国内刊号:45-1381/S
国际刊号:2095-1191
发布日期:
作者:方欣馨, 张倩, 孟颖, 马莉, 许秋实,
关键词:Notch1, 牛卵泡颗粒细胞(GCs), 增殖, 分化, DAPT,
【目的】探究Notch1对牛卵泡颗粒细胞(GCs)增殖与分化的影响,揭示其在牛卵巢功能和生殖调控中的生物学作用,为阐明牛卵泡发育的分子机制提供理论基础。【方法】选取6头健康母牛,采集卵巢组织进行原代GCs分离、培养。采用免疫组织化学染色检测卵巢组织中Notch1蛋白的定位情况,利用EdU染色检测GCs增殖活性,使用流式细胞术检测GCs增殖进程,通过Western blotting检测GCs增殖与分化相关蛋白的相对表达量。【结果】免疫组织化学染色结果显示,Notch1蛋白在牛卵泡颗粒细胞中高表达。EdU染色结果显示,激活Notch1能促进GCs增殖,使用DAPT抑制Notch信号通路则会抑制GCs增殖。流式细胞术检测结果显示,激活Notch1能促进GCs由G1期向S期转换。Western blotting检测结果显示,激活Notch1能显著升高Notch1、CCND1、CCNE1、CDK2、CDK4、CDK6、CYP19A1和StAR蛋白的相对表达量(P<0.05,下同),极显著升高CCND2、CCND3和LHCGR蛋白的相对表达量(P<0.01,下同),抑制Notch信号通路能显著降低CCND1、CCND2、CCND3、CCNE1、CDK2、CDK4、LHCGR、CYP19A1和StAR蛋白的相对表达量,极显著降低Notch1和CDK6蛋白的相对表达量,激活Notch1能促进GCs的增殖和分化。【结论】Notch1在牛卵泡GCs中高表达,激活Notch1能促进GCs由G1期向S期转换,并升高细胞增殖相关蛋白CCND1、CCND2、CCND3、CCNE1、CDK2、CDK4和CDK6和分化相关蛋白LHCGR、CYP19A1、StAR的相对表达量。Notch1是调控牛卵泡GCs增殖与分化的重要因子,其介导的Notch信号通路在卵巢发育和生殖功能中具有重要的调控作用。
来源:2025年第11期
《南方农业学报》期刊编辑部