南方农业学报

作者：张万里, 葛天成, 陈琦椿, 彭争科, 肖勇, 李振宇, 尹飞,

关键词：FK506结合蛋白, <i>FKBP</i>基因, 小菜蛾, 氯虫苯甲酰胺, 时空表达特性, 抗药性,

【目的】 明确FK506结合蛋白（FKBP）基因在小菜蛾对氯虫苯甲酰胺抗性形成中的作用，筛选出起主要作用的关键FKBP基因，为阐明小菜蛾抗双酰胺类杀虫剂的分子机理提供新思路。【方法】 以抗氯虫苯甲酰胺种群和敏感种群小菜蛾为研究对象，采用浸叶法测定不同种群小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的敏感性差异；利用cDNA末端快速扩增（RACE）方法克隆3个FKBP基因（FKBP8、FKBP12和FKBP52）的全长序列，并通过GSDS 2.0、CDD和MEME在线分析软件分析其基因结构与蛋白保守结构域和Motif；采用实时荧光定量PCR分析抗性种群不同发育阶段和敏感、抗性种群4龄幼虫不同组织FKBP基因的时空表达特性。【结果】 生物测定结果显示，抗性种群小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗性倍数为122.67倍，属于高水平抗性。实时荧光定量PCR分析发现，抗性种群小菜蛾体内3个FKBP基因的相对表达量均显著高于敏感种群（PFKBP8基因的表达差异最显著，是敏感种群的968倍。通过RACE方法克隆得到FKBP52、FKBP8和FKBP12基因的全长序列，长度分别为1473、1525和649 bp，分别编码423、307和108个氨基酸残基，其蛋白均为亲水蛋白。FKBP52、FKBP8和FKBP12基因具有相同的基因结构，FKBP52和FKBP12蛋白具有相同的保守结构域FkpA，而FKBP8蛋白具有2个不同的保守结构域。抗性种群小菜蛾4龄幼虫体内3个FKBP基因表达量均高于蛹期，其中FKBP12和FKBP8基因在4龄幼虫中的表达量最高，显著高于其他龄期和蛹期。FKBP8基因在抗性种群小菜蛾中肠和表皮中的表达量显著高于敏感种群，分别是敏感种群的3.2和3.7倍。【结论】 FKBP52、FKBP8和FKBP12基因在氯虫苯甲酰胺抗性种群小菜蛾中均过量表达，其中FKBP8基因在高抗氯虫苯甲酰胺种群小菜蛾的中肠高表达，表明其可能通过过量表达参与小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的抗药性。

来源：2024年第10期

《南方农业学报》期刊编辑部

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