南方农业学报

作者：李梓昕, 陈杨慧, 卢春兰, 黄瑜, 蔡佳, 王蓓,

关键词：尼罗罗非鱼, <i>CD63</i>基因, 组织表达, 无乳链球菌,

【目的】克隆尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）抗原分化簇63基因（CD63）并分析其在病原菌刺激后的表达情况，探究尼罗罗非鱼CD63基因在免疫应答中发挥的作用，为进一步研究CD63的免疫功能提供理论依据。【方法】对尼罗罗非鱼CD63基因进行克隆，利用生物信息学软件对尼罗罗非鱼CD63蛋白进行理化性质分析、跨膜结构域预测和系统进化分析等，采用实时荧光定量PCR检测尼罗罗非鱼CD63基因的组织表达特征及在无乳链球菌感染后的表达变化。【结果】尼罗罗非鱼CD63基因开放阅读框（ORF）长度为723 bp，编码240个氨基酸残基。尼罗罗非鱼CD63蛋白分子量为25.88 kD，理论等电点（pI）为8.38，蛋白平均亲水性系数（GRAVY）为0.745，为疏水性蛋白，不含信号肽，含4个跨膜结构域。进行比对分析发现，尼罗罗非鱼与奥利亚罗非鱼等其他鱼类的CD63氨基酸序列相似性较高；系统进化分析结果表明，尼罗罗非鱼与奥利亚罗非鱼亲缘关系最近。CD63基因在尼罗罗非鱼的脑、脾脏、肝脏、皮肤、头肾、鳃、心脏、后肠、血液和肌肉10种组织中均有表达，在肌肉中相对表达量最高，其次为血液和后肠，在脑中相对表达量最低。在无乳链球菌感染3～96 h,CD63基因在尼罗罗非鱼的鳃、心脏、头肾、脾脏、后肠、肌肉和皮肤中相对表达量最高值均较未感染时（0 h）显著上调（P&lt;0.05，下同）；在感染96 h时，CD63基因在尼罗罗非鱼的脑、鳃、头肾、肝脏、脾脏、后肠、肌肉和皮肤中的相对表达量较最高值均显著下调。【结论】在无乳链球菌感染后，尼罗罗非鱼CD63基因在各组织中的表达均发生明显变化，表明CD63基因参与尼罗罗非鱼对病原菌刺激的免疫应答过程。

来源：2024年第12期

《南方农业学报》期刊编辑部

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