南方农业学报

作者：李若汐, 励翔, 林翰翔, 赖鸿伟, 陆颖, 许强华, 陈良标, 周艳,

关键词：吉富罗非鱼, 低温胁迫, 差异表达蛋白(DEPs), 蛋白质组学, iTRAQ技术,

【目的】 筛选出低温敏感型和低温耐受型吉富罗非鱼的鳃组织差异表达蛋白（DEPs），为揭示罗非鱼低温耐受分子机制提供理论基础，同时为培育低温抗性罗非鱼新品种（系）提供基础遗传资料。【方法】 采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术结合液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）对低温胁迫前后的吉富罗非鱼鳃组织进行蛋白质组学分析，根据差异倍数（Fold Change）>1.3且P<0.05的筛选标准筛选出DEPs，然后进行GO功能注释分析和KEGG信号通路富集分析，并通过实时荧光定量PCR进行验证。【结果】 共鉴定出6603个蛋白，其中746个为DEPs(432个呈上调表达，314个呈下调表达)。GO功能注释分析发现，746个DEPs在生物学过程（BP）、细胞组分（CC）和分子功能（MF）三大功能类别中共注释到4772条GO功能条目。KEGG信号通路富集分析结果显示，746个DEPs分别富集到五大KEGG信号通路类别的31个亚群中，其中，免疫系统富集到115个DEPs（占15.4%），信号转导富集到88个DEPs（占11.8%），全局及概览图谱富集到75个DEPs（占10.1%）；从富集程度来看，746个DEPs主要富集在肠道IgA免疫网络、造血细胞系、核糖体、补体和凝血级联反应等15条KEGG信号通路上。实时荧光定量PCR检测结果表明，包括C3、C5在内的多个关键基因在低温耐受型吉富罗非鱼鳃组织中均呈明显下调表达趋势，尤其是C1qrs、CD59、C3、C5、C6和Vtn等基因的表达极显著下调（P<0.01）。【结论】 低温胁迫后吉富罗非鱼鳃组织中的DEPs主要富集在肠道IgA免疫网络、造血细胞系及补体和凝血级联反应等与特异性/非特异性免疫、糖类代谢和脂质代谢相关的信号通路上，即鱼类免疫系统受抑制，对外界不利因素的抵抗能力下降，是低温环境胁迫下罗非鱼大批量死亡的主要原因。

来源：2025年第6期

《南方农业学报》期刊编辑部

查看南方农业学报杂志2025年第6期