南方农业学报杂志

南方农业学报杂志2020年第7期

• 绵羊Fsp27基因5'-UTR区碱基突变与尾脂沉积能力的关联性

  张伟, 王世银, 高莉, 徐梦思, 王新华, 甘尚权,

  目的明确绵羊脂肪特异蛋白27基因(Fsp27)5'端非编码区(5'-UTR)g.16767527位点和g.16767779-16767780位点突变与其尾脂沉积能力的关联性,为低脂肪绵羊品种选育提供理想的分子标记,提高低脂肪绵羊品种改良选育效率.方法以5个不同尾脂沉积能力的绵羊品种为研究对象,包括脂尾型绵羊品种阿勒泰羊,短脂尾型绵羊品种小尾寒羊和湖羊,长瘦尾型绵羊品种中国美利奴细毛羊和萨福克羊,采用PCR-SSCP结合基因测序对绵羊Fsp27基因5'-UTR区碱基突变情况进行检测,并分析相关突变与绵羊尾脂沉积能力的关联性.结果绵羊Fsp27基因5'-UTR区g.16767527位点为C/A突变,在所检测的绵羊群体中均存在3种基因型(CC、CA和AA),但在不同尾脂沉积能力绵羊品种群体中的基因型频率存在明显差异:阿勒泰羊群体中以CC基因型为主,基因型频率为0.869;小尾寒羊和湖羊群体中以CA基因型为主,基因型频率分别为0.698和0.628;中国美利奴细毛羊和萨福克羊群体则以AA基因型为主,基因型频率分别为0.616和0.833.g.16767527位点的基因型分布在阿勒泰羊、小尾寒羊和湖羊群体中极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE<0.01),在萨福克羊群体中显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE<0.05).g.16767779-16767780位点为双碱基突变,对应为GG/GG、GG/TC和TC/TC基因型;在尾脂沉积能力强的阿勒泰羊、小尾寒羊和湖羊群体中,g.16767779-16767780位点以TC为优势等位基因,对应的等位基因频率分别为0.862、0.954和0.927;在尾脂沉积能力差的中国美利奴细毛羊和萨福克羊群体中则以GG等位基因为主,其等位基因频率分别为0.980和0.983.这2个位点的突变均对绵羊Fsp27基因5'-UTR区二级结构产生明显影响.结论绵羊Fsp27基因5'-UTR区g.16767527位点的C/A突变和g.16767779-16767780位点的GG/TC突变与其尾脂沉积能力密切相关,可作为分子标记应用于低脂肪绵羊品种的辅助选育.

• 麦茬高度对宜粒收夏玉米苗期质量、干物质转运及产量的影响

  夏来坤, 谷利敏, 黄保, 穆心愿, 齐建双, 丁勇, 唐保军, 张凤启, 张君, 邢健伟,

  目的在秸秆全量还田、贴茬免耕直播条件下,探索宜粒收夏玉米机播的最佳冬小麦留茬高度,提高宜粒收夏玉米苗期质量和籽粒产量,为提高冬小麦—夏玉米轮作体系中机械化质量及实现高产高效栽培提供理论依据.方法选用宜粒收玉米新品种新单68(对照品种郑单958)为研究对象,设3个麦茬高度处理(0、10和30 cm),研究麦茬高度对宜粒收夏玉米苗期质量、冠层特性、干物质积累分配与转运及产量的影响.结果0~20 cm土层土壤体积含水量随麦茬高度增加而增加,10 cm处理5和15 cm土层土壤体积含水量分别比0 cm处理高7.87%和15.26%,30 cm处理5和15 cm土层土壤体积含水量分别比0 cm高16.60%和19.60%.随麦茬高度增加,夏玉米出苗率、株高整齐度和叶片SPAD值降低,株高和穗位高增加,茎粗变细,花前叶面积指数增加.夏玉米群体干物质积累量在6叶期和9叶期随麦茬高度增加而显著增加(P0.05).与郑单958相比,新单68的株高、穗位高、SPAD值、干物质积累量、花后干物质积累对籽粒干物质积累贡献率和产量均增加,生育前期叶面积指数较高但成熟期落黄早;开花期干物质转运率和籽粒分配率新单68低于郑单958.结论10 cm麦茬高度有利于保持较高土壤含水量,提高玉米出苗率和株高整齐度,维持较高的叶面积指数和SPAD值,优化干物质积累和分配特性,进而提高夏玉米籽粒产量.

• 龙眼SPS基因克隆及其表达分析

  帅良, 殷菲胧, 廖玲燕, 刘云芬, 段振华, 宋慕波,

  目的克隆龙眼蔗糖磷酸合成酶基因(DlSPS)并分析其表达特性,为深入探究SPS基因家族成员在植物生长发育过程中的调控机制提供理论依据.方法以石硖龙眼为材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆DlSPS基因,对其进行生物信息学分析,并用实时荧光定量PCR检测龙眼不同组织根、茎、叶、幼果、果皮、花、熟果(果肉和果皮)的相对表达量;测定分析果实发育过程中蔗糖含量、SPS活性及DlSPS基因表达的相关性.结果克隆获得的DlSPS基因(GenBank登录号为KP769779)cDNA全长3504 bp,编码1057个氨基酸残基,其编码蛋白分子量118.38 kD,理论等电点6.09,脂溶指数85.53,不稳定系数43.69,亲/疏水性平均值-0.412,为不稳定的亲水蛋白.DlSPS蛋白与温州蜜桔(BAA23213.1)SPS蛋白同源性最高,聚在同一小分支上,表明二者亲缘关系较近.DlSPS蛋白二级结构中,α-螺旋占35.0%,延伸链占13.8%,无规则卷曲占51.2%,与其三级结构预测结果相符.DlSPS基因在不同组织中均有表达,但表达量存在明显差异,其中在叶中的表达量显著高于其他组织(P<0.05,下同),其次是在幼果和花中的表达量,在根、果肉、果皮和茎中的表达量较低.龙眼果实发育过程中,蔗糖含量和SPS活性均呈先上升后下降的趋势,但蔗糖含量在谢花后101 d达最大值,而SPS活性在谢花后94 d活性达最大值,说明SPS活性与蔗糖积累具有一定的相关性.DlSPS基因的表达量随着果实发育呈略微下降—大幅上升—略微下降的变化趋势,在谢花后101 d表达量达到最大值,此时蔗糖含量也达最大值.结论SPS在龙眼不同组织生长发育过程中对蔗糖积累发挥重要作用,尤其是对叶片和果实中蔗糖积累发挥关键作用.

• 广西原产和引种荔枝种质资源的遗传多样性分析及核心种质构建

  李冬波, 徐宁, 秦献泉, 李鸿莉, 侯延杰, 邱宏业, 张树伟, 朱建华, 彭宏祥,

  目的利用SSR分子标记对广西荔枝种质资源进行遗传多样性分析并构建核心种质,为广西荔枝种质资源的保存、遗传改良及创新利用提供理论依据.方法以广西原产和引种的88份荔枝种质资源为研究对象,利用40对SSR引物对其进行遗传多样性和聚类分析,在此基础上按原始群体50.00%、25.00%和12.50%的取样比例,采用逐步聚类法优先选择性状优良材料的原则构建广西荔枝核心种质.结果40对SSR引物从88份荔枝种质资源中共扩增出282条清晰的条带,每对引物扩增条带数2~13条,平均7.05条,其中,多态性条带182条,每对引物扩增的多态性条带数1~13条,平均4.55条,每对引物扩增条带的多态性比率为14.29%~100.00%,平均64.54%.88份荔枝种质资源的遗传相似系数为0.83~0.96,说明其遗传多样性较低;在遗传相似系数0.86处,88份荔枝种质资源可分为七大类群,第Ⅰ~Ⅶ类群分别包含3、12、6、6、1、2和58份种质,其中第Ⅰ类群均为龙荔种质资源,第Ⅱ类群主要为早熟种质,第Ⅳ类群主要为早熟实生种质,表明荔枝种质间的亲缘关系与熟期存在一定的相关性.88份荔枝种质资源在40个SSR位点的平均观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Shannon指数(I)和期望杂合度(He)分别为3.2750、2.1137、0.8092和0.5107.核心种质-1、核心种质-2和核心种质-3的种质资源数量分别为44、22和11份,其中,核心种质-2的Ne、I和He 3个遗传多样性参数均最高,分别为2.1774、0.8452和0.5271;仅核心种质-3的Na与原始群体存在极显著差异(P0.05),表明核心种质-1和核心种质-2均能充分代表原始群体的遗传多样性,根据核心种质构建的原则,最终选择核心种质-2作为广西荔枝核心种质.结论SSR分子标记是一种适用于荔枝资源遗传多样性分析和核心种质构建的理想分子标记.广西荔枝种质资源遗传背景相对较窄,遗传多样性较低,今后应加强荔枝种质资源的引进与利用.

• 施用土壤pH改良剂对弱碱性荔枝园土壤性质及荔枝生长的影响

  邱全敏, 罗东林, 罗乐洋, 周昌敏, 白翠华, 姚丽贤,

  目的研究比较不同土壤pH改良剂在弱碱性荔枝园土壤的施用效果,为该类荔枝园土壤pH的改良提供参考依据.方法采集四川省泸州市弱碱性荔枝园土壤(pH 7.53±0.10),分别添加硫磺(2 g/kg)、硫酸铝(4 g/kg)和硫铁矿(4 g/kg),以不加改良剂为对照,同时进行土壤培养试验和荔枝盆栽试验,比较不同改良剂对土壤性质及荔枝生长的影响.结果培养试验结果表明,施用硫磺能显著降低土壤pH、土壤脲酶活性和碱性磷酸酶活性(P0.05,下同)且时效短,对土壤养分及土壤酶活性的影响则与养分和酶的种类有关.盆栽试验结果显示,施用改良剂对移栽230 d后的荔枝叶片光合特性和叶绿素指数均无显著影响,但在移栽300 d后,对照及施用硫酸铝和硫铁矿处理的大部分荔枝植株已逐渐枯死;施用硫磺虽然较对照显著促进荔枝生长,但与移栽时相比,收获时其生物量增量仅为9.55±5.08 g/株,长势仍显著弱于酸性土壤中的荔枝长势.结论在弱碱性荔枝园土壤即使施用大量酸性改良剂,其促进荔枝生长的效果也不理想.建议在弱碱性土壤上谨慎规模种植荔枝.

• 8个番荔枝栽培品种的花粉形态扫描电镜观察

  方仁, 安振宇, 黄伟雄, 白先进, 尧金燕, 龙兴, 周双云, 张继,

  目的明确番荔枝常见栽培品种的花粉形态特征及各品种间的亲缘关系,为番荔枝品种的分类鉴定研究提供理论依据.方法利用冷场发射扫描电镜技术,对8个番荔枝栽培品种的花粉形状、花粉大小及花粉外壁纹饰等形态特征进行观察,并进行主成分和聚类分析.结果供试番荔枝品种的花粉外部形态均呈长球形,花粉以四合体形式存在,辐射对称,极面观呈近圆形或菱形或四角形,赤面观呈近椭圆形,无萌发沟;各品种的花粉形状、花粉大小及花粉外壁网孔密度和大小均存在差异,其中,花粉大小为489.46~721.80μm2,极轴长为25.85~31.10μm,赤道轴长为18.93~23.15μm;花粉外壁均为网状饰纹,网孔直径为0.22~0.33μm,网孔密度为1.61~2.60 n/μm2.非洲骄傲、吉夫纳和绿钻品种间的花粉大小、网孔直径和网孔密度等性状指标差异不明显,但与其他供试品种间存在显著差异(P<0.05).花粉大小、极轴长、赤道轴长等特征指标与花朵的长度、花径宽度、鲜重等性状指标呈负相关.主成分分析结果显示,花粉外壁纹饰、花粉大小和花粉形状的差异可作为番荔枝品种分类的参考依据.而聚类分析结果显示,非洲骄傲、吉夫纳和绿钻3个品种的亲缘关系较接近,归为一类;其余栽培品种归为另一类.结论花粉形状、花粉大小和花粉壁纹饰等性状指标的差异可用作番荔枝品种(系)间亲缘关系及分类鉴定的孢子学依据.

• 火龙果采后病原菌的分离鉴定及抑制效应研究

  胡翠平, 黄慧燕, 周桂,

  目的分离鉴定广西采后火龙果果实上的病原真菌,明确病原菌菌株对季铵化壳聚糖(HTCC)的敏感特性,为火龙果果实的采后病害防治提供科学依据.方法采用常规组织分离法从采后贮藏自然发病的火龙果果实上分离病原菌,经致病性鉴定后,依据菌株形态学特性和rDNA-ITS序列分析,确定病原真菌的分类地位.采用菌丝生长速率法和PI染色法,观察HTCC对病原真菌菌丝生长及菌丝细胞膜的影响.结果从采后贮藏自然发病的白心火龙果果实上分离到1株丝状真菌菌株E;致病性测定结果表明,菌株E为火龙果采后病害病原真菌;经形态学特性和rDNA-ITS序列分析,将菌株E鉴定为新月弯孢菌(Curvularia lunata).HTCC对菌株E的作用结果显示,HTCC对菌株E的菌丝生长具有较强抑制作用,其抑制作用与HTCC浓度呈正相关,0.25、0.50、0.75和1.00 mg/mL HTCC对菌株E的抑菌率分别为20.84%、50.05%、72.91%和83.23%;HTCC处理能破坏菌株E的菌丝细胞膜通透性,降低细胞膜的完整性.结论新月弯孢菌能引起广西采后火龙果发生真菌病害,依据HTCC对该菌的抑制效果,火龙果采后流通过程中可使用HTCC来减轻病害发生.

• 定植时间和种苗规格对3个菠萝品种自然开花效应的影响

  王小媚, 刘业强, 徐健, 任惠, 董龙, 方位宽, 蔡昭艳, 苏伟强, 黄章保, 邱文武,

  目的分析影响菠萝自然开花的定植时间、种苗规格及品种间的效应关系,明确栽培上影响菠萝自然开花的关键因素,为桂南地区实行人为调控花期,科学规避或降低自然开花减少小果率的菠萝高产高效栽培提供参考依据.方法以金菠萝、台农17号和台农16号3个菠萝品种为试验材料,调查统计不同定植时间、不同规格吸芽苗的植株自然开花率和小果率,并利用SPSS 18.0进行多变量方差分析,确定菠萝品种、定植苗规格、定植时间对菠萝自然开花影响的效应差异.结果广西南宁地区气温在15~20℃,易诱导菠萝自然开花.观察2017年4月15日、5月15日、9月15日和10月15日4个日期3个菠萝品种定植大吸芽苗的自然开花率和小果率发现,大吸芽苗在4—5月定植植株的自然开花率高于在9—10月定植植株的自然开花率,但小果率低于在9—10月定植植株的小果率,而定植中吸芽苗和小吸芽苗呈相同的变化规律.在定植时间和种苗规格相同的条件下,3个菠萝品种的自然开花率和自然果小果率均表现为金菠萝>台农17号>台农16号.方差分析结果表明,3个菠萝品种自然开花率影响的排序为:定植时间(η2=0.999)>品种(η2=0.993)>品种×定植时间(η2=0.970)>定植苗规格(η2=0.969)>品种×定植时间×定植苗规格(η2=0.766)>定植时间×定植苗规格(η2=0.725)>品种×定植苗规格(η2=0.677);自然果小果率的影响排序为:品种(η2=0.998)>定植时间(η2=0.984)>品种×定植时间×定植苗规格(η2=0.972)>品种×定植时间(η2=0.964)>定植时间×定植苗规格(η2=0.956)>定植苗规格(η2=0.954)>品种×定植苗规格(η2=0.929).结论栽培上影响菠萝植株自然开花效应的主要因素是定植品种和定植时间,其次是定植苗规格.根据3个因素对菠萝自然开花效应影响作用,建议春植选择大吸芽苗,秋植中吸芽苗或小吸芽苗,科学规避或降低自然开花影响,实现菠萝高产高效.

• 不同架式栽培对台农1号百香果果实品质和产量的影响

  袁启凤, 陈楠, 严佳文, 李仕品, 韩秀梅, 马玉华,

  目的探究不同架式栽培对台农1号百香果果实品质和产量的影响,为筛选适宜台农1号百香果的架式模式提供参考依据.方法采用酸碱滴定、2,6-二氯靛酚滴定和蒽酮比色等方法对7种不同架式下台农1号百香果的果实品质进行对比研究,分析果实单果重、纵径、横径、果形指数、果皮厚度、可食率、种子数、果皮明度值(L*)、红绿值(a*)和黄蓝值(b*)等外观指标,及可溶性总糖、可滴定酸、可溶性固形物、Vc、糖酸比和固酸比等内在生理指标,产量取高、中、低小区平均值,并对指标进行方差分析和主成分分析.结果不同架式栽培下台农1号百香果的单果重、果实纵径和横径、果形指数、可食率及果皮厚度均差异不显著(P>0.05);其中,果形指数在1.08~1.10,近圆形;Y形架栽培的果皮L*、a*和b*值较其他架式高,分别为30.36、17.65和5.89;V形架栽培的可食率最高,达47.03%,果皮最薄,为0.54 cm;A形架的种子数明显低于其他架式;双层架和篱壁架的产量显著高于其他架式栽培(P篱壁架>T形架>V形架>Y形架>棚架>A形架.不同架式栽培的果实可溶性固形物、可溶性总糖、维生素C、糖酸比及固酸比等内在品质指标均表现出一定的差异性.其中,A形架的果实可滴定酸含量显著高于其他架式;Y形架果实糖酸比和可溶性总糖含量显著高于其他架式;棚架的固酸比和Vc含量显著高于其他架式;篱壁架的果实可溶性固形物含量显著高于其他架式.主成分分析将所检测的17个指标综合为5个特征根大于1的主成分,累计解释方差为94.965%,能代表原17个指标性状的绝大部分信息,不同架式因子得分排序为V形架>Y形架>篱壁架>A形架>双层架>T型架>棚架.结论台农1号百香果适应性强,篱壁架的栽培模式简单易操作.根据贵州省地形、环境条件、架材和生产成本,因地制宜种植台农1号,并配套篱壁架栽培技术的管理,对推动贵州百香果产业跨越式发展具有重要意义.

• 海藻酸钠—银纳米粒子涂膜保鲜香蕉研究

  蓝嫄嫄, 韦蕾, 杜良伟, 冯家勋, 王彦辉,

  目的用海藻酸钠(SA)和银纳米粒子(AgNPs)制备复合保鲜涂膜,探究海藻酸钠—银纳米粒子(SA-Ag-NP)复合涂膜在香蕉贮藏期的保鲜效果,以期为香蕉货架期生理品质劣变提供新的解决途径.方法以涂覆SA涂膜(SA组)和不进行涂膜处理(CF组)的香蕉为对照组、涂覆SA-AgNP涂膜的香蕉为试验组,使用原子力显微镜(AFM)观察SA和SA-AgNP涂膜的微观结构并测定其力学性质;在香蕉贮藏期(1~9 d)内通过感官评定及对香蕉失重率、可溶性总糖、丙二醛(MDA)、总酚和总黄酮含量等理化性质的测定,分析涂膜对室温下香蕉的保鲜效果.结果AFM结果显示,SA-AgNP涂膜孔洞宽度约为400 nm,具有一定的通透性,且弹性大于SA涂膜.通过外观变化观察到SA-Ag-NP保鲜涂膜能延缓香蕉的成熟并预防病变发生,以及有效延缓香蕉失重率、可溶性总糖和MDA含量的上升,延缓总酚和总黄酮含量的下降.贮藏9 d后,SA-AgNP涂膜保鲜处理的香蕉与CF和SA组相比,失重率分别减少3.0%和0.5%(绝对值),可溶性总糖含量分别减少13.4%和3.4%;MAD含量为11.38μmol/g,较CF组显著减少25.1%(P<0.05,下同);总酚和总黄酮含量分别为0.39和0.032 mg/g,较CF和SA组显著增加18.2%、39.1%和8.3%、77.8%.结论SA-AgNP复合涂膜具有良好的保鲜效果,可用于香蕉的保鲜贮藏,延长其保质期.

• 不同芒果品种对蓟马的抗虫性评价

  张中润, 高燕, 黄建峰, 朱敏, 肖丽燕, 项丹丹,

  目的探明不同芒果品种对蓟马的抗性及其机理,为芒果抗性品种选育及蓟马的综合治理提供理论参考.方法以农业农村部儋州芒果种质圃内的40个芒果品种为材料,采用盘拍法调查不同芒果品种嫩梢上的蓟马虫口密度,以虫量比值法鉴定40个芒果品种对蓟马的抗虫性;观测40个芒果品种的嫩叶颜色、嫩梢密度和嫩梢生长期等性状,分析其对蓟马为害的影响.结果40个参试芒果品种中有高抗品种5个、抗虫品种5个、中抗品种8个、感虫品种13个和高感品种9个,各抗性品种的单梢虫量比值分别为0.04~0.10、0.13~0.17、0.22~0.36、0.52~1.47和1.79~4.20,占比分别为12.5%、12.5%、20.0%、32.5%和22.5%.不同嫩叶颜色芒果品种的平均虫口数量排序为锌黄色>铜褐色>古粉红色>黄绿色>紫红色,嫩叶为锌黄色芒果品种的虫口数量最大(10.7头/梢),显著高于其他4种颜色的芒果品种(P0.05,下同);芒果单株嫩梢密度与蓟马虫口密度呈正相关(r=0.044),但未达显著水平;不同嫩梢生长期芒果品种的平均虫口密度排序为初期>中期>末期,但3个不同生长时期的芒果嫩梢虫口密度差异不显著.结论Jan-78、缅甸3号、红晕芒、河口本地芒和肯特为高抗品种,具有较好的抗蓟马育种潜力,可为今后开展芒果抗蓟马育种提供重要材料.芒果品种的抗虫性与其嫩叶颜色密切相关,锌黄色的嫩叶是芒果蓟马趋于为害的重要因素.

• 2020年我国荔枝主产区的生产形势分析

  苏钻贤, 杨胜男, 陈厚彬, 申济源,

  目的对2020年广东、广西、海南、福建、四川和云南等地区荔枝生产形势进行分析,为我国荔枝主产区制定生产、营销政策提供参考.方法基于国家荔枝龙眼产业技术体系所覆盖示范县的实地调查和数据收集,对我国荔枝品种、产地、成熟期及产量等进行分析和预测.结果2020年全国荔枝投产面积约54.03万ha,预计总产量255.35万t,其中广东128.80万t、广西82.32万t、海南20.61万t、福建13.51万t、云南7.61万t、四川2.50万t.体系示范县主要荔枝品种产量分别为:妃子笑54.39万t、黑叶52.98万t、怀枝18.10万t、桂味11.14万t、白糖罂10.30万t、白蜡7.70万t、鸡嘴荔6.42万t、糯米糍5.18万t.2020年我国荔枝产量预计比上年提高38.15%;5和6月荔枝成熟上市量预计占全年的90.76%,上市集中.大宗品种黑叶、怀枝和妃子笑丰产,成熟上市期在广东、广西和福建高度重叠,预计面临较大的鲜销和加工压力.优质品种桂味、糯米糍和鸡嘴荔在不同产区重叠度较高,但产量中等,预计销售受影响较小.广东与广西为中熟产区,荔枝产期高度重叠,且产量较高,销售压力较大.海南为早熟产区,福建和四川为晚熟产区,云南产期跨度最大但产量较低,4个省份销售形势较乐观.建议在生产管理上确保实现预期产量,营养品质和环境食品安全;进一步建设快捷、低成本和覆盖面更广的荔枝物流网络;生产与营销两手抓,扩大品牌影响力;加工业做好充分的产能准备,并大力开发更多元的加工产品或初产品,获取更高产值.

• 水稻B-box锌指蛋白基因OsBBX26的克隆及表达分析

  邓军, 罗正良, 朱菲莹, 陈希, 方勇, 任鄄胜, 任光俊, 高方远,

  目的克隆水稻B-box锌指蛋白基因(OsBBX26),并分析其在非生物胁迫下的表达模式,为探究水稻B-box蛋白的非生物胁迫响应机制提供理论依据.方法以水稻模式品种日本晴为材料,采用RT-PCR克隆OsBBX26基因,对其进行生物信息学分析,并通过构建pBA-OsBBX26-YFP植物表达载体进行亚细胞定位.同时,采用实时荧光定量PCR检测分析OsBBX26基因的组织特异性及非生物胁迫(干旱、ABA、低温和高盐)下的表达模式.结果克隆获得的OsBBX26基因(LOC_Os08g42440)cDNA全长序列为1467 bp,编码488个氨基酸,其编码蛋白分子量为51.86 kD,理论等电点(pI)为6.63,包含1个B-box锌指结构域和1个CCT结构域,其中B-box结构域位于第13~60位氨基酸,CCT结构域位于第435~478位氨基酸,该蛋白定位于细胞核中.OsBBX26基因位于8号染色体上,启动子区域除了含有TATA-Box和CAAT-Box等基本转录元件外,还含有与逆境相关的顺式作用元件,包括低温响应元件LTR、脱落酸响应元件ABRE、水杨酸响应元件TCA-element、厌氧响应元件ARE、茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif和TGACG-motif,以及MYB转录因子结合位点.OsBBX26蛋白与粳稻B-box蛋白亲缘关系最近,其次与籼稻B-box蛋白亲缘关系较近,与其他植物B-box蛋白也存在较高的相似性,其中与小米、大麦、高粱、玉米和短柄草B-box蛋白的氨基酸序列相似性分别达72%、72%、71%、69%和68%.OsBBX26基因在幼叶中的表达量最高,其次是在成熟叶片中,在幼根、成熟根、茎和幼穗中的表达量均极低,表明该基因表达具有明显的组织表达特异性.干旱、高盐、ABA和低温胁迫处理下OsBBX26基因均上调表达,干旱、高盐和ABA胁迫处理12 h达峰值,但低温胁迫处理在24 h后才达峰值.结论OsBBX26基因受干旱、高盐、ABA和低温胁迫诱导均上调表达,推测其参与水稻植株响应多种非生物胁迫,在逆境响应中发挥重要调控作用.

• 高羊茅FaGST1基因克隆、亚细胞定位及表达分析

  陈锡, 赵德刚, 陈莹, 吴佳海, 袁暘暘, 王小利,

  目的克隆高羊茅谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因FaGST1,并进行亚细胞定位及表达分析,为深入研究该基因的抗逆分子调控提供理论依据.方法采用RT-PCR和RACE从高羊茅黔草1号中克隆FaGST1基因,对其进行生物信息学分析,构建植物融合表达载体pCAMBIA1300-FaGST1-GFP,通过农杆菌介导转入烟草叶片表皮细胞,观察FaGST1基因亚细胞定位情况,并利用实时荧光定量PCR检测高盐、高温、干旱及低氮胁迫处理下高羊茅叶片中该基因的表达情况.结果克隆获得FaGST1基因cDNA全长序列为1003 bp,开放阅读框(ORF)为681 bp,编码227个氨基酸残基,其编码蛋白的分子量约25.60 kD,理论等电点(pI)为5.58,亲水指数平均值-0.342,不稳定系数32.96,为稳定的亲水蛋白,定位于细胞核.FaGST1蛋白二级结构中,α-螺旋占50.44%,β-转角占5.75%,无规则卷曲占30.54%,延伸链占13.27%.FaGST1蛋白的保守结构区域为含有G位点的N末端结构域和含有H位点的C末端结构域.FaGST1蛋白与黑麦草GST蛋白(AMY26594.1)的氨基酸序列相似性最高,为93%,其次是海滨雀稗GST蛋白(AMN87043.1),为91%,与玉米(ACG39365.1)和小米(KQK86785.1)GST蛋白氨基酸序列相似性均在80%以上,与系统发育进化树分析结果基本相符,即FaGST1蛋白与黑麦草、海滨雀稗、玉米和小米等禾本科植物GST蛋白亲缘关系较近.高羊茅FaGST1基因在干旱、高温、高盐胁迫和低氮胁迫处理下均出现抑制表达.结论FaGST1基因负向调控高羊茅逆境胁迫响应.

• 番茄SlMAPK6基因克隆及其表达特性分析

  岳宁波, 李云洲, 李玉龙, 潘鹏程, 潘寅涛, 王勇, 须文, 吴浪, 闫见敏,

  目的克隆番茄促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因SlMAPK6,并分析其在不同非生物胁迫及信号物质处理下的表达模式,为深入探究SlMAPK6基因在番茄逆境响应中调控机制提供理论参考.方法采用同源克隆技术从矮番茄中克隆SlMAPK6基因cDNA全长序列,并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR检测矮番茄幼苗在干旱(20%PEG-6000)、盐(300 mmol/L NaCl)及信号物质0.50 mmol/L水杨酸(SA)和0.10 mmol/L 2,1,3-苯并噻二唑(BTH)处理下SlMAPK6基因的表达模式.结果克隆获得SlMAPK6基因cDNA全长序列为1360 bp,开放阅读框(ORF)为1131 bp,编码376个氨基酸残基,其编码蛋白理论等电点(pI)6.76,不稳定指数44.36,脂肪系数90.00,为不稳定的强脂溶性蛋白,亲水性平均值(GRAVY)-0.396,亲水性氨基酸均匀分布在整个肽链中,故该蛋白为亲水性蛋白;亚细胞定位于细胞核及胞浆质中,无跨膜区,含有36个磷酸化位点,其中丝氨酸(Ser)磷酸位点19个、苏氨酸(Thr)磷酸位点9个.SlMAPK6蛋白二级结构中,α-螺旋占38.03%,延伸链占10.37%,无规则卷曲占51.60%.SlMAPK6蛋白与马铃薯StMAPK4、风铃辣椒CbMAPK4和中华辣椒CcMAPK4蛋白同源性均为99.47%.SlMAPK6和SlMAPK5蛋白的亲缘关系最近,与拟南芥MAPK家族B亚族成员AtMAPK4、AtMPK5、AtMPK11、AtMPK12和AtMPK13蛋白的亲缘关系也较近.经SA、BTH、NaCl和PEG-6000处理后,SlMAPK6基因均出现抑制表达,说明SlMAPK6基因负向调控番茄植株的逆境响应.结论SlMAPK6基因可能参与负调控番茄植株的抗病和抗逆胁迫机制.SlMAPK6蛋白通过Ser或Thr磷酸化识别细胞信号的传导功能,在矮番茄逆境胁迫响应中发挥重要作用.

• 云南火焰兰转录组SSR分布及其序列特征分析

  辛静, 辛雅萱, 董章宏, 瞿绍宏, 姚国琼, 李凤, 屈亚亚, 唐军荣,

  目的分析云南火焰兰转录组中SSR分布及其序列分布特征,为大量开发EST-SSR引物及开展火焰兰属乃至兰科植物的SSR遗传多样性分析、种质资源评价、遗传图谱构建及遗传育种提供理论依据.方法以云南火焰兰无菌苗幼嫩叶片为材料,利用高通量测序技术进行转录组测序,使用Trinity对测序结果进行de novo组装,并以MISA对获得的Unigene进行SSR位点搜索,然后利用Excel 2010对云南火焰兰转录组中SSR出现频率、平均分布距离、基元类型及其重复类型组成等进行统计分析.结果从77888条去冗余的Unigenes序列中搜索到5051个SSR位点,其中有414个属于复合型SSR位点,实际以4637个SSR位点进行分析,SSR出现频率为5.95%,平均分布距离13.53 kb.SSR位点中,二核苷酸为主要重复基元类型,数量最多,占SSR总数的52.21%,其次是三核苷酸重复基元,占39.42%,四核苷酸重复基元~六核苷酸重复基元数量较少.其中,二核苷酸重复基元中的主要重复类型为CT/GA,占SSR总数的20.64%,三核苷酸重复基元的主要重复类型为CTT/GAA,占SSR总数的4.70%.SSR基元各重复类型的重复次数以5~8次居多,占SSR总数的73.35%,其中,占比最多的是6次重复,占SSR总数的26.98%,其次是5次和7次,分别占SSR总数的23.08%和14.02%,且SSR数量随各基元重复次数的增加而降低.云南火焰兰转录组中SSR基序的平均长度是18.28 bp,其中大小为12~20 bp的SSR基序占SSR总数的77.49%,21~30 bp基序占SSR总数的17.88%,大于30 bp的基序占SSR总数的4.63%,且SSR分布频率随基序长度的增加而下降.结论云南火焰兰转录组SSR中低级基元类型较丰富,开发出多态性高的SSR引物潜力较高,可用于云南火焰兰乃至火焰兰属植物的遗传多样性及种质资源评价、遗传图谱构建及遗传育种等研究.

• 茎瘤芥特晚熟胞质雄性不育系的选育及鉴定

  莫言玲, 刘义华, 曾静, 陈静静, 张友燕, 李昌满,

  目的通过杂交和连续回交方式选育茎瘤芥特晚熟胞质雄性不育系,并对其不育性等性状进行鉴定,为茎瘤芥特晚熟杂交新品种选育提供材料基础.方法以涪杂2号为不育源母本,与5个农艺性状良好、晚熟性强的茎瘤芥优良自交系(SJ20、SJ2-1、SJ4-16、SJ190-6和SJ320-3)进行杂交和回交,对回交7代的不育系及其保持系的农艺性状、物候期、花器官特征、开花习性、育性及配制组合杂种优势表现等进行鉴定.结果经过1次杂交和连续7次回交,选育出5个不育度完全、不育株率100%的茎瘤芥特晚熟胞质雄性不育系,即SJ20A、SJ2-1A、SJ4-16A、SJ190-6A和SJ320-3A.不育系在叶形、叶色、瘤茎鲜质量等方面与其保持系表现相同或相近,具有良好的农艺性状,但在3级分枝数量上,除SJ20A和SJ320-3A之外,其他3个不育系均显著大于其对应保持系(P<0.05,下同).每级分枝的长度各不育系显著或极显著(P<0.01)大于其对应保持系,具有更强的分枝能力.所有不育系均在3月下旬现蕾,较对照(涪杂8号)晚3~12 d,表现出强的晚熟性;其花器官与其对应保持系存在明显形态差异,其花瓣颜色更深,花药干瘪无粉,花朵在花枝上排列稀疏,开花前存在花柱外露的现象;其雄性不育性彻底,自交结实率和花粉活力均为0;以其配制的15个杂交组合均为特晚熟性,其中13个组合比对照明显增产,3个优势组合(SJ190-6A×CSB228,SJ190-6A×CSB282,SJ4-16A×CSB228)分别比对照增产22.88%、29.32%和31.90%.结论5个新转育的茎瘤芥不育系SJ20A、SJ2-1A、SJ4-16A、SJ190-6A和SJ320-3A的晚熟性强,综合农艺性状良好,不育性彻底、不育性状稳定,且配制组合杂种优势明显,可作为晚季栽培条件下茎瘤芥特晚熟杂交新品种培育的亲本材料加以利用.

• 岩溶区不同土地利用方式土壤碳、氮、磷生态化学计量的空间变异性研究

  张春来, 杨慧, 曹建华, 刘绍华,

  目的探究岩溶区土壤C、N、P生态化学计量特征的空间分异格局对土地利用方式的响应规律,为揭示岩溶生态系统各组分之间的养分循环规律及阐明系统的稳定性提供科学参考.方法在广西马山县西部岩溶区分别采集水田、旱地、草地、灌木林地和树木郁闭度≥20%的有林地等土地利用方式的表层(0~20 cm)土壤,测定其有机C、全N和全P等含量,并运用统计学方法分析不同土地利用方式下土壤的C、N、P生态化学计量特征、空间变异性及影响因素.结果研究区土壤有机C、全N和全P含量均值分别为13.83、1.75和0.92 g/kg,C:N、C:P和N:P均值分别为7.95、18.79和2.28.土壤C:N、C:P、N:P空间分布和土地利用基本一致,高值区位于水田和有林地,低值区分布在旱地、灌木林地和草地.不同土地利用方式下土壤C:N平均值集中分布在7.13~9.26,变异系数为20.84%,C:N较稳定,在空间上存在中等程度的变异性.水田和有林地之间C:N差异不显著(P>0.05,下同),旱地、灌木林地和草地之间C:N差异也不显著,变化趋势为水田>有林地>旱地>灌木林地>草地;C:P为11.21~29.10,N:P为1.51~3.11,变异系数较大,两者在不同土地利用方式下的变化趋势均为水田>有林地>灌木林地>草地>旱地.土壤C:N、C:P、N:P与有机C、全N、全P、全K、pH均存在极显著相关性(P<0.01).土壤理化性质和环境因子在不同土地利用方式土壤C、N、P化学计量特征冗余分析排序图上表现出不同的相关性,其中,有效P在所有土地利用方式中均与土壤C:N、C:P、N:P呈显著负相关(P<0.05,下同),而碱解N、成土母质在所有土地利用方式中均与C:N、C:P、N:P呈显著正相关;pH在水田、旱地和有林地土壤中与C:N、C:P、N:P呈显著负相关,而在灌木林地和草地土壤中呈显著正相关.结论研究区普遍缺乏有机质和N,P元素相对丰富,但其变异系数较大.碱解N、有效P、pH和成土母质是影响研究区不同土地利用方式下土壤C、N、P生态化学计量的关键因子.

• 适宜机直播的优质籼稻品种筛选及其评价指标体系

  李敏, 周维佳, 罗德强, 江学海, 蒋明金, 姬广梅, 李立江, 向明, 陈卓, 杨宇,

  目的筛选适宜机直播的优良籼稻品种,建立适宜机直播的籼稻品种评价关键指标体系,为适宜机直播专用籼稻品种选育及应用提供参考.方法以近年来选育的30个优质籼稻品种为试验材料,于2017年在贵州省湄潭县进行机械化精量穴直播试验,以成苗性、抗倒性及丰产性为核心指标,筛选适宜机直播的籼稻品种,并系统研究其生长发育特性.结果机直播条件下各水稻品种的产量介于6.1~10.5 t/ha,单位面积成苗数介于35.8~50.6株/m2,倒伏指数介于101.6%~260.6%,以产量、单位面积成苗数和倒伏指数进行聚类分析,筛选出川优8377、蓉18优2348、德优4727、晶两优534、宜香优2115、晶两优华占、Y两优1号和F优498等8个适宜机直播籼稻品种,其产量均>8.2 t/ha,单位面积成苗数均>48.0株/m2,倒伏指数均65.0%,收获指数均>0.45,茎秆基部大于4 cm的第1节间抗折力均>1500.0 g,全生育期均140.0粒,结实率均>70.0%.结论F优498等8个优质籼稻品种适宜机直播,该类品种总体上表现出单位面积成苗数高、植株分蘖力中等但成穗率较高、收获指数较高、茎秆抗倒伏能力较强、生育期适中、穗型较大且籽粒充实良好、产量高等特点.

• 利用滑石粉作为甜玉米花粉增量剂的贮藏技术分析及应用

  龙誉铭, 夏州藩, 赵竑博,

  目的利用滑石粉作为增量剂稀释甜玉米花粉,对比离体花粉在不同稀释比例、不同温度和不同贮藏时间条件下的储藏效果,为提高玉米育种和制种产量及降低减产风险提供参考依据.方法以金卡HM608甜玉米的父本花粉为试验材料,用滑石粉作为玉米花粉的增量剂,共设3个(按质量分数)增量剂填充处理(10%、30%、100%),4个时间处理(1、3、5和7 d),5个温度处理(-5、5、10、15和25℃),以不添加增量剂的花粉作为对照,结合田间测定法及氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法,探讨在不同增量剂比例、不同处理温度及处理时间下离体甜玉米花粉的TIC染色率和田间结实率.结果当处理温度为-5、5和10℃时,贮藏1 d的花粉田间结实率在82.26%以上;贮藏5 d后,无增量剂花粉的T TC染色率及田间结实率显著下降,平均为25.24%和13.68%;添加10%和30%增量剂的花粉,贮藏5 d仍然有61.22%以上的田间结实率;当增量剂比例在100%且贮藏为5 d时,田间平均结实率为7.19%,当处理温度为15和25℃时,田间结实率为0,反映出增量剂比例和温度过高均不利于花粉的保存,增量剂越多或持续时间越长对花粉活力伤害越大.不同增量剂填充处理的花粉活性及田间结实率均随着处理温度上升和贮藏时间延长而降低.结论保存温度在-5~10℃,添加10%和30%滑石粉作为甜玉米花粉增量剂能有效延长花粉生活力,该贮藏技术操作简单易行,对于指导授粉工作、减少制种风险、提高制种产量具有现实意义.

• 海南雪茄烟叶不同育苗方式育苗效果分析

  高华军, 林北森, 马兴华, 蔡斌, 贺远, 耿召良, 向小华, 刘好宝,

  目的筛选适宜海南雪茄烟叶的集约化育苗方式,为海南雪茄烟培育壮苗及提高烟叶生产水平提供科学依据.方法以外引雪茄外包皮烟叶种子为材料开展育苗试验,对比常规育苗(对照)、湿润育苗和漂浮育苗3种育苗方式对雪茄烟苗生长的影响,并分析不同育苗方式的育苗成本.结果采取湿润育苗和漂浮育苗均能促进雪茄烟苗生长,烟苗农艺性状、叶片SPAD值优于常规育苗,其中湿润育苗叶片SPAD值显著高于常规育苗3.00%(P0.05),但其全株干质量显著高于常规育苗38.46%,且其烟苗的壮苗指数(0.060 g/株)显著高于其他育苗方式处理,较常规育苗和漂浮育苗分别提高50.00%和57.89%,主要育苗投入成本(1131.45元/ha)特别是人工假植成本(312.45元/ha)明显低于常规育苗(1494.00和750.00元/ha).湿润育苗和漂浮育苗分别较常规育苗节省成本24.27%和19.06%.结论湿润育苗能促进雪茄烟苗生长,提高烟苗壮苗指数和根冠比,降低育苗成本,是适合海南雪茄种植区春季育苗的集约化育苗方式.

• 基于mtDNA COⅠ和mtDNA CoⅡ分子标记的贵州省茶棍蓟马种群遗传多样性分析

  罗林丽, 孟泽洪, 李帅, 赵兴丽, 周罗娜, 贺圣凌, 周玉锋,

  目的研究贵州省茶棍蓟马不同地理种群间的遗传多样性,为掌握贵州省茶棍蓟马的遗传动态和扩散规律及制定防控措施提供理论依据.方法以贵州省11个不同地理区域的茶棍蓟马种群mtDNA CO I和mtDNA CO II基因序列为靶标,利用MEGA 6.0、DnaSP 5.10、Arlequin 3.5.2.2和Network 2.0等软件对种群遗传分化、基因流水平、分子变异及种群遗传多样性等进行分析.结果基于mtDNA CO I和mtDNA CO II基因分析时,分别检测到11种和9种单倍型,各地理种群的单倍型多样度(Hd)较高,分别为0.609和0.633;总体遗传固定指数(FST)分别为0.11902和0.09052,基因流(Nm)分别为2.00和2.51,表明贵州省茶棍蓟马各地理种群间的基因交流水平较高,种群间遗传分化较小.mtDNA CO I和mtDNA CO II基因序列的单倍型网状树分析均无明显分支;种群间的分子变异(AMOVA)分析结果表明,茶棍蓟马的遗传变异主要来自种群内部.总群体的中性检验Fu's Fs不显著(P>0.05),且错配分布曲线呈现多峰,说明贵州省茶棍蓟马种群在较近的历史时期内保持相对稳定,未经历明显的种群扩张,或处于临界状态.结论贵州省茶棍蓟马种群遗传多样性较丰富,虽然尚未形成明显的种群扩张,但可能已处于临界状态,应积极采取综合防控措施,力争将茶棍蓟马种群数量控制在危害水平以下,以保证贵州省茶产业生产健康可持续发展.

• 湖北和广西辣椒脉斑驳病毒的检测及遗传多样性分析

  李桑桑, 胡荣, 罗香文, 李诗君, 卜珊, 张宇, 刘勇, 张松柏,

  目的研究辣椒脉斑驳病毒(Pepper veinal mottle virus,PVMV)的分布及遗传变异,为明确该病毒在我国的流行扩散分子机制提供理论依据.方法利用特异性引物反转录PCR(RT-PCR)检测从湖北宜昌及广西南宁和百色采集的48份疑似感染PVMV的辣椒样本;采用常规Sanger测序测定PCR产物序列,序列采用MEGA 5.0构建系统发育进化树,采用RDP等算法分析其可能的重组事件;采用DnaSP v5分析病毒株系不同群体之间的基因流及基因差异.结果从48份辣椒样本中检测到5份样本被PVMV侵染,检出率10.42%.基因同源性比对分析结果表明,测定的PVMV湖北和广西分离物CP基因序列同源性在97.00%以上,与其他地区分离物的同源性为91.73%~98.78%.系统发育分析表明,湖北(YC)和广西(NN)PVMV分离物与我国台湾PVMV分离物的亲缘关系最近.重组分析表明,PVMV广西分离物NN10有2个重组事件.结论湖北和广西辣椒的PVMV检测结果表明,该病毒已扩散至湖北和广西;基因突变可能是PVMV湖北分离物遗传变异的主要方式之一;而基因重组和基因突变可能是PVMV广西分离物遗传变异的重要因子.

• 枯草芽孢杆菌M-23对柑橘砂皮病防效及柑橘叶际细菌群落多样性的影响

  李审微, 洪艳云, 李新文, 何可佳, 戴良英, 卢晓鹏, 宋娜, 易图永,

  目的明确柑橘砂皮病不同发病等级及喷施生防菌枯草芽孢杆菌M-23后柑橘叶际细菌群落结构的变化,揭示生防菌防治柑橘砂皮病的叶际微生物学机制,为进一步研究柑橘砂皮病的生物防治提供理论基础.方法试验设对照区和喷施生防菌区2个区域,喷施生防菌区分别在2019年3月中旬柑橘春梢长2~3 cm、4月中旬、谢花2/3、果实蚕豆大小和果实乒乓球大小时喷施M-23菌株发酵液,喷药液量3 L/株;同时对照区喷施等量的灭菌NB液体培养基,在最后一次喷施生防菌15 d后进行防效调查.采集喷施生防菌区柑橘叶片(R4处理,病情等级0级)和未喷施生防菌区不同发病等级的柑橘叶片(R1、R2和R3处理,病情等级分别为0、5和9级),使用FastDNA?Spin Kit for Soil试剂盒提取柑橘叶片叶际微生物总DNA,通过Illumina MiseqTM高通量平台测序分析微生物群落多样性.结果生防菌M-23对柑橘砂皮病的防治效果达74.02%.高通量测序共获得571091条序列,单一样品序列数17833~96147条,在97%的相似水平下进行生物信息统计分析聚类后获得2932个OTUs.4个处理的OTUs数量分别为1944、1545、1205和607个,表现为R1>R2>R3>R4.在门水平的组成上主要由变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bac-teroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、浮霉菌门(Planctomycetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)、装甲菌门(Armatimonade-tes)、酸杆菌门(Acidobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)组成.变形菌门是优势菌门,在R1、R2、R3和R4处理中的相对丰度分别为81.84%、87.93%、86.80%和68.82%.对照区的叶际微生物多样性与发病等级成反比;喷施生防菌后柑橘叶片叶际细菌群落多样性降低,在属水平上芽孢杆菌属(Bacillus)和假单胞菌属(Pseudomonas)的相对丰度得到明显增加,芽孢杆菌属的相对丰度达33.41%.结论喷施生防菌M-23能有效防治柑橘砂皮病.M-23菌株能在柑橘叶片上定殖和增殖,改善叶际细菌群落结构,提升有益菌的比例,使病情指数降低,具有一定的应用潜力.

• 大刺鳅促黄体生成素基因克隆及其组织表达分析

  黄小琪, 钟东明, 何佩莹, 张明清, 周惠强, 舒琥,

  目的克隆大刺鳅(Mastacembelus armatus)促黄体生成素(LH)基因及明确其表达规律,为进一步阐明LH基因在大刺鳅性腺发育过程中的生理功能及揭示大刺鳅的生殖调控机理提供参考依据.方法采用RACE克隆大刺鳅LH基因cDNA全长序列,从GenBank中选择硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物等物种的LH氨基酸序列,通过ClustalX 2.1进行氨基酸序列比对,以MEGA 6.0中的邻接法(NJ)构建系统发育进化树,并应用实时荧光定量PCR检测分析大刺鳅LH基因在不同组织及不同性腺发育期的表达情况.结果大刺鳅LH基因cDNA序列全长799 bp,包括224 bp的5'非编码区(5'-UTR)、131 bp的3'非编码区(3'-UTR)和444 bp的开放阅读框(ORF),共编码147个氨基酸残基,第1~22位氨基酸残基组成其信号肽区域.大刺鳅LH氨基酸序列C-末端区域高度保守,但N-末端区域与其他硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物存在明显差异.大刺鳅LH氨基酸序列与其他鱼类的LH氨基酸序列同源性较高,其中与黄鳝(Monopterus albus)的亲缘关系最近.大刺鳅LH基因在其脑组织中的相对表达量最高,显著高于在其他组织中的相对表达量(P<0.05);在卵巢、心脏、肝脏和精巢中的相对表达量次之;大刺鳅LH基因在不同发育期卵巢和精巢中的表达变化趋势一致,从II期开始其相对表达量随之增加,至V期时达峰值.结论大刺鳅LH氨基酸序列具有高度保守区域,其基因在各组织中广泛表达,尤其在脑组织和性腺中具有较高表达量,提示LH的靶基因可能在脑—垂体—性腺轴上,参与大刺鳅的性腺发育调控,主要促进卵母细胞和精子成熟并刺激排卵或排精.

• 猪USP18基因表达规律及其与产仔数性状的关联分析

  周泉勇, 万明春, 季华员, 刘晨龙, 方绍培, 黄江南,

  目的明确泛素特异性蛋白酶18基因(USP18)在猪不同妊娠时期子宫内膜中的表达规律及其与雌激素和孕激素的关系,并分析其多态性与产仔数性状的关联性,为揭示USP18基因在猪妊娠过程中的作用机理提供参考依据.方法PCR扩增猪USP18基因编码区(CDS)序列及开展相关生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR检测USP18基因在梅山猪和大白猪妊娠15、26和50 d子宫内膜中的表达水平,通过体外细胞试验检测分析雌二醇和孕酮联合处理对子宫内膜上皮细胞USP18基因表达的影响,并采用PCR-RFLP和SPSS 19.0检测猪USP18基因多态性与产仔数性状的关联性.结果猪USP18基因CDS序列为966 bp,共编码322个氨基酸残基,编码蛋白分子量为37 kD,理论等电点(pI)为6.74;猪USP18氨基酸序列与牛USP18氨基酸序列的同源性为82%,二者的遗传距离最近.USP18基因在妊娠15和26 d梅山猪和大白猪子宫内膜中的相对表达量均明显高于妊娠50 d,且在妊娠26和50 d,USP18基因在梅山猪子宫内膜组织中的相对表达量显著高于在大白猪子宫内膜组织中的相对表达量(P<0.05,下同).以10-10 mol/L雌二醇和10-8 mol/L孕酮联合处理子宫内膜上皮细胞,USP18基因在子宫内膜上皮细胞中的相对表达量呈上调趋势,且显著高于激素处理前的相对表达量.在猪USP18基因CDS序列953 bp处存在1个SNP位点(T/G错义突变),其不同基因型与产仔数性状的关联分析结果表明,在经产母猪中,TG基因型母猪产活仔数最多,GG基因型母猪产活仔数最少,且差异显著.结论猪USP18基因在附植期子宫内膜中高水平表达,且在子宫内膜上皮细胞中的表达受雌激素和孕激素诱导,表明USP18基因在妊娠早期建立过程中发挥着重要作用.USP18基因在梅山猪和大白猪间的差异表达可能是导致梅山猪产仔数高于大白猪的一个重要因素.

• 水温和雌雄配比对罗氏沼虾能量代谢的影响

  张俊功, 戴习林, 丁福江,

  目的探索水温和雌雄配比对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)能量代谢和生长的影响,为进一步分析与解决罗氏沼虾生长缓慢的问题提供科学依据.方法根据能量收支方程摄食能(Ce)=生长能(Ge)+排粪能(Fe)+排泄能(Ue)+蜕壳能(Ee)+呼吸能(Re)及凯式定氮法,分别计算罗氏沼虾各部分的代谢能值,分析4种水温(20、22、26和30℃)及3种雌雄配比(1:1、1:2和1:3)对罗氏沼虾能量代谢和生长的影响.结果雌、雄罗氏沼虾的绝对摄食能均随水温上升而升高,其中雌虾在各水温处理组间差异显著(P<0.05,下同),雄虾则表现为非相邻水温处理组间差异显著;雄虾在26℃下的绝对生长能显著高于其他3个水温处理组,雌虾在26℃下的绝对生长能显著高于20和22℃水温处理组;雌、雄罗氏沼虾在20℃下均未蜕壳,在22~30℃下其绝对蜕壳能随水温上升而升高,在30℃时达最大值(雌虾1371±272 J/g,雄虾1035±598 J/g);雌、雄罗氏沼虾的特定生长率在26℃下显著高于其他3个水温处理组;罗氏沼虾的绝对呼吸能表现为高温处理组(26和30℃)高于低温处理组(20和22℃).单性饲养下,性成熟雄虾的绝对摄食能、绝对生长能和特定生长率随数量上升而降低,且每个水槽放养1尾雄虾显著高于每个水槽放养2~3尾雄虾;性成熟雄虾绝对呼吸能则随数量上升而显著升高.不同雌雄配比下,性成熟罗氏沼虾的绝对生长能随雄虾数量上升而显著降低,雌雄配比1:1的特定生长率显著高于雌雄配比1:2和1:3;雌雄配比1:1的绝对排泄能显著低于雌雄配比1:2和1:3,其占摄食能的百分比随雄虾数量上升而上升.结论高温更适合罗氏沼虾的生长发育,且以26℃最适宜,在此水温条件下罗氏沼虾新陈代谢更旺盛.在性成熟罗氏沼虾生长过程中,其能量积累可能受打斗、占区和交配等生物学行为影响,且相同密度下雄虾比例增加有可能加剧影响.

• 三穗鸭IP3R3基因SNP位点鉴定及其对蛋壳品质的影响

  李杰章, 谭光辉, 吴磊, 覃媛钰, 张依裕,

  目的明确IP3R3对蛋壳性状的效应机制及其在蛋壳品质改良中的应用价值,为开展蛋壳品质改良分子标记育种提供参考依据,也为深入研究IP3R3基因的生物学功能打下基础.方法以288羽三穗鸭为研究对象,收集45周龄母鸭生产的鸭蛋,测定蛋重、蛋形指数、蛋壳厚度、蛋壳强度和蛋壳重;采用DNA直接测序法对三穗鸭IP3R3基因SNP位点进行鉴定,使用SHEsis进行单倍型及连锁不平衡分析,通过RNAfold预测不同单倍型的mRNA二级结构和自由能,并以SPSS 18.0中的一般线性模型(GLM)对三穗鸭IP3R3基因SNP位点与蛋壳品质进行关联分析.结果在三穗鸭IP3R3基因外显子上发现2个SNPs位点,分别位于第49外显子的g.35195T>C和g.35207G>A,均属于同义突变,且均存在3种基因型,对应的多肽信息含量(PIC)分别为0.330和0.276,属于中度多态位点(0.25C和g.35207G>A位点产生的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(χ2-HWEC和g.35207G>A位点对三穗鸭蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋形指数、蛋重和蛋壳重的影响均未达显著水平(P>0.05,下同);双倍型H1H1个体的蛋壳强度显著高于其他双倍型个体(P<0.05,下同),双倍型H2H2个体的蛋形指数显著低于其他双倍型个体,其他双倍型个体间均无显著差异.结论三穗鸭IP3R3基因与蛋壳品质有一定关联性.在三穗鸭IP3R3基因外显子上发现的2个SNPs位点能引起基因mRNA二级结构和自由能改变,其构建的双倍型可作为主效候选基因或与主基因紧密连锁的分子标记用于鸭蛋壳品质改良.

• 中药(赶黄草+波棱瓜子)提取物对小鼠维生素A急性中毒早期的治疗效果

  曹冶, 于吉峰, 谢晶, 张先惠, 彭广能, 钟志军, 康润敏,

  目的研究中药提取物及其组方对小鼠维生素A急性中毒早期的治疗效果,为动物维生素A急性中毒提供有效的治疗手段,进而促进伴侣动物医疗的健康发展.方法选取健康成年昆明种小鼠一次性腹腔注射维生素A(按1500 mg/kg计)建立维生素A中毒致骨骼发育不良综合症小鼠模型,4周后采集血液测定生化指标.将维生素A急性中毒小鼠随机分成6组(T1~T6)进行治疗:T1组为空白对照组(不给药);T2组为10.0 mL/kg赶黄草水粗提物;T3组为1.0 mL/kg波棱瓜子粗提油;T4组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油;T5组为5.0 mL/kg赶黄草水粗提物+0.5 mL/kg波棱瓜子粗提油+1.0 g/kg黄芪多糖;T6组为阳性对照,安宫牛黄丸(1/3粒,约1 g).各给药处理组均连续灌胃给药7 d.在开始给药的第2、4、6和8 d分别采集小鼠静脉血制备血清,用于谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)、磷(P)和甲状旁腺素(PTH)等血清生化指标测定.结果除T1组外,各给药处理组维生素A急性中毒小鼠的血清生化指标均发生明显变化,ALT、AST和ALP活性及Ca和P含量整体上均呈下降趋势,PTH含量则呈上升趋势.综合各项血清生化指标的变化趋势,可确定T5组的小鼠维生素A急性中毒治疗效果最佳,至给药第8 d,维生素A急性中毒小鼠血清ALT活性降至3.78 ng/mL,AST活性降至628.14 pg/mL,ALP活性降至2.35 ng/mL,Ca含量降至3.29 mmol/L,P含量降至1.62 mmol/L,而PTH含量升高到337.95 pg/mL.结论赶黄草水粗提物和波棱瓜子粗提油均能有效治疗小鼠维生素A急性中毒,两者联用效果更佳,尤其是与黄芪多糖配伍组合,其作用机理主要是通过修复肝功能及骨组织损伤来实现.

• 塘养建鲤背鳍、尾鳍和腹鳍指数的线性体重表征

  刘超, 周继术, 王在照, 冯鹏, 吕亚军, 翟国威,

  目的探索塘养建鲤体重与鳍条面积及其重量的关系,为研究鱼类遗传选育及生态分类提供理论参数,或根据鳍条指数确定塘养鲤鱼的适宜捕捞体重.方法剪取塘养建鲤的背鳍、尾鳍和腹鳍,称重后采用叶面积扫描仪直接测定其面积,分别采用线性模型、幂模型、指数模型和多项式模型分析塘养建鲤体重与鳍条面积和鳍条重量的相关性,并以鳍条面积/体重、鳍条重量/体重构建鳍条面积比较指数和鳍条重量比较指数,与体重进行相关回归分析,建立回归方程表征体重与鳍条面积和鳍条重量间的关系.结果指数模型、幂模型和线性模型更适宜用于塘养建鲤体重与鳍条面积和鳍条重量的相关回归分析.塘养建鲤体重与鳍条的重量和面积表现出强相关性,且体重与鳍条面积的相关性(R2=0.9334~0.9748,平均0.9721)高于体重与鳍条重量的相关性(R2=0.9585~0.9634,平均0.9614).塘养建鲤体重(x)与背鳍面积存在y=1.8005x+88.43、与尾鳍面积存在y=1.5251x+385.13、与腹鳍面积存y=1.1070x+124.25的线性回归关系.比较指数分析结果表明,背鳍、尾鳍和腹鳍的面积发育拐点体重分别为245.5、638.9和750.0 g;背鳍重量发育拐点体重为468.6 g;尾鳍和腹鳍发育拐点体重及体长、体全长和体重增加拐点体重均为726.8 g.结论塘养建鲤体重与鳍条面积及其重量存在显著线性回归关系,通过体重可准确估测背鳍、尾鳍和腹鳍的面积及重量.塘养建鲤背鳍面积的发育早于尾鳍和腹鳍,发育拐点之后体重和肥满度增长加快,塘养建鲤的适宜捕捞体重为726.8 g.

• 基于浮游生物完整性指数的不同循环饥饿投饲模式黄颡鱼养殖塘水质评价

  张亚军, 秦秀东, 李恩军, 程光平, 李文红, 张伟刚, 孙玉章, 张曼, 崔亮, 赵晚晨,

  目的探索不同循环饥饿投饲模式对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)养殖塘水质状况的影响,筛选出基于优良水质的黄颡鱼池塘养殖循环饥饿投饲模式,为其规模化生态化养殖提供科学参考.方法按间隔3 d(X3组)、5 d(X5组)、7 d(X7组)和10 d(X10组)饥饿1 d等4种循环饥饿投饲模式养殖黄颡鱼,以正常投饲塘(X0组)为参照点,利用浮游生物完整性指数(P-IBI)评价各模式塘水体健康状况,比较分析P-IBI评价结果和灰色关联分析结果.结果最终筛选出Y2(浮游植物种类数)、Y14(浮游植物生物量)、Y19(浮游动物Margalef丰富度指数)、Y31(硅藻门相对丰度)、Y33(绿藻门相对丰度)和Y35(枝角类和桡足类相对丰度)作为构建P-IBI评价体系的指标.P-IBI分值显示,养殖中、后期各试验塘和参照点的水体健康状况均有所下降,至养殖结束时,X0、X3、X5、X7和X10各组的P-IBI分值比其初始值分别下降57.66%、19.30%、11.10%、30.08%和29.91%;各试验组的P-IBI平均值排序为X70.05).灰色关联分析结果表明,4组试验塘和参照点水质综合判定均为Ⅲ类,其中X3组和X5组水质状况较优,其试验后期均为Ⅲ类,且有1个时期为Ⅱ类.结论循环饥饿投饲模式中处于饥饿期的黄颡鱼对饲料利用率较高,减少养殖塘中残饵的富集;同时饥饿期黄颡鱼直接或间接利用养殖塘中的浮游生物,在一定程度上能保持浮游生物群落结构相对稳定,达到改善水质的目的.综合分析水质因子和P-IBI得出,间隔5 d饥饿1 d的投饲模式有助于改善黄颡鱼养殖塘水质状况.

• 干燥工艺对罗非鱼片品质的影响

  罗静, 李敏, 关志强,

  目的通过比较不同干燥工艺对罗非鱼片品质的影响,寻求一种可替代真空冷冻干燥的技术,为高品质干制罗非鱼片及其同类水产品的加工及规模化生产提供技术支持.方法以复水率、白度值、硬度和Ca2+-ATPase活性为品质检测指标,通过单因素和正交试验优化超声波辅助聚葡萄糖渗透热泵干燥和超声波辅助聚葡萄糖渗透真空冷冻—热泵联合干燥罗非鱼片的预处理工艺条件,再比较这2种干燥方式和热泵干燥、真空冷冻干燥方式对罗非鱼片干制品品质的影响.结果超声波辅助聚葡萄糖渗透热泵干燥罗非鱼片的最佳预处理工艺条件:超声波功率400 W、超声波时间65 min、聚葡萄糖浓度60 g/L,其中超声波时间影响最大;超声波辅助聚葡萄糖渗透真空冷冻—热泵联合干燥罗非鱼片的最佳预处理工艺条件:超声波功率450 W、超声波时间65 min、聚葡萄糖浓度80 g/L,其中超声波功率影响最大.超声波辅助聚葡萄糖渗透真空冷冻—热泵联合干燥的罗非鱼片干制品复水率、白度值和Ca2+-ATPase活性最高,分别达78%、71.8和2.42μmol Pi/(mg prot·h),显著高于热泵干燥和超声波辅助聚葡萄糖渗透热泵干燥(P0.05);真空冷冻干燥的产品硬度(4.31 N)最低,显著低于其他3种干燥方式的罗非鱼片干制品硬度;而热泵干燥的罗非鱼片干制品复水率、白度值和Ca2+-ATPase活性最低,硬度最高,分别为51%、34.1、0.46μmol Pi/(mg prot·h)和9.98 N.结论超声波辅助聚葡萄糖渗透真空冷冻—热泵联合干燥罗非鱼片的干制品品质接近真空冷冻干燥制品的品质,干燥时间缩短,值得在同类水产品干制加工中推广应用.

• 加快广西农业科技成果转化机制创新研究

  黄永清, 宁夏, 孔令孜, 李小红, 韦志扬,

  目的调研分析广西农业科技成果转化现状及面临的制约因素,明确广西农业科技成果转化机制创新的方向及重点,为相关部门制定政策措施提供参考依据.方法通过查阅文献及统计资料,分析广西农业科技成果转化机制现状、主要模式及特点等;设计调查问卷,系统调查近年来广西农业科技成果转化取得的成效及存在的主要困难;通过实地调研,了解创新广西农业科技成果转化机制面临的主要制约因素,征集完善农业科技成果转化机制的建议;组织召开座谈会,与专家及专业人员一起研讨优化广西农业科技成果转化机制的对策措施.结果广西农业科技研发、成果转化及推广体系基本建立,通过农业科技成果转化平台建设及农业科技成果转化项目实施,农业科技进步贡献率稳步提升,但在农业科技成果供给、农业科技成果转化体系、农业科技成果需求等方面仍存在明显的制约因素.因此,加快广西农业科技成果转化机制创新的重点是:(1)深化完善农业科技创新机制.加快完善农业科研项目管理制度,创新农业科技成果评价及管理机制,建立产学研长效合作机制,切实提高农业企业科技创新主体地位,建立科技需求信息反馈机制及国内外合作机制.(2)建立健全农业科技成果转化机制.完善农业科技成果转化激励机制,加强平台建设及创新转化方式,建立科技资源共享机制,加强科技成果跟踪管理服务.(3)探索建立新型农业科技服务机制.激发农民对农业科技的需求,构建多元化农业科技服务体系,推动农业科技成果产业化示范基地建设,推进"互联网+"农业科技成果转化应用.建议深化农业科技成果转化体制改革,稳固农业科技成果转化资金保障,强化农业科技成果转化人才支撑,促使农业科技成果快速而有效地转化,最终实现广西农业高质量发展.