南方农业学报

作者：李铭, 杜金星, 宋红梅, 朱涛, 雷彩霞, 吴广州, 李胜杰,

关键词：大口黑鲈, 高温应激, <i>crh</i>基因, <i>crhr1</i>基因, <i>crhr2</i>基因, 皮质醇,

【目的】明确急性高温应激对大口黑鲈促肾上腺皮质激素释放激素基因（crh）及其受体基因（crhr1和crhr2）表达和皮质醇浓度的影响，深入分析crh、crhr1和crhr2基因与皮质醇间的作用关系，为揭示大口黑鲈应激反应的分子调控机制打下基础。【方法】通过PCR扩增大口黑鲈crh、crhr1和crhr2基因开放阅读框（ORF），采用实时荧光定量PCR检测这3种基因在大口黑鲈不同组织中的表达分布；对大口黑鲈进行急性高温应激胁迫后分别采集血样及脑组织，以25.0℃为初始水温设为对照（CK），测定不同时间点大口黑鲈脑组织中的crh、crhr1和crhr2基因相对表达量及血清皮质醇浓度。【结果】大口黑鲈crh、crhr1、crhr2基因ORF序列分别长510、1392和1245 bp，对应编码169、463和414个氨基酸残基；基于crh、crhr1和crhr2基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树显示，大口黑鲈与鲈形目鱼类聚为一支，尤其与小口黑鲈的亲缘关系最近。crh、crhr1和crhr2基因在大口黑鲈心脏、肝脏、肠道、肾脏、脑、鳃和肌肉等组织均有表达，且以脑组织中的相对表达量较高。急性高温应激后，大口黑鲈脑组织中crh、crhr1和crhr2基因相对表达量及血清皮质醇浓度均随时间推移呈先上升后下降的变化趋势，其中，crh和crhr1基因相对表达量及血清皮质醇浓度在高温应激后3 h(33.0℃)时达峰值，crhr2基因表达变化存在一定滞后性，其相对表达量在高温应激后6 h(30.4℃)时才达峰值。【结论】急性高温应激后大口黑鲈crh和crhr1基因的表达与血清皮质醇浓度变化趋势一致，而crhr2基因的表达滞后于皮质醇浓度变化，由此推测crh和crhr1基因参与皮质醇合成与分泌过程，与应激启动有关，而crhr2基因参与皮质醇的分解，与应激恢复相关。

来源：2024年第12期

《南方农业学报》期刊编辑部

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