南方农业学报

北大核心,CA,JST,CSCD扩展版,WJCI

国内刊号:45-1381/S

国际刊号:2095-1191

南方农业学报杂志2025年第3期:AMPKα基因介导白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯抗药性

发布日期:

作者:吕海燕, 江定心,

关键词:白纹伊蚊, 腺苷酸活化蛋白激酶基因, 四氟甲醚菊酯, 抗药性, RNA干扰,

【目的】探究白纹伊蚊(Aedes albopictus)腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)基因(AalAMPKα)与四氟甲醚菊酯的抗药性关系,揭示白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗性形成机制,为白纹伊蚊的综合治理提供理论基础。【方法】克隆AalAMPKα基因编码区(CDS)序列,通过Protparam、SMART、SWISS-MODEL和GSD_v2.0等在线软件进行生物信息学分析;使用实时荧光定量PCR技术检测AalAMPKα基因在白纹伊蚊不同组织和不同发育时期的表达情况;采用微量点滴法测定白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗药性;使用RNA干扰技术探究AalAMPKα基因在白纹伊蚊抗药性中的功能。【结果】AalAMPKα基因全长1653 bp,编码545个氨基酸,蛋白质的相对分子量为61.63 kD,理论等电点(pI)为8.03,为不稳定的亲水性蛋白;序列分析结果显示,AalAMPKα基因编码的氨基酸序列与其他物种相似,有着高度保守的结构域;AalAMPKα基因编码的氨基酸序列与埃及伊蚊(Aedes aegypti)AMPKα基因编码的氨基酸序列的相似性最高,与其他双翅目昆虫之间有着较近的亲缘关系;基因组结构分析显示,AMPKα基因在不同物种中的基因组结构差异较大,表现出物种特异性。AalAMPKα基因在白纹伊蚊的不同组织和不同发育时期均有不同程度的表达,其中在脂肪体和1日雄蚊中表达量最高。白纹伊蚊抗性品系AalAMPKα基因的表达量是敏感品系的3.98倍。四氟甲醚菊酯对白纹伊蚊敏感品系和抗性品系的半致死剂量(LD50)分别为0.354和8.010 ng/头,抗性品系的抗性倍数为22.63,为高水平抗性;对白纹伊蚊抗性品系雌蚊显微注射双链核糖核酸(dsRNA)沉默AalAMPKα基因24 h后,注射dsGFP的对照组LD50为7.876 ng/头,注射dsAalAMPKα 组的LD50为2.631 ng/头,沉默AalAMPKα基因后抗性倍数从22.25下降到7.43,抗药性极显著减弱(PAalAMPKα基因可介导白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯的抗药性。

来源:2025年第3期

《南方农业学报》期刊编辑部

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