南方农业学报

作者：张帆帆, 吴诚诚, 陈将, 韦家禛, 谢宝宝, 钟苏鸣, 宋德平,

关键词：猪流行性腹泻病毒（PEDV）, G2c亚型, 重组毒株, 遗传变异, 致病性,

【目的】 明确江西地区猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行株的致病性和遗传变异情况，为研发PEDV疫苗及科学防控猪流行性腹泻（PED）提供参考依据。【方法】 将腹泻仔猪的空/回肠组织处理后接种至Vero81细胞进行PEDV分离，经间接免疫荧光（IFA）鉴定后通过Reed-Muench法计算分离毒株的TCID50，并绘制病毒体外生长曲线；使用RT-PCR进行全基因组扩增，经SeqMan拼接后进行遗传进化分析和重组分析，并通过动物回归试验评价分离毒株的致病性。【结果】 利用Vero81细胞成功分离出1株PEDV，命名为CH-JX-2024，可在Vero81细胞中稳定传至第50代。以CH-JX-2024株接种Vero81细胞，在感染后6~18 h快速增殖，于感染后24 h达最高滴度，随后进入衰减期，病毒滴度缓慢下降。CH-JX-2024株全基因组序列与PEDV参考株全基因组序列的相似性为96.3%~99.0%，其中，与CH/JSXZ/2015（MT625963）株的相似性最高（99.0%），与SM98（GU937797）株的相似性最低（96.3%）。基于S氨基酸序列相似性构建的系统发育树显示，CH-JX-2024株属于G2c亚型，与LS-23（OR089086）株的亲缘关系最近，与AH-M（KJ158152）、Attenuated CV777（KT323979）等经典毒株的亲缘关系较远。CH-JX-2024株的13730~22341 nt片段可能来源于JSHA2013（KR818833）株与ZJCZ4（JX524137）株的重组基因序列；CH-JX-2024株与G2b亚型AJ1102（JX188454）株存在1个氨基酸插入（1198H1200）和29个氨基酸突变，且其突变位点主要集中在S10中和表位区域。5日龄健康新生仔猪口服接种CH-JX-2024株第10代病毒液（106 TCID50/mL），在攻毒后12 h开始出现水样腹泻和呕吐，至攻毒后72 h全部发病死亡；攻毒组仔猪的胃内含有大量乳糜，小肠内充满液体，肠壁薄而透明，空肠肠绒毛大量脱落，黏膜上皮细胞坏死，杯状细胞数量减少。【结论】 分离获得的CH-JX-2024株属于PEDV G2c亚型变异株，具有较高的致病性，与当前广泛使用的变异疫苗株相比，在S蛋白抗原表位序列上存在多处氨基酸变异，因此无法通过接种PEDV商品化变异株灭活疫苗获得免疫交叉保护。

来源：2025年第9期

《南方农业学报》期刊编辑部

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