南方农业学报

作者：白帆, 孙敬锋, 张胜根, 韩卓然, 吕爱军, 胡秀彩,

关键词：点带石斑鱼, 神经型一氧化氮合成酶（nNOS）, 脑组织, 视网膜, 免疫组织化学定位, NADPH-d组织化学染色,

【目的】研究点带石斑鱼脑组织和视网膜中的一氧化氮（NO）含量及神经型一氧化氮合成酶（nNOS）分布与活性，为深入揭示NO在点带石斑鱼神经系统中的作用机制打下基础。【方法】采用NADPH-d组织化学染色法、免疫组织化学法、蛋白免疫印迹（Western blotting）及Griess试剂法，对点带石斑鱼脑组织和视网膜中nNOS的分布与活性及NO含量进行分析。【结果】经NADPH-d组织化学染色后，一氧化氮合成酶（NOS）阳性物质呈蓝色。在点带石斑鱼大脑中，NOS阳性物质位于神经元和神经纤维；在小脑中，NOS分布在颗粒层的颗粒细胞、分子层的神经纤维和浦肯野细胞层的浦肯野细胞；在视网膜中，NOS分布于色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。经免疫组织化学染色后，nNOS阳性物质呈深棕色。在大脑中，nNOS存在于神经元和神经纤维；在小脑中，nNOS分布在颗粒层、分子层和浦肯野细胞层；在视网膜中，nNOS分布在色素上皮层、视锥视杆层、外核层、外网层、内核层、内网层、节细胞层和视神经纤维层。Western blotting检测结果显示，点带石斑鱼脑组织和视网膜中的nNOS在显色后的硝酸纤维素膜上均出现3条免疫印迹条带，对应分子量分别为80、120和130kD。NO含量在点带石斑鱼脑组织和视网膜中分别为17.601±1.743和13.624±1.249µmol/L，nNOS活性在脑组织和视网膜中分别为38.070±3.047和23.748±2.860U/mg。【结论】在点带石斑鱼脑组织和视网膜中均存在nNOS，推测nNOS在点带石斑鱼脑神经及视神经系统生理活动中发挥重要作用。脑组织中的NO含量和nNOS活性均显著高于视网膜，是由于脑组织作为重要的中枢神经，对机体生理功能起重要调节作用。

来源：2021年第12期

《南方农业学报》期刊编辑部

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