南方农业学报

作者：金绍玲, 陈杨慧, 李可, 刘蛟徐弋, 李闯, 蔡佳, 黄瑜, 汪志文, 简纪常, 王蓓,

关键词：尼罗罗非鱼, <i>claudin-3</i>基因, 无乳链球菌, 血脑屏障, 防御,

【目的】克隆尼罗罗非鱼claudin-3基因并构建体外血脑屏障模型，分析无乳链球菌感染后claudin-3基因的表达变化，为探究claudin-3基因在尼罗罗非鱼抗无乳链球菌感染过程中的作用提供理论依据。【方法】克隆claudin-3基因并进行序列分析和生物信息学分析。以ZQ0910感染尼罗罗非鱼，采集皮肤、肌肉、肝脏、脾脏、头肾、鳃、脑和后肠组织，实时荧光定量PCR检测claudin-3基因的组织表达谱。构建体外血脑屏障模型，以ZQ0910和SA068感染，实时荧光定量PCR检测claudin-3基因相对表达量的变化。【结果】成功克隆尼罗罗非鱼claudin-3基因，基因全长648 bp，编码216个氨基酸残基。claudin-3蛋白含有17个氨基酸功能位点和4个跨膜结构域。尼罗罗非鱼claudin-3蛋白与奥尼罗非鱼的同源性最高，相似性达99.53%，在系统发育树上与包括哺乳动物在内的多个物种的claudin-3蛋白聚为一大支。claudin-3基因在尼罗罗非鱼肝脏、鳃、头肾、脑和肌肉组织中的相对表达量较高，在皮肤、脾脏和后肠组织中的相对表达量较低。ZQ0910感染后3 h，claudin-3基因相对表达量在皮肤、肝脏、脾脏和后肠组织中显著升高（P&lt;0.05，下同），而在脑、肌肉和头肾组织中则显著降低，至感染12或24 h后才出现回升。ZQ0910感染12 h后，TA-02单培养组claudin-3基因相对表达量显著高于血脑屏障模型组。SA068感染0~12 h，血脑屏障模型组claudin-3基因相对表达量较平稳，至感染24 h后才出现明显升高。【结论】claudin-3基因是尼罗罗非鱼抵御无乳链球菌侵袭血脑屏障的关键因子，其表达具有组织特异性，并在无乳链球菌感染后呈动态调控，尤其在体外血脑屏障模型中受星形胶质细胞的影响。claudin-3基因可能通过调节紧密连接完整性参与中枢神经系统的免疫防御，其相对表达量的变化可能反映了宿主屏障功能的适应性调节与病原侵袭的相互作用。

来源：2025年第11期

《南方农业学报》期刊编辑部

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