南方农业学报

作者：钟朗, 胡珊, 张得平, 卢燕回, 首安发, 唐慧锋, 周志成, 丁海霞, 彭丽娟,

关键词：烟草靶斑病, 枯草芽孢杆菌, 生物防治, 挥发性物质, 防治效果,

【目的】筛选对烟草靶斑病菌具有生防潜力的拮抗细菌，为烟草靶斑病的生物防治提供菌种资源。【方法】以立枯丝核菌为目标病原菌，采用稀释涂布平板法从广西健康烤烟根际土壤中分离、纯化细菌；采用平板对峙法筛选拮抗效果较好的菌株，测定抑菌效果；扫描电镜和超景深三维显微镜观察拮抗菌株处理立枯丝核菌菌丝的形态变化及菌落形态，并测定生理生化特征；采用细菌通用引物16S rDNA序列及gyrA基因对拮抗菌株DNA进行PCR扩增，采用NCBI的BLAST对测序结果同源对比分析，并基于亲缘关系较近的序列及模式菌株构建系统发育进化树；采用双平板对扣法初步探索拮抗菌株挥发性物质抑菌作用；利用顶空固相微萃取和气相色谱—质谱对拮抗菌株挥发性物质进行鉴定；通过对K326烤烟品种盆栽试验鉴定拮抗菌株对烟草靶斑病的防治效果。【结果】筛选到1株具有生防作用的拮抗菌株GXLL3319，结合该菌株菌落形态和生理生化特征及系统发育进化分析结果将该菌株鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。该菌株对立枯丝核菌、烟草炭疽菌和尖孢镰刀菌3种烟草病原真菌抑制率均在50%以上；该菌株及其挥发性物质对立枯丝核菌抑制率分别为69.70%和59.22%。扫描电镜结果显示，经GXLL3319处理后的立枯丝核菌菌丝生长受到明显抑制，菌丝出现断裂、膨大和消解等现象。挥发性物质鉴定出31种抑菌活性物质，包括酮类、醇类、醛类、杂环类、硫化物、有机酸类、酯类、烷烃类和酚类。盆栽试验结果表明，GXLL3319菌液能有效抑制烟草靶斑病的发生，相对防效达66.07%，与15%井冈霉素A可溶粉剂的相对防效差异不显著（P>0.05）。【结论】枯草芽孢杆菌GXLL3319能有效抑制立枯丝核菌菌丝生长，其产生的挥发性物质包含多种抑菌活性物质，GXLL3319对烟草靶斑病有较好的防治效果，具有开发成为烟草靶斑病生防菌的潜力。

来源：2023年第11期

《南方农业学报》期刊编辑部

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