南方农业学报

作者：赵浩航, 丘金珠, 周秀莹, 唐怀庆, 赵天珍, 梁富, 宋海霞, 喻大鹏, 宋长江,

关键词：乌鳢, 半胱氨酸蛋白酶3基因(<i>caspase-3</i>), 组织分布, 免疫应答,

【目的】克隆和表达分析乌鳢（Channa argus）的半胱氨酸蛋白酶（Cysteinyl aspartate specific proteinase）3基因（caspase-3），为探究该基因在乌鳢机体中的免疫应答作用及在其他鱼类免疫上的作用提供理论依据。【方法】根据NCBI公布的乌鳢基因组信息，对乌鳢的caspase-3基因序列进行克隆，对推导的caspase-3氨基酸序列进行生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR检测caspase-3基因在健康乌鳢各组织中的表达分布及在不同刺激物［鰤鱼（Seriolaquinqueradiata）诺卡氏菌（Nocardia seriolae）、脂多糖（LPS）和聚肌胞苷酸（PolyI：C）］刺激下的时序表达情况。【结果】caspase-3基因序列全长855 bp，编码284个氨基酸残基，蛋白分子量为31.069 kD，理论等电点（pI）为6.17。caspase-3蛋白含有1个CASc结构域。多序列比对结果显示，乌鳢的caspase-3氨基酸序列与秘鲁笛鲷（Lutjanus peru）的caspase-3氨基酸序列相似度最高，达81.7%；系统发育进化树分析结果表明，乌鳢的caspase-3氨基酸序列与秘鲁笛鲷的caspase-3氨基酸序列聚为一支。实时荧光定量PCR检测结果表明，乌鳢caspase-3基因在肌肉、皮肤、鳃、心脏、胸腺、脑、头肾、脾脏、肝脏和血液等组织中均有表达，其中在脾脏和头肾的表达量最高；在不同刺激物刺激下，caspase-3基因在乌鳢脾脏、肾脏、血液和肝脏组织中的表达量均发生显著变化（Pcaspase-3基因表达量均显著升高，且具有明显的时间依赖性。【结论】乌鳢caspase-3基因可能在乌鳢抵御细菌和病毒入侵的免疫反应中发挥着重要作用。

来源：2023年第11期

《南方农业学报》期刊编辑部

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