南方农业学报

作者：刘祎, 王顺哲, 刘璎慧, 杨倩, 汪泳昌, 孙浩然, 李胜忠, 张俊杰,

关键词：白斑狗鱼, <i>LADD 2</i>基因, 梯型凝集素, 组织表达特征,

【目的】 克隆白斑狗鱼（Esox lucius）LADD 2基因并分析其组织表达特征，为揭示LADD 2基因在白斑狗鱼性腺发育中的作用提供理论依据。【方法】 利用白斑狗鱼性腺转录组数据，筛选得到126日龄雌性白斑狗鱼高表达基因LADD 2。克隆LADD 2基因编码区（CDS）序列，利用DNAMAN 9.0、NCBI ORF finder、BLAST、ClustalX、ExPASy、ProtParam、PSORT II、SOMPA、SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析。基于鱼类梯型凝集素同源物及C型凝集素受体的氨基酸序列，使用MEGA 5.1中的邻接法（Neighbor-joining,NJ）构建系统发育进化树。采用实时荧光定量PCR检测LADD 2基因在126日龄、188日龄和320日龄白斑狗鱼性腺、肠道、肌肉、肝脏、鳃、脑、肾脏及头肾中的相对表达量。【结果】 成功克隆获得白斑狗鱼LADD 2基因CDS序列，全长609 bp，编码85个氨基酸残基，蛋白分子量为9.78 kD，理论等电点（pI）为7.30，分子式为C8635H13504N2334O2404S115，为亲水性蛋白。LDDA 2蛋白中亮氨酸（11.86%）含量最高，色氨酸（2.28%）含量最低。蛋白磷酸化位点预测结果显示，LADD 2蛋白含有147个丝氨酸位点，98个苏氨酸位点，44个酪氨酸位点。蛋白结构预测结果显示，LADD 2蛋白主要由β-转角、α-螺旋和β-折叠构成，存在2个保守的PRT1结构域。氨基酸序列同源比对分析结果显示，白斑狗鱼与阿拉斯加黑鱼（Dallia pectoralis）LADD 2蛋白的相似性最高为99%。系统发育进化树显示，白斑狗鱼LADD 2蛋白与鱼类梯型凝集素同源物聚为一支，与大西洋鲑（Salmo salar）、银大麻哈鱼（Oncorhynchus kisutch）及鲱形白鲑（Coregonus clupeaformis）的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示，随着发育时间延长，LADD 2基因在白斑狗鱼卵巢中的相对表达量逐渐降低，与精巢中LADD 2基因相对表达量差异越来越小，且在鳃和脑中也有一定表达。【结论】 LADD 2基因在进化过程中具有一定的保守性和稳定性，其在白斑狗鱼早期卵巢发育过程中发挥重要作用。LADD 2蛋白可能在白斑狗鱼发育后期鳃和脑中具有免疫活性。LADD 2蛋白可能具有免疫功能，进而对白斑狗鱼肝胰腺发育具有保护作用。

来源：2025年第1期

《南方农业学报》期刊编辑部

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