南方农业学报

作者：宁春妹, 赵颖, 安佳秀, 付叶, 田亚原, 杨艺,

关键词：山羊, 玉米赤霉烯酮(ZEA), 睾丸间质细胞, 细胞凋亡, 线粒体膜电位,

【目的】探究玉米赤霉烯酮（ZEA）对山羊睾丸间质细胞活力、形态及细胞凋亡相关基因表达的影响，明确其对山羊睾丸间质细胞的毒性作用，为后续揭示ZEA对雄性山羊生殖系统的毒性机制提供理论依据。【方法】以山羊睾丸间质细胞为试验材料，采用不同浓度ZEA处理细胞24 h，以CCK-8法检测细胞增殖情况并筛选出最适浓度；然后通过光学显微镜、透射电子显微镜、细胞划痕试验、实时荧光定量PCR、JC-1试剂盒及ROS试剂盒分别检测ZEA处理山羊睾丸间质细胞的形态特征、超微结构变化、损伤愈合能力、细胞凋亡及氧化应激相关基因表达、线粒体膜电位及胞内活性氧（ROS）水平的变化。【结果】随着ZEA浓度的升高，山羊睾丸间质细胞活力呈剂量依赖效应极显著下降（P50）在20 μmol/L附近，故选取20 μmol/L作为后续试验的处理浓度。经20 μmol/LZEA处理后，山羊睾丸间质细胞大量死亡，细胞皱缩呈圆珠状，细胞间连接松散；核膜出现破损，内质网断裂、结构模糊，线粒体破裂，形成自噬囊泡，细胞核皱缩、深染；细胞愈合能力降低，划痕培养18 h后的细胞迁移率约80%；细胞中的Bcl-2、caspase-3和SOD2基因相对表达量显著上升（PBax、HO-1、Nrf2、GPX1和CAT基因相对表达量极显著上升；JC-1检测发现细胞中的红色荧光数量减少，荧光强度较弱，而绿色荧光数量明显增多且荧光强度较强；ROS检测显示细胞ROS水平极显著升高，即细胞氧化应激程度加剧。【结论】ZEA通过诱导山羊睾丸间质细胞形变及线粒体、内质网等细胞超微结构损伤，降低其损伤修复能力，促使线粒体膜电位水平降低和加剧氧化应激程度，而发挥其毒性作用。

来源：2023年第11期

《南方农业学报》期刊编辑部

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