南方农业学报

作者：陈岗, 岳茂婷, 丁以纾, 何文德, 吴子云, 陈晓, 吴国星, 高熹,

关键词：叉角厉蝽, 组织蛋白酶B, 基因克隆, 表达特征,

目的 克隆叉角厉蝽（Eocanthecona furcellata）组织蛋白酶B基因（EfCAB）并进行表达分析，探究EfCAB蛋白在叉角厉蝽生命活动中发挥的作用，为其生理功能研究打下基础。方法 通过PCR扩增克隆EfCAB基因开放阅读框（ORF）序列；使用生物信息学软件分析EfCAB蛋白理化性质、跨膜结构、信号肽和亚细胞定位情况。对不同物种的组织蛋白酶B氨基酸序列进行比对和相似性分析，利用MEGA 11.0构建系统发育树。采用实时荧光定量PCR检测EfCAB基因在叉角厉蝽不同组织（雌成虫的马氏管、唾液腺、卵巢、头、中肠、脂肪体）和不同发育阶段（卵、1~5龄若虫、雌雄成虫）中的表达特征。结果 EfCAB基因ORF序列长度为1020 bp，共编码339个氨基酸残基；EfCAB蛋白相对分子量为37.23 kD，理论等电点为6.95。EfCAB蛋白无跨膜结构域，不属于跨膜蛋白；EfCAB蛋白第1~18位氨基酸为信号肽，属于分泌蛋白。EfCAB蛋白主要定位在细胞质和线粒体等。叉角厉蝽与茶翅蝽（Halyomorpha halys）组织蛋白酶B氨基酸序列的相似性最高，达87.0%；系统发育分析结果表明，叉角厉蝽与茶翅蝽亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测结果表明，EfCAB基因在马氏管中的相对表达量显著高于其他组织（P<0.05，下同），在中肠中的相对表达量较高，在头中几乎不表达；EfCAB基因在卵中的相对表达量最高且与其他发育阶段差异显著，3龄若虫和雌成虫中的相对表达量较高，在5龄若虫中的相对表达量最低。结论 EfCAB基因的表达具有组织特异性和阶段特异性，推测EfCAB蛋白在叉角厉蝽的捕食过程中具有消化猎物组织的功能，还起到促进叉角厉蝽胚胎发育的作用。

来源：2025年第7期

《南方农业学报》期刊编辑部

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