树的水浸出物含量、茶多酚含量、总糖含量和可溶性糖含量均显著高于其子代株系（P<0.05，下同）。除古树L21外，其余21个古树的游离氨基酸含量均显著低于其子代株系；基于春梢物候期、产量构成因子、持嫩性和主要品质性状等17个数量性状的主成分分析和综合评价结果表明，22个古树的综合得分均低于其子代株系，基于8个主要品质性状的主成分分析和综合评价结果表明，22个古树的综合得分均高于其子代株系。【结论】大厂茶古树茶的风味物质较其无性系子代丰富，但大多数大厂茶古树表现出产量较低、物候期晚、生长周期较无性系子代短。

• 埋藏深度对茶树修剪物腐解特性的影响

  于翊鹏, 黄兴成, 李渝, 杨胜玲, 张艳, 刘彦伶, 蒋太明, 陈兴良,

  【目的】探究埋藏深度对茶树修剪物腐解特性及养分释放的影响，为茶树修剪物还田方式提供科学依据。【方法】设置3个埋藏深度处理，包括表层覆盖（T1）、埋藏10 cm （T2）和埋藏20 cm （T3）。采用尼龙网袋法，在盆钵中进行周年腐解试验，评估不同埋藏深度对茶树修剪物腐解率及养分归还特征的影响。【结果】埋藏20 cm处理下，茎腐解最快，周年腐解率为45.99%；埋藏10 cm处理下，叶和茎叶混合腐解最快，周年腐解率分别为58.79%和51.89%。周年腐解后，茎、叶的养分富集系数差异明显，叶与茎叶混合的养分富集系数则表现出相同的变化规律。表层覆盖处理下，茎中氮和磷的富集系数分别增至1.46和1.36，叶中钾的富集系数降至0.64；埋藏10 cm处理下，茎中钾的富集系数降至0.23，叶中磷的富集系数增至1.41，碳和氮的富集系数下降为0.81和0.80，钾仅为0.22；埋藏20 cm处理下，茎中氮的富集系数增至1.30，钾降至0.27，叶中碳、氮和钾的富集系数分别降为0.77、0.88和0.24。养分释放率方面，埋藏10 cm处理下，碳和氮养分释放较快，叶的碳、氮释放率分别为66.7%和67.1%，显著高于茎的碳、氮释放率（P<0.05，下同）；埋藏20 cm处理下，茎的磷释放率为50.7%，高于叶的磷释放率（48.6%）；钾的养分释放率受还田方式影响较大，叶在埋藏10 cm处理下钾的养分释放率为90.6%，显著高于表层覆盖处理（62.5%）。【结论】深埋会促进茶树修剪物茎叶的腐解，叶的腐解速率更高；深埋可提高修剪物碳氮磷钾养分释放，其中钾元素释放最快，氮和磷较缓慢。在实际生产中可将茶树修剪物茎叶混合后深埋至10~20 cm耕层进行还田，以改良茶园土壤。

• 潮州单丛茶树天牛种群动态、空间分布型及成虫交配和产卵行为研究

  苏湘宁, 陈勤, 章玉苹, 刘伟玲, 李传瑛, 廖章轩, 黄少华,

  【目的】明确广东省潮州市凤凰山单丛茶树天牛的发生规律及成虫交配和产卵行为，为潮州凤凰单丛茶树天牛的预测预报及有效防治提供科学依据。【方法】 2020年1月—2021年8月，在广东省潮州市凤凰山单丛茶区选取5块样地（大庵村古茶园、大庵村新茶园、山外山新茶园、竹留村新茶园和深垭村新茶园），采用调查田间区块天牛排粪的方法研究天牛幼虫发生动态，根据种群聚集度指标法计算天牛幼虫的空间分布，利用性信息素诱捕法调查天牛成虫种群动态，通过室内观察的方法对天牛成虫交配和产卵行为进行研究。【结果】天牛幼虫种群动态监测结果表明，2020年天牛幼虫在3个样地均有发生，高峰期为8—11月，其中大庵村古茶园有虫株率明显高于大庵村新茶园和山外山新茶园，并具有2个明显的发生高峰期（2020年8月中旬—9月中旬和2020年10月中旬—11月中旬），有虫株率分别为12.7%和12.6%；有虫株率随着海拔的升高呈增加趋势，其中大庵村新茶园（海拔1100 m）和山外山新茶园（海拔1200m） 9月有虫株率分别为9.3%和8.1%，二者差异不显著（P>0.05）；应用聚集度指标测定结果表明，天牛幼虫在各样地均为聚集分布。天牛成虫种群动态监测结果表明，大庵村古茶园诱捕到的茶树天牛成虫为四脊茶天牛（Trachylophus sinensis Gahan），其羽化期于5月中旬—下旬开始，而后诱捕数量逐渐增加，7月中旬—下旬单个诱捕器的诱捕量为11.67±2.62头，形成一个明显的发生高峰，高峰期雄雌比率为1：1.92； 7月下旬—8月上旬结束羽化，诱捕数量逐渐下降。室内观察发现，雌雄成虫可多次交配，雄虫有假交配现象。雌虫多数喜将卵产在枝干上，是茶叶上产卵量的5.42倍；雌虫可多次产卵，交配后第5 d产卵数量最多，达9.00±5.10粒/雌，随后产卵量随产卵次数增加而减少。【结论】危害潮州单丛茶园的茶树天牛幼虫高峰期在8—11月，田间呈聚集分布；四脊茶天牛成虫高峰期在7月中旬—下旬，雌虫喜将卵产在枝干上。根据潮州单丛茶树天牛的发生规律，在天牛发生高峰期前进行有效的物理、农业、生物和化学防治等，减少虫口基数，以达到更高、更生态友好的防效。

• 6个种植区贵定鸟王群体种的主要理化品质及相关分析

  杨慧, 张涛, 王雨鑫, 王济红, 刘建军, 邓燕莉,

  【目的】探究原生地与引种区内贵定鸟王群体种的品质差异，为后续茶叶加工、资源选育与品种推广提供理论基础。【方法】对贵州省贵定鸟王群体种的3个原生地和3个引种区春季一芽一叶茶鲜叶的水浸出物、茶多酚、咖啡碱、氨基酸组分等生化成分及10种矿质元素进行测定，并进行氨基酸组分的主成分分析。【结果】原生地贵定鸟王群体种的水浸出物、茶多酚、咖啡碱的含量均高于引种区，云雾镇方家茶园的水浸出物和茶多酚含量最高为44.32%和27.40%，云雾镇鸟王村上坝组茶园的咖啡碱含量最高，为3.54%。原生地除云雾镇鸟王村上坝组茶园外，贵定鸟王群体种的氨基酸总量、鲜味和苦味氨基酸总量均低于引种区，且引种区的甜味氨基酸总量高于原生地。对氨基酸组分进行主成分分析，发现甜味氨基酸中的苏氨酸和脯氨酸及苦味氨基酸中的亮氨酸和苯丙氨酸的含量能较好地区分贵定鸟王群体种的原生地与引种区。原生地与引种区贵定鸟王群体种的Ca、Fe、Se、Zn、Mn和Mg等矿质元素含量差异较大，且Se含量符合富硒茶标准，原生地云雾镇中心茶场的Ca、Se、Zn、Mn和Mg等矿质元素含量最高；分别为305.42、2.52、22.33、419.86和252.19 mg/kg，都匀市黄河村茶园的Fe含量最高，为349.92 mg/kg。【结论】贵定鸟王群体种原生地与引种区的水浸出物、茶多酚、咖啡碱、氨基酸组分和矿质元素等生化成分含量差异较大，通过氨基酸组分的组成及含量特征可区分贵定鸟王群体种的原生地与引种区。

• 福建大田茶树品种资源生化成分特征分析与评价

  陈潇敏, 章进汕, 金珊, 邵淑贤, 刘永崇, 吴文晞, 王鹏杰, 赵峰, 叶乃兴,

  【目的】探明福建省大田县茶树品种资源生化成分特征，为其开发利用和茶树特异品种筛选提供科学依据。【方法】以24份大田茶树品种资源为试材，采用高效液相色谱法（HPLC）测定儿茶素组分，应用超高效液相色谱—质谱联用法（UHPLC-MS/MS）测定嘌呤生物碱组分及氨基酸组分，并进行描述性分析、主成分分析、聚类热图分析及特异资源筛选。【结果】24份大田茶树品种资源的儿茶素总量和表没食子儿茶素-3-O-（3-O-甲基）没食子酸酯（EGCG3 "Me）含量分别为60.00~251.75和2.92~22.90 mg/g，其遗传多样性指数分别为2.11和2.06；咖啡碱、苦茶碱和茶氨酸含量分别为3.69~68.71、0.29~48.59和0.28~39.52 mg/g，其遗传多样性指数分别为1.98、1.99和1.96。对主要品质成分进行主成分分析，前3个主成分的累积方差贡献率超过80.00%。基于儿茶素、嘌呤生物碱及氨基酸组分共30个生化成分，可将24份大田茶树品种资源分为3个类群，A类群氨基酸组分含量较高，B类群生化成分含量均表现较低，C类群的儿茶素组分及嘌呤生物碱组分含量较高，不同类群在表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、EGCG3" Me、咖啡碱、苦茶碱和茶氨酸含量等主要指标有明显差异。综合分析结果，筛选到16份儿茶素组分特异资源（高儿茶素10份，高EGCG 5份、高EGCG3 "Me 1份）、23份嘌呤生物碱组分特异资源（高嘌呤生物碱9份、高苦茶碱13份、高咖啡碱1份）及6份高茶氨酸茶树资源。【结论】大田茶树品种资源均含有EGCG3" Me和苦茶碱，儿茶素、嘌呤生物碱及氨基酸组分具有丰富的遗传多样性；通过系统的鉴定评价，筛选出一批生化成分特异资源，可作为茶树特异性状育种材料。

• 高氮低磷中钾配比对武夷岩茶产量及品质的影响

  王瑜, 刘扬, 卓座品, 薛俊鹏, 许锐能, 孙丽莉, 廖红,

  【目的】通过分析肥料中氮基础上降低磷钾配比对武夷岩茶产量及品质的影响，为岩茶的优质、健康生产优化养分配比提供科学依据。【方法】试验于武夷山进行，供试品种为水仙。设置3种肥料配比处理（N-P2O5-K2O）： 15-15-15 （农民用肥，对照CK）、18-8-18 （降磷，T1处理）和21-8-11 （降磷降钾，T2处理），统计相关产量指标，定量测定5项常规品质指标及3种主要次生代谢物浓度，并对茶叶滋味和香气物质进行非靶向代谢组学分析。【结果】不同配比施肥影响标准叶比率（茶叶有效产量），其中T2处理不仅能显著提高标准叶比率（PP=0.001），不同配比施肥可分别解释滋味和香气代谢物总变异的23.30%和22.00%。液相分析结果表明，T2处理可显著提高黄酮类物质风信子质（Hyacinthin）、醚类化合物索拉非尼（Sorafenib）及茶氨酸等代谢物的浓度；气相结果表明，T2处理可明显提高香气代谢物的浓度，包括奶油香物质2，3-Octanedione等。表明T2处理主要通过提高滋味与香气代谢物浓度（尤其香气代谢物）以改善茶青品质。【结论】在以氮为基础比例上适当降低磷和钾的占比，不仅能显著提高武夷岩茶的有效产量，且滋味和香气代谢物浓度也显著增加，进而在一定程度上改善了茶青品质。

• 浙江丽水市地方茶树种质资源鉴定评价

  刘瑜, 严芳, 邵静娜, 周慧娟, 郑生宏, 何卫中,

  【目的】鉴定评价浙江省丽水市茶树种质资源，并筛选出优异茶树种质资源，为茶树良种选育及茶产业发展提供丰富材料。【方法】从浙江丽水市收集到13份茶树种质资源，并在丽水市松阳县进行统一栽培管理，以福鼎大白茶为对照，对其特征特性、生化成分、绿茶感官品质展开鉴定评价。【结果】 13份供试种质中，子松种和丽早1号的春季萌芽期分别较对照早10和22 d，属于特早生资源；丽白1号、丽黄3号、梯田白、梯田白2号和水晶白的芽叶均表现为黄白化，丽紫1号的芽叶表现为紫化； JN-1的花瓣颜色为粉红色。13份供试种质均具有较强或强的耐旱性和耐寒性，茶多酚含量13.87%~20.77%，水浸出物含量41.65%~48.93%，咖啡碱含量2.86%~3.74%，游离氨基酸含量4.51%~8.77%，酚氨比1.59~4.77。除丽早1号和JN-1外，其余11份种质的游离氨基酸含量均≥5.00%，为高氨基酸种质，且5份白化种质中氨基酸含量高于其他种质。儿茶素品质指数以JN-3最高（518.2），芽王、丽白1号、丽黄3号、梯田白和梯田白2号均高于对照（340.5），以子松种最低（235.3）。13份供试种质所制绿茶整体上表现为条索紧、汤色明亮、香气较高（部分种质具有花香或栗香）、滋味甘醇鲜爽、叶底嫩匀显芽，且年均感官审评总分均高于对照，均适制绿茶，其中以JN-3最高（92.4分），丽紫1号最低（89.8分）。JN-3在香气、滋味得分和感官品质总分上均为最高。13份供试种质中，高氨基酸（≥5.00%）特异种质11份，特早生资源2份，叶色特异资源6份，花瓣颜色特异资源1份。除梯田白、水晶白和丽紫1号仅属于特异种质资源外，其余10份种质均同时为特异种质资源和优良种质资源。【结论】供试的13份茶树种质均属于特异种质，其中10份属于优良种质，可用于茶树良种选育及茶叶生产。

• 引诱剂和川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛的防控效果

  黄少华, 章玉苹, 李传瑛, 刘伟玲, 廖章轩, 苏湘宁,

  【目的】明确引诱剂和川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛的防治效果，为广东省潮州市凤凰山单丛古茶区天牛的生物防控提供技术支持。【方法】采用引诱剂诱捕的方法研究ZM-80型诱捕器不同悬挂高度对天牛诱捕效果的影响；利用天牛诱捕器研究F-8、APF-Ⅰ （普通型、持久型、加强型）、蜜糖水、CY-1和CY-2引诱剂对天牛的诱捕效果；采用田间释放法评价川硬皮肿腿蜂不同释放量和释放时间对天牛幼虫的防治效果，并进行川硬皮肿腿蜂区域化防控效果试验。【结果】诱捕效果试验结果表明，诱捕器悬挂高度2 m（高于树冠）诱捕到的天牛总数为13.25头/诱捕器，而悬挂高度1 m （树冠以下）诱捕到的天牛总数仅为2.15头/诱捕器，两者间差异显著（PP>0.05）；川硬皮肿腿蜂防治效果试验结果表明，释放川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛幼虫有较好的控制作用，其中9和10月分别释放30000头/ha川硬皮肿腿蜂1次的效果最好，放蜂30和60 d后的防效分别为63.62%和68.72%。川硬皮肿腿蜂区域化防控试验结果表明，其平均防效为55.03%。【结论】利用APF-Ⅰ加强型或CY-1引诱剂，配合ZM-80型天牛诱捕器悬挂高度高于树冠，对天牛的诱捕效果较好； 9和10月分别按照30000头/ha各释放川硬皮肿腿蜂1次，能有效控制潮州凤凰山区单丛古茶园天牛危害。

• 大麦TIFY基因家族成员鉴定及表达分析

  刘梦迪, 倪守飞, 王月雪, 母景娇, 蔡倩, 赵彦宏, 王艳芳,

  【目的】对大麦TIFY基因家族成员进行鉴定及表达分析，为进一步探究TIFY基因家族在大麦生长发育与胁迫响应中的作用机理打下基础。【方法】基于TIFY家族蛋白的保守域特征，利用HMMER从大麦中鉴定TIFY基因家族成员，利用采用生物信息学软件对其理化性质、保守基序、特征结构域、顺式作用元件、基因结构、系统进化及表达模式进行预测分析。【结果】从大麦中鉴定出15个HvTIFYs基因（HvTIFY1～HvTIFY15），分布于5条染色体上，且大多数基因在染色体上成簇分布。15个HvTIFYs蛋白均具有TIFY家族蛋白的特征结构域（TIFY），根据所含保守结构域的不同，可分为ZML（4个）和JAZ亚族（11个），且亲水性蛋白（14个）和偏碱性蛋白（11个）居多，但均定位于细胞核；二级结构相似度较高，均由α-螺旋、β-转角和无规则卷曲组成，除HvTIFY7蛋白外，其余蛋白二级结构所占比排序：无规则卷曲>α-螺旋>β-转角。HvTIFYs基因结构存在明显差异，其中，JAZ亚族11个基因的内含子数为0~6； ZML亚族4个基因的内含子数为6～7个，系统发育进化树上相邻分支的基因具有较相似的基因结构。HvTIFYs基因启动子区域富含光、激素和胁迫等顺式作用元件，种类及分布均呈多样性。5个物种的79条TIFY蛋白分为4个组，恰好与TIFY家族的4个亚族对应，其中，ZML、TIFY和JAZ亚族包含单、双子叶植物的TIFY蛋白，而PPD亚族仅含有双子叶植物的TIFY蛋白。15个HvTIFYs基因在不同组织器官中的表达量存在明显差异，其中HvTIFY1、HvTIFY2和HvTIFY8基因在8个组织中的表达量均较高，HvTIFY10和HvTIFY15基因表达量中等，HvTIFY6基因表达量较低； HvTIFY11基因不表达。15个基因在根的不同组织中对盐胁迫的敏感程度不同。【结论】从大麦中鉴定出的15个HvTIFYs基因存在一定的功能分化，具有明显的组织和时空特异性，推测其在大麦逆境响应和激素调节中具有重要调控作用。

• 干旱胁迫对甘蔗光合日变化及相关特性的影响

  刘硕, 樊仙, 杨绍林, 邓军, 全怡吉, 李如丹, 张跃彬,

  【目的】探究干旱胁迫对甘蔗CO2交换和H2O交换的日变化规律、光合作用能力及其他生理特性的影响，为甘蔗抗旱品种选育及探明其耐旱机制提供科学参考。【方法】以云蔗05-51和粤糖93-159为供试材料，采用盆栽试验，设干旱1 d、干旱5 d、干旱9 d和干旱9 d后复水10 d共4个干旱处理，各处理均设正常浇水为对照。使用PTM-48A植物光合生理及环境监测系统监测甘蔗+1叶的水气交换规律，测定与干旱相关的光合指标（光合作用、叶绿素荧光、SPAD值）及生理指标（质膜透性和叶片相对含水率等），并分析各指标间的相关性。【结果】环境变化影响甘蔗叶片的CO2和水分交换能力，在高温低湿及高蒸气压差的正常浇水生长环境下，云蔗05-51和粤糖93-159的CO2交换率和H2O交换率较高，甘蔗叶片具有更高的气孔导度和净光合速率。干旱胁迫导致云蔗05-51和粤糖93-159的CO2和水分交换受到抑制。干旱5 d时，2个参试品种的CO2交换率和H2O交换率大幅度降低，干旱9 d导致CO2和水分交换过程接近停滞。与对照相比，干旱胁迫时云蔗05-51和粤糖93-159的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率显著降低（PP2交换和水分交换恢复程度较差，云蔗05-51的各指标恢复程度高于粤糖93-159。【结论】高温低湿及高蒸汽压差的环境有利于促进云蔗05-51和粤糖93-159的光合及水气交换作用；干旱胁迫导致云蔗05-51和粤糖93-159的CO2交换率、H2O交换率、光合作用能力、叶绿素荧光系统及叶片水分等相关生理活动受到抑制；云蔗05-51在干旱胁迫下具有相对更高的气孔导度和蒸腾速率，其抗旱性和复水后的恢复能力均优于粤糖93-159。

• 赤霉素对苦荞生长、结实和产量的影响

  王强, 向达兵, 魏威, 万燕, 甘圳, 邱庆成, 齐安银, 邹鑫, 张捷语,

  【目的】探究赤霉素（GA3）对苦荞生长发育的影响机制，为苦荞高产栽培提供理论依据和技术支撑。【方法】以川荞1号为试验材料，于苦荞始花期叶面喷施不同浓度（0、25、50和75 mg/L）的GA3溶液，其中0 mg/L处理喷施等量清水作为对照（CK），分析不同处理对苦荞生长、光合生理、开花结实及产量的影响。【结果】与CK相比，不同浓度GA3处理均能促进苦荞植株生长，随GA3浓度增加，株高呈显著增高趋势（PP>0.05）。外源GA3能显著提高苦荞光合作用，且均以50 mg/L浓度处理效果最好。与CK相比，苦荞灌浆后期（处理后30 d） 50 mg/L浓度处理的SPAD值提高26.0%，苦荞灌浆中期（处理后20 d） 50 mg/L浓度处理的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率分别提高28.6%、31.3%和16.1%，而胞间CO2浓度降低12.3%。外源GA3还能促进苦荞开花结实，与CK相比，结实率、总花数、成熟籽粒数和枯花数分别增加19.5%、13.8%、30.0%和38.4%，枯粒数降低41.4%。苦荞的单株粒重和产量随着GA3浓度增加呈先升高后降低的变化趋势，50 mg/L处理的单株粒重和产量达最大值，分别较CK显著增加16.1%和21.8%。【结论】叶面喷施GA3可显著提高川荞1号苦荞光合作用，促进开花结实，提高产量，以始花期喷施50 mg/L效果最佳。

• 万寿菊秸秆堆肥在缓解烟草连作障碍中的作用

  黎妍妍, 彭五星, 张婷, 孙玉晓, 李锡宏,

  【目的】探索在大田试验条件下万寿菊秸秆堆肥对烟草连作根际土壤理化性状、微生物群落及烟草青枯病发生的影响，为利用万寿菊秸秆堆肥缓解烟草连作障碍提供依据。【方法】试验于2018—2020年进行，设2个处理：即施用1500 kg/ha万寿菊秸秆堆肥处理（FMC）和不施用万寿菊秸秆堆肥对照（CK）。施用万寿菊秸秆堆肥第3年（2020年），于烟叶移栽后50和100 d时采集烟株根际土壤，测定分析土壤理化指标和土壤细菌、真菌群落结构，并调查烟草青枯病发生情况。【结果】与CK相比，FMC处理的土壤pH和有机质含量显著提高（PP>0.05）； FMC处理也可显著提高土壤细菌群落Sobs和Chao1指数，而对土壤真菌群落多样性的影响较小。施用万寿菊秸秆堆肥可改善土壤微生物群落结构，提升被孢霉属（Mortierella）、毛壳菌属（Chaetomium）等拮抗菌的相对丰度，而降低劳尔氏菌属（Ralstonia）和镰刀菌属（Fusarium）等病原菌的相对丰度。施用万寿菊秸秆堆肥3年可显著降低烟草青枯病的发病率和病情指数，对烟草青枯病的相对防效为47.72%。【结论】万寿菊秸秆堆肥可改善烟株根际土壤理化性状和微生物群落结构，降低烟草青枯病发病情况，在缓解烟草连作障碍方面具有积极作用。

• 南方大豆皱叶发生时叶片形态变化及其对产量性状的影响

  陈文杰, 陈渊, 韦清源, 郭小红, 汤复跃, 赵团结, 梁江,

  【目的】研究南方大豆皱叶发生时叶片形态特征变化及皱叶对产量性状的影响，为明确皱叶对大豆叶片形态、农艺性状和产量相关性状的影响程度及揭示大豆皱叶发生机制提供数据支撑。【方法】利用皱叶症近杂合异质系材料GY_C （皱叶）和GY_N （正常），采用随机区组试验设计，研究大豆皱叶症级为4时，叶片形态、叶绿素含量、光合气体交换参数、农艺及产量相关性状的变化。【结果】皱叶发生后叶片主脉薄壁细胞、皱缩处叶片增厚，叶缘处叶片变薄。叶片皱缩处栅栏组织和海绵组织排列不规则，叶缘处出现多层薄壁细胞。皱叶发生时，大豆叶片鲜重和干重、叶柄鲜重和干重、叶柄长和粗、叶片长和宽、叶面积等形态指标均显著减少（PP>0.05）。大豆发生皱叶后成熟期平均提前3.33 d，茎秆变细，抗倒伏性变差，株高、底荚高、主茎节数等农艺性状也有减少趋势，但不同年份有所不同。皱叶导致大豆单株干物质重、单株荚数、单株粒数、单株粒重、百粒重等产量相关性状显著减少，GY_C较GY_N两年平均减产43.11%。皱叶发生时大豆籽粒蛋白含量有降低趋势、油分含量有增高趋势，但不同年份存在差异。【结论】南方大豆皱叶发生时形态上主要因叶缘不能正常伸展所致，皱叶（症级为4）发生后大豆叶面积减少，植株干物质积累变少，生育期缩短、抗倒伏性变差，严重影响单株粒重等产量相关性状。

• 稗草生防菌NX2A的鉴定、安全性及对稗草的致病条件

  钟加日, 刘璐, 曾颖, 朱哲远, 柏连阳, 彭迪,

  【目的】明确分离自感病稗草叶片的菌株NX2A的分类学属性、对农田常见作物的安全性及对稗草的致病条件，为菌株NX2A的田间应用提供理论依据。【方法】结合形态学观察和ITS序列分析确定菌株NX2A的分类学属性；通过作物安全性评价明确菌株NX2A对农田常见作物水稻、油菜、辣椒、番茄和茄的安全性；选用L9（34）正交表，以湿度、稗草叶龄、光照时间和孢子浓度为考察因素，以病情指数和鲜重防效为考察指标，进行菌株NX2A致病条件试验。【结果】结合菌株NX2A的形态学鉴定和分子生物学鉴定结果，将菌株NX2A鉴定为新月弯孢菌（Curvularia lunata）；作物安全性评估试验结果表明，菌株NX2A孢子悬浮液对水稻、油菜、辣椒、番茄和茄的生长无明显影响，植株叶片未见与稗草相同或类似的病斑；菌株NX2A对稗草的致病条件测定结果表明，各因素影响菌株NX2A对稗草病情指数的顺序为光照时间>孢子浓度>湿度>稗草叶龄，影响菌株NX2A对稗草鲜重抑制率的顺序为孢子浓度>光照时间>湿度>稗草叶龄。菌株NX2A防控稗草的最优组合为A3B1C3D2，即以浓度为5.0×106个/mL的孢子悬浮液喷施于1叶期稗草，12 h光照、85%湿度保湿培养。【结论】新月弯孢菌菌株NX2A对稗草有较好的防控效果，且对水稻、油菜、辣椒、茄和番茄等作物安全，具有作为水田稗草生物防控的潜力。

• 黄芩乙醇提取物对猕猴桃溃疡病致病菌抑菌机理研究

  裴沪荣, 卢明秀, 龙力, 龙章富,

  【目的】探究黄芩乙醇提取物（Ethanol extract of Scutellaria baicalensis，ESB）对猕猴桃溃疡病病原菌丁香假单胞菌猕猴桃致病变种（Pseudomonas syringae pv.actinidiae，Psa）的抑菌机理，为开发新型植物源杀菌剂提供理论依据。【方法】以Psa为研究对象，采用琼脂打孔法评估Psa对ESB的敏感性；通过梯度稀释法确定液体培养时ESB对Psa的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。探究1/4MIC、1/2MIC、3/4MIC和MIC下ESB对Psa的作用效果。通过菌液光密度绘制Psa生长曲线、电导率仪测定培养液上清电导率、考马斯亮蓝法检测胞外可溶性蛋白含量、碱性磷酸酶（AKP）试剂盒检测AKP活性、硫酸亚铁法测定菌体对磷的代谢、氧化还原反应测定呼吸链脱氢酶活性、0.3%固体培养基检测Psa泳动能力；扫描电镜和透射电镜观察Psa在MIC处理下的形态变化。【结果】 5种ESB浓度作用下的抑菌圈直径均在16.00 mm以上，MIC和MBC均为2.4 mg/mL。ESB能抑制Psa生长，破坏细胞膜和细胞壁，造成电解质、蛋白质外泄，干扰菌体正常的物质和能量代谢； ESB可显著抑制Psa泳动能力，阻碍细胞的迁移。扫描电镜和透射电镜观察发现，ESB作用后的Psa菌体形态出现缩短、凹陷、畸形、破裂，细胞质外泄，菌体大量裂解等现象。【结论】ESB可破坏Psa的细胞结构，干扰物质和能量代谢，抑制菌体生长，具有开发成植物源杀菌剂的潜力。

• 抑制马铃薯干腐病菌的活性酒糟菌筛选、鉴定及抑菌活性测定

  郝玉凡, 沈硕,

  【目的】明确来源于青稞酒糟的菌株对马铃薯干腐病病原菌的抑菌活性，为马铃薯保鲜菌剂及生防制剂的开发和利用提供科学依据。【方法】采用平板对峙法对分离自青稞酒糟的40株菌株进行抑制马铃薯干腐病病原菌（青9A-7-5、青9A-8-8、青9A-5-3和青9A-6-2）活性测定，从中筛选活性菌株并进行活性菌株稳定性评价；采用牛津杯法对活性菌株发酵液萃取物进行抑制马铃薯干腐病病原菌活性测定及稳定性评价；通过形态学、生理生化特征及分子生物学方法对活性菌株进行鉴定。【结果】通过平板对峙法从40株青稞酒糟菌株中筛选出8株（菌株JZ2c24、JZ3d09、JZ3c08、JZ2b13、JZ1-4-10、JZ1-1-1、JZ1-1-9和JZ1-4-1）对马铃薯干腐病病原菌具有较高抑菌活性的菌株，其中，菌株JZ1-1-1对病原菌青9A-7-5的抑菌活性稳定，其抑菌带缩小率为25.42%，菌株JZ1-1-9对病原菌青9A-6-2的抑菌活性稳定，其抑菌带缩小率为26.20%；在浓度为50.00 mg/mL时，菌株JZ1-1-1的发酵液水相萃取物溶液对马铃薯干腐病病原菌青9A-7-5的抑菌活性较高，其抑制中浓度（EC50）为19.16 mg/mL，菌株JZ1-1-9的发酵液水相萃取物溶液对马铃薯干腐病病原菌青9A-6-2的抑菌活性较高，其EC50为20.80 mg/mL，且菌株JZ1-1-1的发酵液水相萃取物溶液最稳定。结合菌落形态、生理生化特征及分子生物学鉴定结果，将菌株JZ1-1-1鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）。【结论】来源于青稞酒糟的贝莱斯芽孢杆菌菌株JZ1-1-1具有作为马铃薯保鲜菌剂及生防菌剂的潜力。

• 雪茄烟叶发酵过程中颜色变化与主要含氮化合物及评吸质量的关系

  刘路路, 郭文龙, 胡希, 丁松爽, 向欢, 叶小辛, 黄明月, 柴志顺, 时向东,

  【目的】分析雪茄烟叶发酵过程中颜色变化与主要含氮化合物（总氮、烟碱、蛋白质、氨基酸、硝酸盐、亚硝酸盐、叶绿素a和叶绿素b）及评吸质量的关系，为提升雪茄烟叶发酵品质提供参考依据。【方法】以德雪1号上部叶为试验材料，采用人工堆积法进行发酵，测定发酵过程中雪茄烟叶颜色、主要含氮化合物及评吸质量的变化，探究烟叶颜色变化与主要含氮化合物、评吸质量的关系并建立动态变化预测方程。【结果】雪茄烟叶发酵过程中总氮、烟碱、蛋白质、氨基酸、叶绿素a、叶绿素b含量与颜色参数L*、a*、b*、C值均呈缓慢降低的变化趋势，发酵0~10 d雪茄烟叶含氮化合物降解速率较快，发酵25~30 d差异不显著（P>0.05），发酵30 d时，总氮、蛋白质、烟碱、氨基酸、叶绿素a和叶绿素b含量分别降解18.8%、23.5%、42.5%、31.8%、42.2%和41.4%，L*、a*、b*和C值分别为30.245、8.305、14.350和16.580。硝酸盐、亚硝酸盐含量和H0值呈先升高后降低的变化趋势，△E值呈缓慢上升的变化趋势，发酵30 d时，硝酸盐含量、亚硝酸盐含量、H0和△E值分别为5.78 mg/g、21.11 μg/g、30.060和62.303。发酵25 d时烟叶评吸质量较好，雪茄烟风格彰显，烟叶香气透发，烟气醇和感、饱满度和干净度明显提升，杂气和刺激性明显降低，余味舒适，烟气平衡感较好，各评吸指标均优于未发酵烟叶。相关分析结果表明，发酵过程中雪茄烟叶颜色参数与主要含氮化合物、评吸质量的相关性达显著（PP<0.01）水平。回归分析结果表明，总氮、蛋白质、氨基酸、叶绿素a和叶绿素b对发酵过程中雪茄烟叶颜色变化有直接影响，评吸质量与颜色参数关系密切。【结论】发酵过程中颜色参数与主要含氮化合物及评吸质量关系密切，通过建立发酵过程中评吸质量变化模型来提高雪茄烟叶发酵过程中的可控性，获得评吸质量较好的雪茄烟叶。

• 金露梅黄酮提取工艺的响应面优化及其抗氧化和降血糖活性分析

  薛鹤, 曾阳, 李锦萍, 左文明, 刘力宽,

  【目的】优化金露梅中黄酮的超声提取工艺条件，检测黄酮化合物的种类及含量，并分析其抗氧化和降血糖活性，为金露梅的综合利用提供技术支持。【方法】以总黄酮提取率为指标，采用单因素和响应面分析法对超声提取金露梅黄酮的主要工艺参数进行优化分析，利用多重层析柱对黄酮化合物进行分离纯化，并比较各组分的抗氧化和降血糖活性。【结果】 4个因素对金露梅总黄酮提取率影响的显著性顺序为液料比>超声时间>乙醇体积分数>超声功率，建立的回归方程为Y=37.84+14.48A+14.93B+3.02C+9.38D-0.03AB-0.66AC-0.01AD-0.01BD-0.01CD-14.71A2-11.25B2-16.96C2-12.89D2（Y表示总黄酮提取率，A、B、C、D分别表示液料比、乙醇体积分数、超声功率和超声时间）；超声提取金露梅黄酮的最佳工艺条件为：液料比39.78：1 （mL/g）、乙醇体积分数65.47%、超声功率390.98 W、超声时间49.55 min，在此条件下金露梅总黄酮提取率为47.59 mg/g。金露梅黄酮化合物中发现含有8种化合物，其中含量最高的为槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸（10.90 mg/g）。柚皮素对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率最低，仅为5.0%，其余7种化合物对DPPH自由基的清除率均达50.0%以上，表现出良好的抗氧化活性。金露梅黄酮化合物对葡萄糖消耗率均高于二甲基亚砜（DMSO），其中（+）-儿茶素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸和3-阿拉伯葡萄糖基槲皮素对葡萄糖的消耗率达19.5%以上，表现出良好的降血糖活性。【结论】经响应面优化的金露梅黄酮超声提取工艺切实可行，建立的回归方程具有较高的准确性；多重层析柱法可实现金露梅中黄酮化合物的分离纯化，各组分除柚皮素外，均具有明显的抗氧化活性，且各组分化合物均有一定的降血糖活性。金露梅可作为一种天然抗氧化剂和降血糖剂来源在食品、医药等方面进行开发利用。

• 响应面法优化软糯口感的粉圆制作配方

  苏可珍, 唐月登, 王玉牛, 胡聪, 谢林梦, 宋贤良,

  【目的】优化粉圆配方工艺条件，为软糯口感粉圆的加工生产提供技术支持。【方法】以木薯淀粉为原料，以感官评分和质构参数为评价指标，在单因素试验基础上，利用Design-Expert 8.0.6进行响应面分析，并建立二次多项式数学模型，依据回归分析确定粉圆最优工艺条件。【结果】建立了感官评分（Y）对羧甲基纤维素钠添加量（A）、黄原胶添加量（B）和瓜尔豆胶添加量（C）的二次回归方程： Y=89.9-0.18A-0.79B-0.22C+0.36AB+0.92AC+2.06BC-1.78A2-2.14B2-1.03C2。各因素对粉圆感官评价的影响排序为黄原胶添加量>瓜尔豆胶添加量>羧甲基纤维素钠添加量；黄原胶添加量与瓜尔豆胶添加量的交互作用对粉圆感官品质影响极显著（PP<0.05）。粉圆制作的最优配方为：预糊化淀粉添加量0.07%、羧甲基纤维素钠添加量0.08%、黄原胶添加量0.05%、瓜尔豆胶添加量0.05%，在此条件下，粉圆感官评分91.4分，与模型预测值（89.9分）接近，且弹性（0.671）、咀嚼性（426.5 gf）、硬度（807.2 gf）、粘结性（1644 gf·mm）和内聚性（0.788）等质构数据相对较好。【结论】通过响应面试验优化的粉圆制作配方可有效提高粉圆感官品质，表现出粉圆感官与质构特性的关系，建立的回归模型可靠，可为实际生产提供理论依据和预测。

• 多杀性巴氏杆菌与禽白血病病毒亚群混合感染诊断及相关基因分析

  罗东还, 吴强, 温贵兰, 胡璇, 张小波, 文明, 欧德渊, 龚新勇,

  【目的】明确引起贵州某规模化（20万羽）养殖场三黄鸡群发病的病因及科学用药，最大限度减轻经济损失，同时为规模化养殖场防控禽白血病和净化鸡群提供参考依据。【方法】无菌采集送检病鸡的心脏、肝脏和脾脏等组织进行细菌分离培养、生化试验、荚膜分型、毒力基因和耐药基因等分子生物学检测，同时对采集病料进行禽白血病病毒（ALV） PCR检测及gp85基因克隆测序分析。【结果】成功分离获得1株多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida，Pm），命名为Pm-GZXF2021； Pm-GZXF2021为荚膜A型Pm，具有黏附素（ptfA、hsf-1、hsf-2、pfhA、fimA和tadD）、超氧化物歧化酶（sodA）、外膜蛋白（ompA、ompH、plpB和oma87）和铁摄取（exbB、exbD、tonB、Fur、hgbB和hgbA）相关的毒力基因，同时携带有喹诺酮类的gyrB耐药基因和内酰胺类的tem耐药基因；药敏试验结果表明，Pm-GZXF2021对米诺环素、丁胺卡那、哌拉西林、庆大霉素、多西环素、氧氟沙星、新霉素、头孢拉定、麦迪霉素及头孢哌酮等药物敏感，而对头孢他啶、苯唑西林、羧苄西林及头孢曲松等药物已产生耐药性；健康昆明小鼠在接种Pm-GZXF2021纯培养菌液（1.7×108 CFU/mL）后12 h内全部死亡，剖检可见昆明小鼠小肠均出现胶冻样浸润，肝脏肿大且伴有白色坏死灶。从病鸡的组织样品检测出ALV，命名为ALV-GZXF2021；由基于gp85基因核苷酸序列相似性构建的ALV系统发育进化树可知，ALV-GZXF2021与5株ALV-K参考毒株处于同一分支，与A、B、D、E、J亚群处于不同分支，即ALV-GZXF2021属于K亚群。【结论】贵州某规模化养殖场三黄鸡群发病是由Pm与K亚群外源性ALV混合感染所致。因此，养殖场应采取相应的防控措施，一般包括加强饲养管理，做好生物安全措施及疫苗接种等，尤其是建立无禽白血病的种鸡群。

• 鳗鲡疱疹病毒ORF87基因克隆及其多克隆抗体的制备

  陈曦, 杨金先, 李英英, 陈强, 黄小红, 宋铁英, 葛均青,

  【目的】克隆鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus，AngHV） ORF87基因，分析其序列特征并制备多克隆抗体，为揭示ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用机制提供技术支持。【方法】根据GenBank已公布AngHV参考株（NC_013668）的ORF87基因序列设计引物，从AngHV-FJ株基因组中扩增出ORF87基因，构建重组质粒pMD19-ORF87经酶切鉴定和测序验证后，采用Softberry、ProtParam、CDD、TMHMM、SignalP 5.0、PSORT及BepiPred等在线软件进行生物信息学分析；将ORF87基因克隆至pET-32a表达载体上，转化大肠杆菌BL21 （DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测及Western blotting鉴定；以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔，制备ORF87多克隆抗体。【结果】克隆获得的AngHV-FJ株ORF87基因为2127 bp，与GenBank已发布的参考序列高度同源（相似性为99.72%），仅存在4个碱基突变；其编码蛋白分子量为80.1 kD，理论等电点（pI）为7.62，不稳定系数为42.38，总平均亲水性为-0.271。ORF87蛋白具有蛋白激酶C超家族（PKC-like Superfamily）的保守结构域，但不具信号肽和跨膜结构域；其亚细胞定位可能位于细胞核和细胞质膜，存在19个潜在B细胞抗原表位，即具有良好的免疫原性。AngHV-FJ株ORF87基因可在大肠杆菌中高效表达，表达获得的融合蛋白约100.0 kD，主要以包涵体形式存在；以融合蛋白免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体效价达1：16000，能特异性识别AngHV的ORF87蛋白。【结论】 AngHV-FJ株源ORF87基因经原核表达载体诱导表达获得的融合蛋白ORF87具有Serine/threonine蛋白激酶活性，以其免疫新西兰大白兔制备获得的ORF87多克隆抗体具有高效价，能特异性识别AngHV感染，可作为亚细胞定位及表达时相分析等蛋白特性研究的工具，用于解析ORF87基因在AngHV侵染过程中的作用。

• 鸡TRAF6和TIFA基因克隆及其组织表达特征分析

  赵采芹, 王燕碧, 张福平, 唐宏, 周磊, 韩一帆, 段志强,

  【目的】分析肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）及具有叉头相关结构域的TRAF相互作用蛋白（TIFA）基因在贵州黄鸡不同发育阶段各组织中的表达特点，为后续开展TRAF6和TIFA基因调控鸡的生长发育及二者相互作用调控鸡相关病毒复制打下基础。【方法】利用RT-PCR扩增鸡TRAF6和TIFA基因编码区（CDS）序列，通过ProtParam、SOPMA、SWISS-MODEL及MegAlign等在线软件进行生物信息学分析；同时采用实时荧光定量PCR分别检测TRAF6和TIFA基因在鸡胚发育第14 d （E14d）、鸡出壳第1 d （H1d）、第7 d （H7d）和第14 d （H14d）不同组织中的表达情况。【结果】鸡TRAF6和TIFA基因CDS序列全长分别为1638和564 bp，编码545和187个氨基酸残基，对应的编码蛋白分子量约62和22 kD，理论等电点（pI）为6.14和5.18。鸡TRAF6蛋白二级结构中无规则卷曲占47.08%、α-螺旋占38.14%、延伸链占11.86%、β-转角占2.92%，鸡TIFA蛋白二级结构中无规则卷曲占51.87%、α-螺旋占27.81%、延伸链占16.58%、β-转角占3.74%，二者均以无规则卷曲和α-螺旋为主。TRAF6和TIFA基因核苷酸序列同源比对分析均显示鸡与火鸡的相似性最高，分别为96.4%和92.2%，符合物种进化规律，也表明TRAF6和TIFA基因在禽类中具有一定的遗传保守性。TRAF6和TIFA基因在贵州黄鸡不同发育阶段的眼球、脑组织、心脏、肝脏、肺脏、肌胃、胸肌及腿肌中均有不同程度表达，且内脏组织的相对表达量普遍高于肌肉组织，以肺脏中的相对表达量最高，其次是肝脏和肌胃；从E14d发育到H14d，鸡TRAF6和TIFA基因在肺脏、肝脏和肌胃中的表达均呈先下降后上升的变化趋势，在眼球中则呈先上升后下降再上升的变化趋势，在脑组织、胸肌和腿肌的表达水平较低且趋于稳定。【结论】 TRAF6和TIFA基因在鸡不同发育阶段各组织中均有表达，且以肺脏和肝脏中的表达水平相对较高，在脑组织、胸肌和腿肌中的表达相对较低，故推测TRAF6和TIFA基因相互作用对鸡的生长发育具有调控作用。

• 柠檬酵素对肥胖小鼠降脂减肥及免疫功能的调节作用

  韩杰, 王璐瑶, 冯瑞章, 梁启明, 梁寒峭, 魏琴, 张勇波,

  【目的】明确柠檬酵素对小鼠降脂减肥作用及免疫功能的影响，为探究柠檬酵素用于治疗肥胖引起的高血压、糖尿病和心血管疾病提供理论依据。【方法】以SPF级雄性C57BL/6J小鼠为研究对象，通过饲喂H10301型60%高脂高糖饲料35 d构建肥胖模型，然后以低剂量（310.0 mg/kg）、中剂量（620.0 mg/kg）、高剂量（1240.0 mg/kg）柠檬酵素及奥利司他（阳性对照，15.6 mg/kg）分别经口灌胃肥胖小鼠，持续给药42 d，空白对照组小鼠饲喂普通饲料及灌胃等体积的生理盐水。给药期间记录动物体重及摄食量；给药结束后计算小鼠的Lee’ s指数、脏器指数及脂体比，测定各处理组小鼠的血脂水平［总甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）］及葡萄糖耐量，制作组织切片观察肝脏脂质沉积情况和病理变化，并通过流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞各亚群比例。【结果】经柠檬酵素处理后可有效降低肥胖小鼠的体重、Lee’ s指数和脂体比，其中以柠檬酵素高剂量组的效果最佳，表现为小鼠的体重和Lee’ s指数极显著低于肥胖模型组小鼠（PPP>0.05，下同）。灌胃柠檬酵素后，肥胖小鼠的肝脏指数明显下降，而脾脏、心脏和肾脏的脏器指数均无显著差异；血清中的TC、TG和LDL-C水平较肥胖模型组小鼠呈不同程度的下降趋势，HDL-C水平则极显著升高；柠檬酵素可改善肥胖小鼠肝脏中脂质聚积的情况，其葡萄糖耐受能力也得到明显改善。此外，柠檬酵素能促进肥胖小鼠脾脏中CD4+比例升高，同时降低CD8+比例，且具有一定的浓度依赖性，在高剂量柠檬酵素作用下CD4+/CD8+比值由肥胖模型组小鼠的1.49±0.11上升至3.20±0.42； CD4+Foxp3+在柠檬酵素介入后显著降低。【结论】柠檬酵素对高脂饲料诱导肥胖小鼠具有较强的减肥效果，还能改善肥胖小鼠免疫状态较差的现象，因此柠檬酵素可作为减肥保健食品在慢性疾病辅助治疗中推广应用。

• 4种中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响

  张建明, 张德志, 舒德斌, 田甜, 饶军, 苏巍,

  【目的】探讨不同中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激指标的影响，筛选能有效提高长江鲟幼鱼免疫力及抗病力的中药复方，为中药在长江鲟养殖生产中的推广应用提供参考依据。【方法】将17味中药按照中药配伍理论设计4种中药复方，分别是复方I（鱼腥草：金银花：大黄：茯苓：甘草︰黄芪=3：3：1：2：1：2）、复方II（板蓝根：大黄：五加皮：党参=3：3：4：3）、复方III（金银花：杏仁：贯众：大青叶：山豆根：桔梗=3：2：2：2：3：2）、复方IV（黄芪：黄柏：甘草：山楂：五味子：大黄：党参=3：3：1：2：2：2：2），以不添加中药为对照组，按0.5 g/kg的添加量进行长江鲟幼鱼饲喂试验，并于第7和第14 d采集血样测定各项血清生理指标。【结果】与对照组相比，复方I组和复方II组可不同程度地提高长江鲟血清超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化物酶（POD）、碱性磷酸酶（AKP）活性及总抗氧化能力（T-AOC）、热休克蛋白70（HSP70）含量，降低丙二醛（MDA）含量，但仅部分指标差异达显著水平（PP<0.01，下同），POD活性与SOD活性、CAT活性及T-AOC呈显著正相关，SOD活性与COR含量、T-AOC与COR含量呈极显著负相关，GSH-Px活性与COR含量、T-AOC与MDA含量呈显著负相关。【结论】在基础饲料中添加适宜的中药复方对长江鲟幼鱼抗氧化和抗应激能力有显著促进作用，尤其以复方III（金银花、杏仁、贯众、大青叶、山豆根、桔梗）和复方IV（黄芪、黄柏、甘草、山楂、五味子、大黄、党参）的效果最佳，可有效缓解长江鲟幼鱼机体面临的应激反应，达到保护效果。

• 枸杞多糖对尼罗罗非鱼生长发育、消化酶活性及肠道组织形态的影响

  陶云开, 高雪梅, 袁宗伟, 郭忠宝, 陈诏, 张旭, 陈少翠, 唐瞻杨, 黄婷,

  【目的】明确枸杞多糖对罗非鱼机体生长发育及消化功能的影响，为罗非鱼健康养殖提供理论参考，同时为促进罗非鱼养殖产业的可持续健康发展提供新思路。【方法】在尼罗罗非鱼基础饲料中添加5个不同剂量（0~2000 mg/kg）的枸杞多糖，进行40 d的养殖试验后测量尼罗罗非鱼的体重及全长，计算相对增重率（WG）、相对增长率（LG）、特定生长率（SGR）和饲料系数（FCR），采用ELISA试剂盒分别检测淀粉酶（Amylase）、蛋白酶（Protease）及脂肪酶（Lipase）活性，并采集前肠、中肠和后肠组织制作切片，通过光学显微镜观察肠道组织形态的变化特征。【结果】于基础饲料中添加不同剂量枸杞多糖对尼罗罗非鱼的生长发育均起促进作用，其中以添加1500 mg/kg处理组的促进效果最佳，至养殖试验结束时尼罗罗非鱼的终末全长、终末体重、WG、LG和SGR均达最高值，分别为13.45 cm、48.74 g、6.96%、0.94%和5.19%/d；而FCR最小，仅为1.88。尼罗罗非鱼中肠组织的蛋白酶和淀粉酶活性在1500 mg/kg处理组中显著升高（PP>0.05）。肠绒毛长度在尼罗罗非鱼前肠组织中以1500 mg/kg处理组的最短（0.351 mm）、在后肠组织中则以1500 mg/kg处理组的最长（0.320 mm），与对照组（0 mg/kg）相比差异显著；肌层厚度在前肠和中肠组织中均以500 mg/kg处理组的最厚，分别为0.089和0.087 mm，在后肠组织中则以1000 mg/kg处理组的最薄（0.065 mm）、2000 mg/kg处理组的最厚（0.099 mm）。【结论】枸杞多糖可提高罗非鱼的消化酶活性，改善其肠道组织形态，从而影响罗非鱼的生长发育，且以添加剂量为1500 mg/kg的效果最佳。