南方农业学报

作者：陆鲸冰, 杨润梅, 张飞扬, 曹红利,

关键词：茶树, <i>CsMAPKK3</i>基因, 基因克隆, 生物信息学分析, 表达分析, 逆境胁迫,

【目的】克隆茶树CsMAPKK3基因，并进行表达分析，为探究CsMAPKK3基因的生物学功能及其抗逆分子机制提供理论支持。【方法】以铁观音为材料，采用RT-PCR克隆其CsMAPKK3基因的全长cDNA序列，对其进行生物信息学分析，并采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测其在不同组织及逆境胁迫下的表达情况。【结果】克隆获得的CsMAPKK3基因（GenBank登录号：AUD40506.1）cDNA序列全长1941 bp，包含完整开放阅读框（ORF），长度为1557 bp，编码518个氨基酸残基，蛋白相对分子量为57.52 kD，理论等电点（pI）为5.39，为无跨膜螺旋结构和信号肽的不稳定蛋白，含有多个磷酸化位点，定位于细胞质和细胞核中，属于PKc类型的MAPKK，且具有SPS1、S_TKc等催化结构域，以及D（I/L/V）K激活域和S/T-X3-5-S/T保守域，与中华猕猴桃PSS35243.1亲缘关系最近，且与拟南芥B亚家族聚为一类。CsMAPKK3基因起始密码子上游1714 bp的启动子区序列含有光响应、逆境响应、植物激素和厌氧诱导等相关的顺式作用元件。CsMAPKK3基因在根、茎、叶、花和果中均有表达，其中在茎和果的表达量较高，显著高于在花中的表达量（PP>0.05）。低温胁迫抑制CsMAPKK3基因表达，而脱落酸（ABA）、高盐和干旱胁迫均能诱导CsMAPKK3基因上调表达。【结论】CsMAPKK3基因表达具有组织表达特异性，且参与茶树ABA、高盐、低温和干旱胁迫响应等逆境胁迫的分子调控。

来源：2021年第3期

《南方农业学报》期刊编辑部

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