南方农业学报

作者：陈雅晴, 薛星月, 符嘉庆, 马宇航, 李增林, 段瑛,

关键词：海棠, 花青苷, MsMYB44-likes转录因子, 脱落酸,

目的 克隆和鉴定海棠花青苷生物合成相关转录因子（MYB44-likes），为揭示MsMYB44-likes基因在海棠叶片着色过程中的调控机制及海棠观赏性状改良提供参考依据。方法 以海棠品种海棠花为研究对象，对海棠组织培养幼苗进行喷施25 μmol/L脱落酸（ABA）处理，以喷施清水作为对照（CK）。PCR克隆海棠嫩叶中3个MsMYB44-likes基因（MYB44-like1、MsMYB44-like2和MsMYB44-like3），并对3个MsMYB44-likes基因进行生物信息学分析、编码蛋白亚细胞定位和系统发育分析。在苹果表皮中对MsMYB44-like2基因进行瞬时过表达，并通过凝胶迁移试验（EMSA）研究MsMYB44-like2蛋白与花青苷生物合成途径中结构基因海棠类黄酮糖基转移酶基因（MsUFGT）的启动子结合情况。结果 成功克隆获得3个MsMYB44-likes基因（MsMYB44-like1、MsMYB44-like2和MsMYB44-like3），其cDNA序列全长分别为954、960和942 bp，分别编码317、319和313个氨基酸残基；3个MsMYB44-likes蛋白结构中均以α-螺旋和无规则卷曲占比较高，且这3个蛋白与拟南芥、小麦、水稻、梨同源蛋白序列均含有典型的MYB-DNA结合结构域，MsMYB44-like1、MsMYB44-like2与梨的同源蛋白聚为一支。3个MsMYB44-likes蛋白均定位于细胞核。瞬时转化试验结果表明，注射含pCAMBIA2300-MsMYB44-like2农杆菌菌液后，苹果表皮的注射点周围呈黄绿色，说明该基因抑制苹果表皮花青苷的生物合成。与CK相比，经ABA处理后MsMYB44-like2基因的相对表达量显著降低（P<0.05）。EMSA试验结果显示，MsMYB44-like2蛋白与MsUFGT基因启动子片段的结合导致迁移率上移。结论 3个MsMYB44-likes蛋白均含有典型的MYB-DNA结合结构域，均定位于细胞核。MsMYB44-like2基因表达受ABA负调控，该蛋白通过与MsUFGT基因的启动子直接结合抑制海棠花青苷的生物合成。

来源：2025年第8期

《南方农业学报》期刊编辑部

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