南方农业学报

作者：宋旭荣, 夏根, 汪志雄, 田晓丽, 张国辉,

关键词：南亚果实蝇, 化学感受蛋白, 组织表达模式, 原核表达, 荧光竞争结合,

【目的】 筛选在南亚果实蝇成虫触角中高表达的化学感受蛋白（CSP）基因，并对CSP基因异源表达蛋白的配体结合特性进行研究，为揭示CSP基因在南亚果实蝇成虫嗅觉感受中的功能及研发高效引诱剂提供理论参考。【方法】 通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析南亚果实蝇CSP基因（BtauCSP1、BtauCSP2、BtauCSP3、BtauCSP4）在雌、雄成虫触角、头（去触角）、其他组织（去头部）的表达模式；构建重组表达载体pET-28a（+）/BtauCSP3，将重组表达载体转入原核细胞BL21（DE3）中进行原核表达；通过荧光竞争结合试验分析细菌表达的BtauCSP3蛋白与16种气味配体的结合特性。【结果】 4个南亚果实蝇CSP基因BtauCSP1、BtauCSP2、BtauCSP3和BtauCSP4均具有完整的开放阅读框（ORF），长度为336~474 bp，编码112~158个氨基酸残基。4个BtauCSPs蛋白一级结构的氨基端均含有一段由18~24个氨基酸残基组成的信号肽序列；去除信号肽的成熟BtauCSP蛋白的预测分子量为10.03~14.95 kD，理论等电点为5.04~9.32。对BtauCSPs基因在南亚果实蝇成虫不同组织中的表达模式分析结果显示，4个BtauCSPs基因在供试所有组织中均有表达，其中BtauCSP3基因在南亚果实蝇雌、雄成虫触角中高表达，暗示BtauCSP3基因可能参与南亚果实蝇的嗅觉识别过程。荧光竞争结合试验结果显示，BtauCSP3蛋白与十一醇、诱蝇酮和柠檬烯3种气味化合物表现出结合能力，抑制常数（Ki）分别为15.44、23.16和23.67 μmol/L。【结论】 南亚果实蝇成虫触角中高表达的BtauCSP3基因可能参与了南亚果实蝇对气味化合物尤其是十一醇的嗅觉识别过程。

来源：2025年第9期

《南方农业学报》期刊编辑部

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