南方农业学报

作者：张震, 伍仲平, 邓雅鑫, 唐军旺, 李慧, 蔡妙灵, 王丽萍, 季久秀,

关键词：杜洛克, 二花脸, 转录组测序, 软骨细胞, 差异表达基因,

【目的】比较杜洛克和二花脸猪耳软骨组织的差异，为揭示猪外耳面积变异的分子机制提供参考。【方法】采集100日龄全同胞雄性杜洛克（n=5）和二花脸（n=5）猪外耳软骨组织进行石蜡切片及HE染色和Masson三色染色，对比两者结构上的区别；体外分离培养耳软骨细胞，使用CCK8法检测其增殖能力；联合转录组测序，比较二花脸（n=3）和杜洛克（n=3）耳软骨组织中基因表达的差异，筛选影响软骨生长相关的基因并使用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）进行验证。【结果】 HE染色和Masson三色染色结果显示，与杜洛克相比，二花脸耳软骨细胞形成更多的由2~8个细胞组成的同源细胞群，软骨组织中含有更多的弹性纤维。细胞增殖检测试验表明，二花脸耳软骨细胞在体外培养36、48和60 h后增殖速率显著大于杜洛克（PMMP3、BGLAP和GDF5基因等促进软骨组织细胞外基质降解和矿化过程；二花脸耳软骨中Wnt信号通路抑制基因DKK1高量表达，Wnt信号强度受到负调控；高量表达的HMGA2、WNT10B、AXIN2基因促进了二花脸外耳软骨细胞的增殖。qRTPCR验证了上述结果。【结论】二花脸耳软骨细胞较杜洛克具有更加旺盛的增殖分裂能力。杜洛克耳软骨通过MMP3、BGLAP和GDF5等基因诱导细胞外基质降解和成骨分化过程；二花脸耳软骨组织中Wnt信号通路受到负调控，通过HMGA2、WNT10B和AXIN2等基因促进软骨细胞的增殖及耳软骨的生长。

来源：2023年第3期

《南方农业学报》期刊编辑部

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